UNIDAD 2

CRECIMIENTO y FISIOLOGÍA
BACTERIANA
CRECIMIENTO BACTERIANO
• El crecimiento bacteriano implica incremento en el
número de células. La célula bacteriana tiene un
tiempo de vida finito y la especie se mantiene como
resultado del crecimiento continuo de la población.

• El conocimiento de como crecen las poblaciones

bacterianas es útil para el diseño de métodos de
control de microorganismos.

• Las bacterias se multiplican por Fisión Binaria.

 FISIÓN BINARIA
En un cultivo de células como bacilos de Escherichia coli, las células se alargan
hasta alcanzar aproximadamente dos veces su longitud original y luego se
forma un tabique (septo) que separa a la célula en dos células hijas.
La membrana plasmática y la pared celular crecen para adentro en direcciones
opuestas hasta que las dos células hijas se separan.

Durante el tiempo de generación, todos los constituyentes celulares aumentan

proporcionalmente y se dice que están en crecimiento equilibrado. Cada
célula hija recibe un cromosoma completo y suficientes copias de todas las
macromoléculas, monómeros y iones inorgánicos para existir como células
independientes.

El reparto del ADN, depende de la unión de este a la membrana durante la

división y la segregación real de las dos copias es facilitada por la formación
del septo.

En general los tiempos de generación de las bacterias son muy cortos, mas
cortos que en los eucariotas. E. coli tiene un tiempo de generación de 20
minutos. Muchas bacterias crecen entre 0,5-6 horas, otras en varios días o
semanas.
CURVA DE CRECIMIENTO: ETAPAS
 BIOFILMS
• En Europa, las enfermedades infecciosas representan la segunda causa de
mortalidad.
• Actualmente, las enfermedades infecciosas agudas causadas por bacterias
patógenas especializadas como la difteria, tétanos, peste, cólera o la tosferina,
que representaban la principal causa de muerte a principios del siglo XX, han sido
controladas gracias a la acción de los antibióticos y de las vacunas.
• En su lugar, más de la mitad de las infecciones que afectan a pacientes
ligeramente inmunocomprometidos son producidas por bacterias ubicuas,
capaces de producir infecciones de tipo crónico, que responden pobremente a los
tratamientos antibióticos y no pueden prevenirse mediante inmunización.
Ejemplos de estas infecciones son la otitis media, endocarditis de válvulas
nativas, infecciones urinarias crónicas, infecciones de próstata, osteomielitis y
todas las infecciones relacionadas con implantes.
• El análisis directo de los implantes y tejidos de estas infecciones muestra
claramente que en la mayoría de los casos la bacteria responsable de la infección
crece adherida sobre el tejido o el implante formando comunidades de bacterias a
las que se les ha denominado “biofilms”. Dentro del biofilm, las bacterias están
protegidas de la acción de los anticuerpos, del ataque de las células fagocíticas y
de los tratamientos antimicrobianos.
 BIOFILMS
• Los biofilms se definen como comunidades de microorganismos que crecen
embebidos en una matriz de exopolisacáridos y adheridos a una superficie inerte
o un tejido vivo .
• Aunque la composición del biofilm es variable en función del sistema en estudio,
en general, el componente mayoritario del biofilm es el agua, que puede
representar hasta un 97% del contenido total. Además de agua y de las células
bacterianas, la matriz del biofilm es un complejo formado principalmente por
exopolisacáridos. En menor cantidad se encuentran otras macromoléculas como
proteínas, DNA y productos diversos procedentes de la lisis de las bacterias.
• El crecimiento en biofilms representa la forma habitual de crecimiento de las
bacterias en la naturaleza. ¿Quién no ha observado el material mucoso que
recubre un jarrón en el que hemos tenido depositadas flores, el material
resbaladizo que recubre las piedras de los lechos de los ríos, los cascos de los
barcos o la superficie interna de una tubería? Otro ejemplo cotidiano de biofilm lo
constituye la placa dental.
• La capacidad de formación de biofilm no parece estar restringida a ningún grupo
específico de microorganismos y hoy se considera que bajo condiciones
ambientales adecuadas todos los microorganismos son capaces de formar
biofilms.
 1y2- Adherencia sobre la superficie.
3- División celular. las células hijas se extienden
alrededor del sitio de unión, formando una
microcolonia similar a como ocurre durante el
proceso de formación de colonias en placas de agar.
3- En una etapa posterior la bacteria comienza a
ETAPAS EN EL secretar un exopolisacárido que constituye la matriz
PROCESO DE del biofilm y forma unas estructuras similares a setas
FORMACIÓN DEL entre las cuales se observa la presencia de canales.
BIOFILM 4- Finalmente, algunas bacterias de la matriz del
biofilm se liberan del mismo para poder colonizar
nuevas superficies cerrando el proceso de desarrollo
de formación del biofilm
 BIOFILMS EN PROCESOS
INFECCIOSOS
• Colonización de sustratos por bacterias adhesivas formadoras de biofilm.
• Presencia de un biomaterial, tejido dañado, o sustrato de tejido relativamente
acelular.
• Iniciación de infección por pequeños inóculos bacterianos.
• Resistencia mediada por el biofilm bacteriano a los mecanismos de defensa del
huésped y a la terapia antibiótica.
• Infecciones causadas con mucha frecuencia por Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis y Pseudomonas aeruginosa.
• Infecciones persistentes por resistencia al tratamiento antimicrobiano.
• Presencia de inflamación, tejido celular dañado, y necrosis en la interfase tejido-
implante (zona fibroinflamatoria, inmunoincompetente) generado por partículas
debridadas del biomaterial.
• Alteración de la respuesta mediada por células y posiblemente humoral del
huésped por la presencia del biomaterial y bacterias
 FISIOLOGÍA BACTERIANA
Las Bacterias, como todas las células, requieren para multiplicarse:
• Materiales para la síntesis de sus elementos estructurales y
para su metabolismo.
• Energía: en algunas bacterias esta puede obtenerse de forma
sencilla, aprovechando la luz, u oxidando sales minerales; o de
forma compleja, como es el caso de los patógenos por oxidación o
por fermentación de compuestos orgánicos mas complejos.
• Condiciones ambientales adecuadas: temperatura, pH, presión
osmótica, etc.
En algunas bacterias los materiales para la síntesis de sus
biomoléculas pueden obtenerse a partir de elementos muy simples (ej:
CO2, nitratos, etc) y en otras se requieren moléculas preformadas
mucho mas complejas que han de obtenerse de la degradación de
macromoléculas complejas (ej: de proteínas). A este tipo de bacterias
que para crecer en laboratorio necesitan de medios de composición
compleja, se las denomina “bacterias exigentes”
 METABOLISMO
Conjunto de reacciones químicas que se llevan cabo en las
células, para cumplir con sus procesos vitales. Implica
reacciones catabólicas y/o anabólicas.
• Catabolismo
Procesos que participan en la degradación de
compuestos en productos más pequeños; las reacciones
enzimáticas que toman parte de denominan reacciones
catabólicas.

• Anabolismo
Reacciones mediante las cuales los m.o. construyen o
sintetizan sustancias químicas complejas a partir de
moléculas simples; las reacciones enzimáticas que
toman parte se denominan reacciones biosintéticas y
requieren energía. El ATP formado en las reacciones
catabólicas es empleado en el anabolismo.
 CRECIMIENTO MICROBIANO:
REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES
Para que un microorganismo pueda llevar a cabo su
metabolismo y reproducirse necesita

NUTRIENTES

Elementos Condiciones
Elementos
Energéticos y Fisicoquímicas
Específicos
Constitutivos Adecuadas
 ELEMENTOS ENERGÉTICOS CONSTITUTIVOS
AGUA 80-90% bacteria.

Fosfato, Sulfato, Ca+2, Na+, Cl-.

IONES Oligoelementos (Mn, Zn, Cu, Co, Ni, B, etc.).
MINERALES Sales minerales mantienen el equilibrio iónico,
elementos metabólicos enzimáticos, etc.

FUENTE DE Alimento energético principal.

CARBONO Indispensable para biosíntesis.

FUENTE DE Principalmente iones amonio.

NITRÓGENO Lo obtienen de aminoácidos, reducción de nitratos, etc.
 ELEMENTOS ESPECÍFICOS
Hay bacterias que no son capaces de sintetizar metabolitos
esenciales  FACTORES DE CRECIMIENTO

VITAMINAS: Precursores de coenzimas

FACTORES DE
CRECIMIENTO AMINOÁCIDOS: Precursores de proteínas
BASES PÚRICAS y PIRIMÍDICAS: Precursores Ácidos
nucleicos

PROTÓTROFOS: Capaces de sintetizar metabolitos

esenciales
HETEROTROFOS
AUXÓTROFOS: Necesitan factores de crecimiento
 CONDICIONES FISICOQUÍMICAS
(AMBIENTALES)

 CONCENTRACIÓN H+ (pH)

 TEMPERATURA

 PRESIÓN OSMÓTICA

 PRESENCIA DE O2

 PRESENCIA CO2

 HUMEDAD
CLASIFICACIÓN SEGÚN LA FUENTE DE ENERGÍA
FOTÓTROFOS Radiaciones solares (energía luminosa)
Fotolitótrofos: Radical dador e- inorgánico
Fotoorganótrofos: Radical dador de e- orgánico

RH2: Radical dador de e-

R: Radical aceptor de e-
Pi: Fosfato inorgánico
QUIMIÓTROFOS Reacciones químicas (óxido-reducción)
Quimiolitótrofos: Radical dador e- inorgánico
Quimioorganótrofos: Radical dador de e- orgánico

Principales bacterias del

organismo humano
 FUENTE DE CARBONO
AUTÓTROFOS
Sintetizan sus constituyentes a partir de
compuestos simples (H2O, CO2, sales minerales)

Autótrofos Estrictos: No utilizan la materia orgánica

Autótrofos Facultativos: Pueden utilizar materia orgánica

HETEROTROFOS Sólo pueden sintetizar constituyentes a partir de

compuestos orgánicos
 CLASIFICACIÓN SEGÚN FUENTE
DE ENERGÍA Y DE CARBONO

Fuente de carbono

Fuente de carbono Fuente de carbono

inorgánica orgánica

Fuente de
Luz Fotoautótrofos Fotoorganótrofos
energía

Energía
Quimioautótrofos Quimioorganótrofos
química
CLASIFICACIÓN SEGÚN EL ACEPTOR FINAL DE ELECTRONES

AEROBIOS Utilizan el O2 como aceptor final de e-

OBLIGADOS: requieren O2 (21% o más)
MICROAEROFÍLICOS: requieren O2 pero en bajas concentraciones
(5-10%)

ANAEROBIOS Utilizan otra molécula inorgánica distinta del

O2 como aceptor final de e-
OBLIGADOS: no toleran O2, mueren en su presencia
FACULTATIVOS: viven en presencia o ausencia de oxigeno
AEROTOLERANTES: toleran el O2 pero no lo usan para su
crecimiento ni obtención de energía
FERMENTADORES Utilizan una molécula orgánica como aceptor final
de e-
HOMOFERMENTATIVOS: un solo tipo de producto orgánico
HOMOFERMENTATIVOS: producen diferentes tipos de sustancias
orgánicas
 ACEPTOR FINAL DE ELECTRONES
(Respiración - Efecto del O2)

Aerobios Anaerobios
obligados aerotolerantes
Anaerobios
estrictos Microaerófilos
Anaerobios
facultativos
FERMENTACIÓN
Y RESPIRACIÓN
ACEPTOR FINAL

ACEPTOR FINAL
RESPIRACIÓN
AEROBIA
FERMENTACIÓN
-No requiere oxígeno
-10 reacciones, cada una
catalizada por una enzima
diferente.

-Aceptora de electrones:
Molécula orgánica.

-2 moléculas de ATP por

cada glucosa.

-El segundo estadío provee

NAD+ y NADP+ para que
continúe el proceso.

HETEROFERMENTATIVOS

HOMOFERMENTATIVOS
 COMPARACIÓN ENTRE RESPIRACIÓN AERÓBICA,
ANAERÓBICA Y FERMENTACIÓN
PROCESO CONDICIONES ACEPTOR FINAL MOLÉCULAS
DE ELECTRONES DE ATP
PRODUCIDAS
POR
MOLECULA
DE GLUCOSA
36
RESPIRACIÓN AEROBIOS OXÍGENO (EUCARIOTAS)
AEROBIA MOLECULAR 38
(PROCARIOTA
S)
UNA SUSTANCIA MENOS DE 38
INORGÁNICA:
RESPIRACIÓN ANAEROBIOS -NO3- PASA A NO2, N2O o
Y MAS DE 2
ANAERÓBICA N2
-SO4– PASA A H2S
-CO4- PASA A CH4

ANAEROBIOS O UNA SUSTANCIA 2

FERMENTACIÓN AEROBIOS ORGÁNICA
 pH (Potencial hidrógeno)
Según el pH que toleran, los microorganismos se clasifican:

ACIDÓFILOS: pH óptimo 7

NEUTRÓFILOS: pH óptimo ≈7

Mayoría de las bacterias patógenas

humanas

BASÓFILOS o ALCALÓFILOS: pH
óptimo 7
 TEMPERATURA
• La mayor parte de los mo crecen bien a las temperaturas de los
seres humanos. Existen bacterias que se desarrollan en
temperaturas extremas. La mayoría crece dentro de un rango
limitado de crecimiento y las temperaturas máximas y mínimas
solo están separadas por 30°C. El crecimiento es deficiente a las
temperaturas altas y bajas dentro de su rango.
• Cada especie crece a una Temperatura Mínima (la mas baja a la
cual crecerá), la Óptima (temperatura a la cual crece mejor) y la
Máxima (temperatura mas elevada a la cual es posible el
crecimiento). El crecimiento disminuye bruscamente en
temperaturas mayores que la óptima, debido a que se inactivan las
enzimas.
• La refrigeración se basa en que a bajas temperaturas el crecimiento
disminuye.
TEMPERATURA
Según la temperatura que toleran, los microorganismos se clasifican:

• PSICRÓFILOS Rango: T< 0-20°C; Tóptima < 15oC

Microorganismos marinos

• PSICRÓTROFOS O PSICRÓFILOS FACULTATIVOS

Rango: T< 0-35°C; Tóptima < 20-30oC
Crecen en el refrigerador

• MESÓFILOS Rango: T=15-45° C; Tóptima= 30-40°C

Mayoría de los microorganismos (suelo, aguas, patógenos)

• TERMÓFILOS Rango: T=40-70°C; Tóptima= 55-65oC

Enzimas estables al calor

• HIPERTERMÓFILOS Rango: T=80-113°C; Tóptima > 90oC

Aguas termales
Las temperaturas bajas disminuyen
las tasas de reproducción
microbiana lo que constituye el
principio básico de refrigeración.
Existen algunas excepciones como
las bacterias psicrófilas. Estas
crecen muy lentamente a bajas
temperaturas, pero con el tiempo
pueden degradar los alimentos,
alterando su apariciencia, su olor,
color, o sabor.

Los mesófilos incluyen a casi todos

los microorganismos comunes que
causan deterioro y enfermedad.

Las bacterias termófilas en general

no se consideran un problema de
salud pública
 PRESIÓN OSMÓTICA
• Casi todos los nutrientes que obtienen los mo están disueltos en el
agua circundante. Por ende los mo requieren agua para crecer ya
que están constituídos por un 80-90% de agua.
• La presión osmótica elevada tiene el efecto de eliminar el agua
necesaria en una célula. Cuando un mo se encuentra en un medio
hipertónico (mayor concentración de solutos que la célula), el agua
celular se difunde hacia el exterior, provocando plasmólisis
(pérdida de agua y disminución del citoplasma). El crecimiento
celular se inhibe cuando la membrana plasmática se separa de la
pared.
• El agregado de sales (u otros solutos) a una solución aumenta
la presión osmótica, y este principio puede utilizarse para
conservar alimentos. Las concentraciones elevadas de sal o azúcar
en alimentos, producen la salida de agua en las células microbianas
presentes y evitan su crecimiento. Ej: pescado salado, la miel, leche
condensada, escabeches, etc.
Mayor parte de microorg. crecen en soluciones de cloruro Sódico de o.1-1 %: NO HALÓFILOS.
Turgente
 CONDICIONES FISICOQUÍMICAS
(AMBIENTALES)

 PRESENCIA CO2: Necesario en pequeñas cantidades. Proviene de

la atmósfera o de reacciones de la misma célula. Algunos
microorganismos requieren un suministro extra.

 HUMEDAD y DESECACIÓN: Precisan en general elevada cantidad

de agua y un ambiente húmedo para su desarrollo. Algunos
microorganismos pueden sobrevivir en ambientes secos o de baja
humedad (esporos, etc).
 MEDIOS DE CULTIVO
Definición: soluciones acuosas que contienen
concentraciones adecuadas de nutrientes que
proporcionan al microorganismo los elementos
requeridos para su crecimiento y multiplicación.

Permiten:
- aislar las diferentes especies microbianas
- proceder a su identificación
 MEDIOS DE CULTIVO
La composición precisa de un medio adecuado dependerá de la
especie que se quiere cultivar
Necesidades nutricionales variables
Requerimientos:
• macroelementos (C, O, H, N, S, P, K, Ca, Mg, Fe)

• micro u oligoelementos
(Mn, Mo, Zn, Cu, Co, Ni, V, B, Cl, Na, Si)
• factores de crecimiento específicos
(suero, sangre, extracto de levadura, etc.)

Además existen requerimientos en cuanto a: temperatura,

humedad y presión de oxígeno, pH.