VÍRUS

Definição e estrutura viral

Ana Cláudia Franco

L a b Vi r / I C B S
 Virologia x outras ciências
 Bacteriologia, micologia, parasitologia, imunologia

 Virologia: visualizamos o efeito do vírus na célula

 Todos os vírus causam danos?

Colonizada
Vírus da
Curvularia
tolerância
Thermal
termal da
Tolerance
Temperatura Curvularia
Virus
55oC

Não
colonizada

Curvularia
protuberata
 Vírus influenciam a dinâmica das
populações!!!!
 Animais, plantas, microorganismos, fitoplâncton....

 Estas infecções resultam em lise celular e liberação de

novas partículas virais

 Controlam a população, principalmente em aumentos

sazonais (“spring blooms”)

Rhodes et al., 2008

 Vivemos em uma “nuvem” de vírus
• Nós comemos e respiramos bilhões de vírus regularmente
• Nós carreamos genomas virais como parte do nosso próprio
genoma

• Vírus infectam todas as formas de vida

 Vírus fazem parte da microbiota?
• HHV‐1, HHV‐2, VZV, EBV, HCMV, HHV‐6, HHV‐7, HHV‐8
• Estes vírus permanecem no organismo por toda a vida
 Cada uma de nossas células está infectada
por vírus
• Retrovírus endógenos: elementos virais derivados de
retrovírus
• Traços de infecções virais ocorridas a milhares de anos
integrados no genoma humano
• Algumas famílias são ativas (HERV-K) e continuam se
replicando no genoma humano

Dewannieux et al., 2006

O que é um vírus?
 O que é um vírus?

• Microorganismos muito pequenos, infecciosos

• Parasito intracelular obrigatório

• “Partículas químicas” que não podem se reproduzir

sozinhas

• Necessitam de um hospedeiro celular

Os vírus são muito pequenos
VÍRUS GRANDES E PEQUENOS
 Os vírus gigantes
• Mimivirus, Mamavirus. Megavirus,....

• Infectam protozoários

• Genomas de 1,2 a 2,8 Mb!!!!!

• Sputnik: virófago

• Alterando o conceito sobre vírus!!!

Raoult et al., 2004; La Scola et al., 2008; Philippe et al., 2013

O vírus dentro do vírus: Sputnik
 Classificação dos vírus

• Natureza e sequencia de ácido nucleico

• Simetria ou forma do capsídeo

• Presença ou ausência de envelope

• Dimensão do virion ou capsídeo

 Classificação dos vírus

• ICTV: Comitê Internacional de Taxonomia de Vírus

• + de 40.000 vírus isolados de bactérias, plantas,
animais e alocados em 7 ordens, 96 famílias, 420
gêneros e 2618 espécies
• No oceano há cerca de 1030 vírus
 Estrutura de um vírus

• Ácido nucleico: DNA ou RNA*

• Capsídeo: do latim “capsa” significa caixa
• Nucleocapsideo: ác nucleio + capsídeo
• Matriz: proteína que preenche o espaço entre o capsideo
e o envelope
• Envelope: membrana viral
 Derivado da membrana do hospedeiro
 Estrutura de um vírus

• Virion: partícula viral infecciosa

 Ácido nucleico

Características dos Genomas Virais

• DNA ou RNA
• Fita dupla ou simples
• Linear ou circular
• Segmentado ou não
• Sequência de aminoácidos
 DNA RNA

Fita simples + ou -

Fita dupla Segmentado

Dupla fita segmentado

Circular
 Capsídeo

 Composição: proteica
 Montagem: em diferentes setores celulares, por auto-
polimeração
 Simetria do nucleocapsídeo

• Icosaédrica, helicoidal, complexa

Adenovírus Vírus da Raiva

DNA, ñ envelopado RNA, envelopado
 Funções do capsídeo

• Proteção e empacotamento do ácido nucleico viral

• Interação com a membrana celular para formação do
envelope
• Liberação do genoma
• Transporte do genoma para o sítio apropriado
• Conferem uma característica metaestável
 Os capsídeos são metaestáveis
• Devem proteger o genoma (estável)
• E liberá-lo rapidamente durante a infecção viral
(instável)
Quebra-cabeças
 Formação do envelope
• Derivado da membrana plasmática (bi-camada fosfolipídica)
 Genoma viral não codifica lipídios

• Envelope é formado durante o brotamento do nucleocapsídeo através

de uma membrana celular
 Glicoproteínas do envelope
• Integram a membrana
• Possuem um domínio externo e um interno e região TM

 Externo: ligação, sítios antigênicos, fusão

 Interno: montagem, ancoragem
 Glicoproteína viral

Receptor celular

 Conferem a característica de
especificidade
aos vírus
Replicação viral
 VÍRUS
Replicação viral
 Estratégias comuns entre os vírus

1. Os vírus empacotam o seu genoma

2. Os vírus contém a informação para iniciar e completar um ciclo

de infecção num hospedeiro suscetível

3. Transcrevem o mRNA que será traduzido pelos ribossomos do

hospedeiro

4. São parasitas da maquinaria de síntese proteica da célula

 “Entendendo” os vírus

 Vírus dependem de seus hospedeiros para sobreviver

 Se são muito bem sucedidos e matam seus hospedeiros,

eles podem ser eliminados

 Se eles forem muito passivos e a defesa do hospedeiro

impedir o seu crescimento, eles podem ser eliminados
 Vírus replicam num ambiente hostil

 Qual o objetivo da replicação?

 Produzir progênie viral viável

 Consequências

 “Nenhuma” (maioria dos vírus)

 Doença (Hepatites virais)

 Morte do hospedeiro (Ebola)

 Replicação

 Replicação em biologia
 Síntese de moléculas

de ácidos nucléicos

 Em virologia
 Todo o processo de
multiplicação viral
 Alguns conceitos

 Infecção produtiva
 Produção de progênie viral viável
 Infecção abortiva
 Ciclo replicativo interrompido
 Susceptibilidade (receptor)
 Capacidade das células de serem infectadas
 Permissividade (enzimas)
 Ocorrência de multiplicação viral
 Alguns conceitos

 Células suscetíveis e permissivas

 Suportam o ciclo replicativo completo
 Penetração + etapas intracelulares

 Céls não suscetíveis ou não permissivas

 Faltam receptores/enzimas para a entrada/replicação
 Semipermissivas
 Exceção = transfecção (processo artificial)
 Outros conceitos

 Espectro de hospedeiro
 Conjunto de espécies animais ou de diferentes células
 Tropismo
 Predileção por células ou tecidos
 Presença de receptores
 Ex.: H5N1 se liga aos receptores de ác siálico-galactose: aparelho
respiratório
 Ácido siálico e influenzavírus

Memb
celular

Ligação α-2,3 (aves)

• Humanos: ligação α-2,6

• Suínos: possuem ambas as ligações
 Etapas da replicação

1. Adsorção
2. Penetração
3. Desnudamento
4. Expressão gênica (transcrição e tradução)
5. Replicação do genoma
6. Montagem
7. Liberação
 1
• Divisão 2

meramente didática 3

1. Adsorção
2. Penetração 5
3. Desnudamento
4. Expressão gênica
5. Replicação do genoma
6. Montagem 6
7. Liberação
7
Fases da infecção viral
Vírus lítico
 Vírus lítico

http://www.sciencemag.org/content/suppl/201
0/01/19/science.1183173.DC1/1183173s1.
mov
 Replicação no hospedeiro

 https://www.youtube.com/watch?v=Rpj0emEGShQ
 Adsorção

 Ligação específica das partículas víricas na superfície

das células hospedeiras

Vírus Hospedeiro
Proteínas de superfície dos Receptores celulares
vírions (VAPs): Proteínas (glicoproteínas)
- Vírus nú: proteínas do Carboidratos
capsídeo
- Vírus envelopados:
glicoproteínas
Adsorção
 Adsorção

 Vírus que utilizam receptores específicos

 Rinovírus, poliovírus, FMDV
 Vírus que utilizam receptores alternativos
 Herpesvírus, togavírus (rubéola)
 Vantagem evolutiva???
 Maior espectro de hospedeiros e células

 Receptores virais
 Vírus DNA (tabela 2) e RNA (tabela 3)
 Adsorção
Tabela 2 – Receptores celulares e mecanismos de penetração dos principais vírus DNA

Família Vírus Receptor viral Forma/local de Penetração

 Adsorção
Tabela 3 – Receptores celulares e mecanismos de penetração dos principais vírus RNA
Família Vírus Receptor viral Forma/local de Penetração
 Adsorção

 Co-receptores: auxiliam na interação

 HIV: o complexo gp120 – gp41 vai se ligar ao receptor CD4

 E os receptores de citocinas vão atuar como co-receptores

celulares
 Penetração
Passagem do vírus pela
membrana plasmática

A) Fusão com a memb. plasmática

B) Fusão após endocitose mediada

por clatrina

C) Fusão após endocitose mediada

por caveolina

D-E) Penetração após endocitose

mediada por lipídios
Penetração
 Desnudamento
 Série de eventos que ocorre após a penetração

 Exposição do genoma para transcrição / tradução

 Genoma fica acessível às enzimas

 Vírus DNA: penetração do genoma nos poros nucleares

 Vírus
RNA

Vírus
DNA
 EXPRESSÃO GÊNICA

 SÍNTESE DE GENOMAS

 SÍNTESE DE RNA MENSAGEIRO

 Expressão gênica
 Os genomas virais de DNA ou RNA são estruturalmente
diversos
 linear
 circular
 segmentado
 Fita única de polaridade (+)
 Fita única de polaridade (-)
 Fita dupla
 Fita dupla parcial
Qual informação é codificada em um genoma viral?
 Produtos de genes e sinais de regulação para:

 A replicação do genoma viral

 Montagem e empacotamento do genoma

 Regulação do ciclo de replicação

 Modulação de defesas do hospedeiro

 Disseminação para outras células e hospedeiros

Qual informação NÃO é codificada em um genoma
viral?
 Não codificam a síntese completa de proteína

 dependem da maquinaria celular

 Não codificam proteínas envolvidas na produção de

energia ou na síntese de membranas

 Não codificam centrômeros ou telômeros encontrados

nos cromossomos
 Qual a estratégia comum entre os vírus
DNA ou RNA
 Os genomas virais devem produzir mRNA que pode
ser lido pelos ribossomos das células hospedeiras
 Replicação vírus DNA
 Replicação no núcleo
 Exceção: poxvírus (replicam no citoplasma)

 DNA fita dupla: dsDNA (Classe I) maioria

 DNA fita simples: ssDNA (Classe II)

 DNA parcialmente dupla: pdsDNA (Classe VII)

 Classe I: DNA fita dupla
Traduzido

Transcrito Transcrito

Replicado

• Genoma é copiado pela DNA polimerase hospedeiro (polioma, papiloma)

• Alguns possuem DNA polimerase viral (Adeno, herpes)
 Classe I – DNA fita dupla
Traduzido

Transcrito Transcrito

Replicado

• Genes precoces: codificam proteínas não estruturais relacionadas

com a interação com o hospedeiro
• Genes intermediários: codificam proteínas não estruturais
relacionadas com a replicação
• Genes tardios: codificam proteínas estruturais envolvidas na
montagem
 Classe II: DNA fita simples
Traduzido

Transcrito

Replicado
Replicado

• NÃO codificam a DNA polimerase

• Toda replicação é realizada pela polimerase do hospedeiro

TT virus
**Vírus adeno-associado: Dependovirus)
 Classe II - continuação
Traduzido

Transcrito

Replicado
Replicado

• Mais dependentes da maquinaria celular

• O genoma de DNA fita simples é convertido em fita dupla pela
DNA polimerase celular
• A RNA polimerase celular transcreve os mRNA virais
 Classe VII: DNA fita parcialmente dupla

Vírus da Hepatite B

proteína RNA

• Genoma ligado a proteínas

• Genoma ligado a uma pequena sequencia de RNA
• Um fita completa e a outra parcial
 Classe VII - continuação
Traduzido

Transcrito

Replicado Replicado
Replicado
Transcrito

Transcriptase reversa

•Replicação parte núcleo e parte no citoplasma

•RNA polimerase viral (transcriptase reversa)
•Expressão gênica: inicial, intermediaria e tardia
•Quebra do dogma da biologia
 DNA => RNA => X Proteínas
 Replicação de vírus RNA

 Replicação no citoplasma RNA fita simples

Maioria
 * Ortomixovírus: no núcleo

 As células não possuem a RNA polimerase dependente de

RNA viral
 Enzima é codificada pelo genoma viral
 Vai sintetizar o genoma de RNA e o mRNA viral
 mRNA será lido pelos ribossomos da célula
 Vírus RNA

 Vírus RNA (+): genoma “infeccioso”

 Vírus RNA (+) = mRNA

 Vírus RNA (-): não “infeccioso”

 RNA fita simples (+): ssRNA (+) (Classe IV)
 RNA fita simples (-): ssRNA (-) (Classe V)
 RNA fita dupla: dsRNA (Classe III)
 RNA fita simples (+) com DNA intermediário: ssRNA-RT
(+) (Classe VI)
 Classe IV: RNAss +
Traduzido

Replicado Replicado

Coronavírus: SARS

Febre amarela, dengue, BDVD, Hepatite C

Febre aftosa, Rinovírus, Enterovírus

Encefalite equina, rubéola

 Classe IV – continuação
Traduzido

Replicado Replicado

• RNA polimerase viral: replica o genoma num intermediário de

RNA (-) que é replicado em RNA (+)
 Classe V: RNAss -
Replicado Traduzido

Replicado
Replicado

Influenzavírus

Parainfluenza, Sarampo, hRSV,

Pneumo e Metapneumovirus

Vírus da raiva
 Classe V: RNAss -
Replicado Traduzido

Replicado
Replicado

• Trazem a RpRd
• RNA (-) => RNA (+) = mRNA
• mRNA sem CAP e cauda de poli A (vai ao núcleo: influenza)
 Classe III: RNAds

Replicado Traduzido

• Genoma linear ou
Replicado
segmentado
• Reoviridae: 10 a 12
segmentos (Rotavírus)
 Classe III: continuação

Replicado Traduzido

Replicado

• Carregam a polimerase viral

• Produção de mRNA
• Transcrição primária: proteínas não estruturais
• Transcrição secundária: proteínas estruturais
 Classe VI: RNA + com DNA intermediário
Traduzido
Transcrito
Replicado Replicado

Transcriptase
reversa provírus

• Única família: Retroviridae

• HIV e HTLV (vírus T-linfotrófico humano)
• Replicação no citoplasma e núcleo
• Carregam: RT, integrase, protease
 Montagem dos vírions

 Ocorre no final do ciclo replicativo

 O vírus adquire a capacidade infectiva, ou seja, ocorre a

maturação das partículas

 Nos vírus envelopados ocorre a aquisição do envelope

 https://www.youtube.com/watch?v=Ofd_lgEymto

 https://www.youtube.com/watch?v=X-8MP7g8XOE
 Saída da célula

• Vírus nú já sai pronto do citoplasma (RNA) ou núcleo (DNA)

• Liberados quando ocorre a destruição das células infectadas
 Saída da célula

• Envelope adquirido das membranas celulares internas

- Retículo endoplasmático e complexo de Golgi contendo as glicoproteínas
virais
-Os herpesvírus podem adquirir o envelope da membrana nuclear
 Saída da célula

• Envelope é adquirido da membrana plasmática

Liberação por exocitose com ou sem lise celular