INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

INGENIERÍA EN SISTEMAS AMBIENTALES

BIOQUÍMICA FUNDAMEMTAL

PRÁCTICA N° 2
CURVA TIPO DE AZÚCARES REDUCTORES

GRUPO 4AM01

Sección: 2
Cordero Vázquez Martha Patricia
López González Dulce Sandra

PROFESORAS
Dra. Doris Neri Cortés

M. en C. Karina Martínez Guzmán

M. en C. Aura Patricia Hernández Olicón

Fecha: 26/09/19
INTRODUCCIÓN

Distintos métodos de análisis de material biológico se basan en hacer reaccionar la sustancia, que
se desea analizar, con otras sustancias (reactivos) para producir una solución con color, de tal
forma que la intensidad del color pueda ser usada como una medida de la concentración de dicha
sustancia.

Por otra parte si se diluye sucesivamente una sustancia colorida y de cada dilución, se mide el
valor de absorbancia a una longitud de onda óptima, al representar gráficamente estos valores
(Absorbancia vs Concentración), se obtiene una curva de calibración de la sustancia.

A partir de la curva de calibración de una sustancia, es posible conocer

la concentración de una muestra, para obtener la concentración se mide
la absorbancia a la misma longitud de onda y, con base en el valor
obtenido se interpola la concentración.

(Quesada, 2007)

Para la cuantificación de azúcares reductores se utilizó el método de

DNS. Este procedimiento se fundamenta en la reacción de los grupos
reductores de los azúcares con el reactivo oxidante ácido
dinitrosalicílico (DNS). El reactivo consiste en una disolución formada
por los siguientes compuestos: ácido dinitrosalicílico (ácido 2-hidroxi-3,5-dinitrobenzóico), que
actúa como oxidante; Sal de Rochelle (tartrato sódico-potásico), que impide la disolución de
oxígeno en el reactivo y hidróxido sódico, que aporta el medio requerido para que se produzca la
reacción redox. Para este método se adiciona la misma cantidad de DNS a todas las muestras, de
tal forma que a mayores concentraciones de azúcares reductores se produce una mayor
coloración en la muestra. Estas diferencias de coloración pueden determinarse por
espectrofotometría visible, a longitud de onda de 540 nm. (Bello et al, 2006)

OBJETIVO

Obtener una curva de calibración de azúcar reductor, mediante la cual se puedan transformar las
lecturas de absorbancia obtenidas en los experimentos de cinética enzimática, en micromoles de
azúcar reductor.
RESULTADOS
Tabla 1. Resultados de Absorbancias a λ=540 nm y μmoles de azúcar reductor /mL.

Tubos
1 2 3 4 5
Absorbancia
0.044 0.044 0.184 0.505 0.591
λ= 540 nm
(μmoles)
Azúcar 1 2 4 8 10
reductor /mL

CÁLCULOS

 Tubo 1

 Tubo 2

 Tubo 3
 Tubo 4
 Tubo 5

CURVA TIPO DE AZÚCAR REDUCTOR

 Absorbancia
Absorbancia vs μmoles de azúcar
(λ=540nm)
0.7 reductor y = 0.0663x - 0.0579
R² = 0.985
0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 2 4 6 8 10 12
Concentración de azúcar reductor (μmoles /mL)

Ecuación de la recta: Y= 0.0663x -0.0579, R2=0.985 y coeficiente de

correlación igual a r=0.99.

DISCUSIÓN

CONCLUSIÓN

BIBLIOGRAFÍA

 Bello, G. D., Carrera, B. E., y Díaz, M. Y. (2006). Determinación de azúcares reductores totales en
jugos mezclados de caña de azúcar utilizando el método del ácido 3,5 dinitrosalicílico. ICIDCA. Sobre
los Derivados de la Caña de Azúcar.
 Quesada Mora, S. (2007). Manual de experimentos de laboratorio para Bioquímica. Primera edición,
Editorial Universidad Estatal a Distancia. San José, Costa Rica.

https://www.researchgate.net/publication/294724783_Cuantificacion_de_azucares_reductores_en_las_cascara
s_de_naranja_y_banano

https://www.academia.edu/23826585/Curva_tipo_de_azucares_reductores