Introducción

La aceptación de que la glucólisis se controla fundamentalmente por la actividad de la

fosfofructoquinasa se produjo en gran parte gracias a un descubrimiento realizado hace
más de un siglo por Louis Pasteur. Cuando los cultivos anaerobios de levaduras que
metabolizaban glucosa se exponían al aire, se reducía drásticamente la tasa de utilización
de glucosa. Quedó claro que este fenómeno, el efecto Pasteur, comporta la inhibición de la
glucólisis por el oxígeno. Este efecto tiene cierta lógica desde el punto de vista biológico,
puesto que se obtiene mucha más energía a partir de la oxidación completa de la glucosa
que sólo a partir de la glucólisis (Mathews, 2002). El efecto Pasteur se produce en
microorganismos capaces de realizar metabolismo fermentador y respiración aerobia
(anaerobios facultativos). En presencia de O2 utilizan la respiración aeróbica, pero pueden
emplear la fermentación si no hay O2 libre en su medio ambiente. Pasteur fué el primero en
observar que el azúcar es convertido en alcohol y CO2 por levaduras en ausencia de aire,
y que en presencia de aire se forma muy poco o nada de alcohol, siendo el CO2 el principal
producto final de esta reacción aeróbica. Este efecto indica el mayor rendimiento energético
de la respiración sobre la fermentación (Ramírez, 2002).
Reactivos de materiales

Nombre Formula PM PE PF Aspecto y Densidad Solubilidad Toxicidad

color
Glucosa C6H12O6 88,01 100 0°C Liquido 1.54 g/cm3 Muy Contacto ocular:
g/mol °C incoloro soluble Enjuagar
inmediatamente
con abundante
agua durante 10 ó
15 minutos.
Contacto dérmico:
Eliminar la ropa
contaminada y los
residuos con agua.
Inhalación:
Irritación.
Reactivo - - - 191 Solido 1.8 g/cm³ Poco Puede ser nocivo
de °C blanco soluble si se inhala.
benecdict Provoca una
irritación del tracto
respiratorio.
Nocivo si es
absorbido por la
piel. Provoca
irritación de la piel,
provoca irritación
de ojos

Esquemas
Esquema Nº1, preparación de la levadura
 Pesar 100g de Agregar 100mL de
levadura seca agua

Calentar a 37ºC por

5 minutos

Esquema Nº2, fermentación

En 8 tubos agregar Diluir el

Decantar el
5mL levadura + sobrenadante con
sobrenadante y
2,0mL glocusa al 3mL de agua
medir 1mL
10% destilada

4 en condicion Anadir 2 gotas de

Centrigugar por 5
anaerobica agrega esta solucion a 2mL
minutos
aceite mineral de benedict

Ebullir por 3 min y

4 en condicion Elimar el aceite +
comparar segun la
aerobicas 2mL de NaF
intensidad

Retirar los tubos a

Colocar los 8 tubos Comparar con los
los 10,20,20 y 45
en baño a 37ºC blancos
minutos

Resultados
Discusión
Según (Rosas,2012) el efecto Pasteur es un efecto de inhibición de la fermentación
alcohólica debido a la participación de oxígeno (O2). En este experimento se prepararon 4
tubos en condiciones aerobias y anaerobias, los cuales fueron sometidos a calor,
posteriormente, se les realizo la prueba de benedict en distintos tiempos, con la finalidad
de observar el consumo de glucosa. La prueba de Benedict identifica azúcares reductores
(aquellos que tienen su OH anomérico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y
celobiosa (Mendez,2015). Como se logra observar en la imagen presente en los resultados,
a los 10 minutos, se presentó una coloración turbia con la reacción con benedict, la cual
indica una concentración moderada de glucosa en ambos tubos, mientras que a los 35
minutos se logró observar una coloración azul la cual nos indica que existe una menor
concentración de glucosa en la muestra, esto se debe a que porque, según (Vergara, 2004)
el benedict identifica los azucares reductores presentes por eso da la coloración rojo ladrillo,
lo que indica que se encuentran en bastante concentración. Este color verde azulada indica
que hay poca presencia de azucares reductores en la solución. La glucosa se encuentra en
menor cantidad aquí porque las soluciones azucaradas fermentan cuando organismos
microscópicos y heterótrofos como las levaduras, se encuentran en ellas. Las levaduras
tienen la capacidad para realizar la descomposición mediante fermentación de diversos
cuerpos orgánicos, principalmente los azúcareso hidratos de carbono, estos
microrganismos transforman el azúcar en alcohol etílico y CO2 lo cual lo podemos observar
en el desprendimiento de burbujas. La fermentación alcohólica degrada la glucosa en acido
pirúvico, que luego se convierte en etanol y CO2. Las levaduras se activan porque se
encuentran en un medio húmedo y empiezan a degradar glucosa.
Se esperaba que el consumo de glucosa sea mayor para el caso de anaerobiosis
comparado con la aerobiosis, esto ocurre porque la cantidad de energía producida por
fermentación (anaerobiosis) es de solo 2 moles de ATP por mol de glucosa, mientras que
para la aerobiosis son 38 moles de ATP por glucosa, entonces en anaerobiosis necesitara
más cantidad de glucosa para generar los ATPs faltantes para su desarrollo.
El efecto Pasteur también permite afirmar que la respiración celular es más eficiente en
cuanto a la producción de energía ya que la célula necesita metabolizar menos glucosa
para poder satisfacer sus requerimientos en comparación a la fermentación en la que hay
mayor consumo de glucosa para obtener la energía necesaria. La fosforilación oxidativa
genera un gradiente de pH que provoca que los protones H+ difundan hacia la matriz
mitocondrial eliminando el gradiente de protones necesario para el funcionamiento de la
ATP sintasa y por ende la formación de ATP. Al haber poco ATP producido, la levadura
tendrá que metabolizar más cantidad de glucosa (Navarro,2016).

Conclusiones

 Hay mayor consumo de glucosa en anaerobiosis que en aerobiosis.

 Se comprobó en los ensayos del homogenizado de levadura con glucosa, que las
levaduras degradan la glucosa para obtener energía y se produce alcohol y CO2
 Podemos afirmar que si logramos comprobar la degradación de la glucosa durante
la fermentación aeróbica y anaeróbica a diferentes tiempos.

Bibliografía

 Mathews. (2002). Bioquimica . España: Pearson Education .

 Ramírez, A. (2010). El Efecto Pasteur. 9/28/19, de blogspot Sitio web:
http://vidjacqui.blogspot.com/2010/09/el-efecto-pasteur.html
  DONALD V., JUDITH G.( 2004). Bioquimica, Tercera edición. Editorial Medica
Panamericana. España.
 Mendez,J. (2015). Respiracion aerobia y anaerobia. 10/2/2019, de academia.edu
Sitio web:
https://www.academia.edu/8726945/laboratorio_respiraci%C3%B3n_aerobia_y_an
aerobia
 Navarro, O. (2018). Efecto pasteur. 2-10-2019, de blogspot Sitio web:
http://bacteriasactuaciencia.blogspot.com/2017/01/efecto-pasteur.html
Anexos
1. Presente y explique las vías metabólicas implicadas es este experimento.
El efecto Pasteur se produce en microorganismos capaces de realizar metabolismo
fermentador y respiración aerobia (anaerobios facultativos). En presencia de O2
utilizan la respiración aeróbica, pero pueden emplear la fermentación si no hay O 2
libre en su medio ambiente. El azúcar es convertido en alcohol y CO2 por levaduras
en ausencia de aire, y que en presencia de aire se forma muy poco o nada de
alcohol, siendo el CO2 el principal producto final de esta reacción aeróbica.

2. Investigue el principio de la determinación cualitativa y cuantitativa empleada.

La prueba de Benedict es otra de las reacciones de oxidación, que como
conocemos, nos ayuda al reconocimiento de azúcares reductores, es decir, aquellos
compuestos que presentan su OH anomérico libre, como por ejemplo la glucosa, en
la reacción de Benedict, se puede reducir el Cu2+ que presenta un color azul, en un
medio alcalino, el ión cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse
por efecto del grupo aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion
se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso
(Cu2O), que precipita de la solución alcalina con un color rojo-naranja, a este
precipitado se lo considera como la evidencia de que existe un azúcar reductor.

3. ¿Baja que condiciones puede darse un efecto Pasteur inverso? (Investigar efecto
cabtree).
El efecto Crabtree describe el fenómeno a través del cual la levadura
Saccharomyces cerevisiae produce alcohol (etanol) en condiciones aerobias y con
una gran concentración de glucosa externa en lugar de producir biomasa mediante
el ciclo de Krebs, proceso que ocurre mayoritariamente en todas las levaduras.

4. ¿Qué ventajas y desventajas presenta cada método de determinación de glucosa

empleado?
En el viejo método no se podría determinar la cantidad de glucosa en las condiciones
anaeróbicas ya que el oxígeno siempre lograba entrar al medio obteniendo una
prueba semi anaeróbica, por lo que se empleó el uso de aceite mineral para que no
entrada oxígeno a al medio y se observara la cantidad de glucosa producida en
condiciones anaeróbicas.

5. ¿Qué otra metodología emplearía usted para evaluar el efecto Pasteur?

Otro método para evaluar el efecto pasteur seria determinar la concentración de
glucosa consumida en el medio, donde se elabora una curva patrón y a partir de
ella se interpolaran los datos obtenidos de la absorbancia.