Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
OBJETIVO(S)
Elaborar una curva tipo de azucares reductores Tabla 2 Curva Tipo de Azucares Reductores
Conocer y utilizar el espectrofotómetro para
medir la absorbancia. Absorbancia 0 0.071 0.263 0.590 1.041 1.46
Azucar
Transformar lecturas de absorbancia en reductor
unidades internacionales (micro moles de 0 1 2 4 8 10
(µmoles)/2
azucares reductores) mL
INTRODUCCIÓN
Los azucares reductores son aquellos azucares que
poseen un grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, y Curva Tipo de Azucares Reductores
a través de este pueden reaccionar como reductores 1.5
ABSORBENCIA (nm)
con otras moléculas. . Una curva tipo o curva de 1
calibración es una representación gráfica entre la
relación de la concentración (eje de las abscisas) y la 0.5
absorbancia medida (eje de las ordenadas). 0
Es necesario ensayas varias soluciones de 0 2 4 6 8 10 12
concentración conocida y determinar sus respectivas [azúcar reductor] µmoles/2 mL
absorbancias, a partir de este se obtiene la curva tipo,
cuya apariencia es una recta. Para medir la absorbancia Gráfica 1 Curva Tipo de Azucares Reductores
se emplea un espectrofotómetro que realice lecturas a
540 nm.
El método de DNS (técnica de Miller) es una técnica
colorimétrica que emplea acido 3,5 dinitroalicilico para
la hidrolisis del polisacárido presente en la muestra.
Esta técnica sirve para cuantificar los azucares
reductores producidos en una reacción enzima
generando un producto colorado. La intensidad de
color que se mide por métodos espectrofotométricos Fig. 1 Tubos de Azucares reductores
es proporcional a la concentración de azucares.
CÁLCULOS
RESULTADOS
Tabla 1 Procedimiento de Azucares Reductores
[µ𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎]
𝐕𝐨 = actividad = = 𝑈. 𝐼
𝑚𝑖𝑛
REACT T 1 2 3 4 5 1
Glucosa, Tubo 1………..Vo1 = 10 = 0.1
fructosa 0 0.1 0.2 0.4 0.8 1.0 2
Tubo 2………..Vo2 = 10 = 0.2
0.005M (mL)
4
Sacarosa Tubo 3………..Vo3 = 10 = 0.4
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
0.2M (mL) 8
Regul. De
Tubo 4………..Vo4 = 10 = 0.8
10
Acetatos
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 Tubo 5………..Vo5 = =1
10
0.05M pH
4.7 (mL)
Agua (mL) 1.0 0.9 0.8 0.6 0.2 0 Tabla 3 Unidades de Invertasa (U.I)
3,5 DNS
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
(mL) Tubo Actividad (Vo)
1 0.1
2 0.2 tendencia, podemos de decir que la gráfica de grupo que
3 0.4 tiene como R2 =0.9977 es más cercana a la línea de
4 0.8 tendencia y por lo tanto es un poco más útil para ser una
5 1 referencia al interpolar que nuestra grafica donde se
tiene una R2 = 0.9966.
REACCIÓN QUÍMICA
CONCLUSIÓN
Por medio de una serie de ensayos con cantidades
conocidas para llevar a cabo la reacción de identificación
de la formación de azucares reductores, sirven para
construir una curva tipo.
Bibliografía
J. Weininger, S., & R. Stermitz, F. (1998). Azucares,
nuecleosidos y acidos nucleicos . En S. J.
Weininger, & F. R. Stermitz, Química orgánica
(pág. 824). España : REVERTE.