Protocolo de Prácticas de Laboratorio de Bioquímica

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA
ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGIA E INGENIERIA
Protocolo de práctica de laboratorio de Bioquímica
201103 – BIOQUÍMICA
LEONARDO BONILLA RAMÍREZ

Director
MEDELLÍN
Mayo, 2019
1
1. ASPECTOS DE PROPIEDAD INTELECTUAL Y VERSIONAMIENTO
Las guías del componente práctico del curso de Bioquímica fueron

diseñadas por el Biólogo, Especialista en Química Ambiental, Magister en
Desarrollo Sostenible y Medio Ambiente Alberto García Jerez. El profesor
es actualmente docente en la UNAD en el CEAD de Bucaramanga.
La presente Guía fue diseñada y actualizada por Biólogo, Magister y

Doctor en Ciencias Biomédicas Leonardo Bonilla Ramírez, docente de la
UNAD, y ubicado en el CEAD de Medellín, actualmente se desempeña
como tutor de la UNAD.
Para la presente actualización se recibieron observaciones, sugerencias y

aportes de los Doctores Sindy Johana Escobar y Héctor Fabio Cortés
Hernández.
2
Este documento se puede copiar, distribuir y comunicar públicamente
bajo las condiciones siguientes:
✓ Reconocimiento. Debe reconocer los créditos de la obra de la

manera especificada por el autor o el licenciador (pero no de una
manera que sugiera que tiene su apoyo o apoyan el uso que hace
de su obra).
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una obra derivada a partir de esta obra.
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términos de la licencia de esta obra.
✓ Alguna de estas condiciones puede no aplicarse si se obtiene el

permiso del titular de los derechos de autor.
✓ Nada en esta menoscaba o restringe los derechos morales del autor.
3
2. INDICE DE CONTENIDO
Pág.
3. Características generales 5
4. Descripción de prácticas 9
4.1. Práctica No. 1. Bioseguridad. 9
4.2. Práctica No. 2. Identificación de Lípidos 16
4.3. Practica No. 3. Extracción y Caracterización de ADN 22
4.4. Práctica No. 4. Extracción de la caseína, determinación del

punto isoeléctrico y precipitación salina de proteínas. 28
4.5. Práctica No. 5. Cuantificación de proteínas por el método de

Bradford 39
4.6. Práctica No. 6. Hidrólisis del Almidón 46
4.7. Práctica No. 7. Efectos de la temperatura, el pH y la

concentración de sustrato sobre la actividad enzimática 53
5. Anexos 60
4
3. Características generales
El componente práctico del curso de bioquímica

Introducción comprende el espacio académico para afianzar y
consolidar las competencias adquiridas por el
estudiante en el componente de formación básica de
estudiantes de los programas de ingeniería de
alimentos y regencia de farmacia. A través del
desarrollo de las prácticas el estudiante aplicará
conceptos de la bioquímica, relacionados con
biomoléculas , enzimología y metabolismo celular,
tales como estructura, pH, reacciones de oxido-
reducción, cinética e inhibición enzimática y
catabolismo celular. De igual manera, el componente
práctico favorece en los estudiantes el desarrollo de
habilidades observacionales, analíticas y
experimentales en el área de la bioquímica.
Durante el desarrollo de las prácticas favorecerá

afianzar conceptos y competencias adquiridas en
cursos previos como biología y química orgánica,
para así lograr la aprehensión de las competencias
necesarias en la formación en ciencias básicas para
el óptimo desarrollo de sus programas académicos.
5
El diseño de este manual de laboratorio se realizó con
el propósito de complementar y correlacionar los
conceptos teóricos con los resultados experimentales
del curso de bioquímica de la cadena de ciencias
básicas, tecnología e ingeniería de la Universidad
Nacional Abierta y a Distancia. Este protocolo consta
de 5 prácticas que integran los temas de las tres
unidades temáticas del curso.
Los contenidos de las prácticas fueron seleccionados,

teniendo en cuenta el tiempo y las competencias
metodológicas mínimas que se esperaría debe
alcanzar un estudiante de la Universidad en el campo
de la bioquímica.
Es requisito para los estudiantes en formación en

ingeniería de alimentos y regencia de farmacia.
Justificación
Propósito:
Intencionalidades Relacionar los procedimientos de laboratorio con los

formativas conceptos sobre biomoléculas, bioenergética y
metabolismo a través de ensayos experimentales.
Objetivo general:
Desarrollar en el estudiante la capacidad analitica

para relacionar las medidas experimentales del
laboratorio de bioquímica, con los conceptos teoricos
aprendidos.
6
Meta:
Aplicar los conceptos relacionados con la bioquímica

en ensayos experimentales que evidencien la
relación teoría-practica.
Competencia:
El estudiante aplica los conceptos teóricos de la

bioquímica a partir del desarrollo de actividades
experimentales.
Práctica No. 1. Bioseguridad.

Práctica No. 2. Identificación de Lípidos.
Denominación de Práctica No. 3. Extracción y Caracterización de
practicas ADN
Práctica No. 4. Extracción de la caseína,
determinación del punto isoeléctrico y precipitación
salina de proteínas.
Práctica No. 5. Cuantificación de proteínas por el
método de Bradford
Práctica No. 6. Hidrólisis del Almidón
Práctica No. 7. Efectos de la temperatura, el pH y
la concentración de sustrato sobre la actividad
enzimática
Número de horas 16
Porcentaje La rúbrica de evaluación del laboratorio 25% del

curso, equivalente a 125 puntos de 500 Totales.
7
Curso Evaluado
por proyecto SI___ NO_X_
Seguridad Guantes de nitrilo, gafas de seguridad translucidas,

industrial blusa para laboratorio blanca manga larga, tapa
bocas.
8
4. DESCRIPCIÓN DE PRÁCTICAS
4.1 Práctica No. 1. Bioseguridad.
Tipo de practica Presencial X Autodirigida Remota

Porcentaje de 10%
evaluación
Horas de la Una
practica
Temáticas de la Bioseguridad e higiene en el laboratorio,
práctica manejo de residuos
Propósito.
Intencionalidades
Desarrollar en el estudiante la competencia de
formativas comportamiento bioseguro en el laboratorio de
bioquímica.
Objetivo general.
Conocer y aplicar las principales normas de

seguridad e higiene que se deben seguir en el
laboratorio.
Competencia.
El estudiante relaciona de manera cognitivo

procedimental el concepto bioseguridad
aplicado a todas las actividades desarrolladas
durante el uso del laboratorio.
9
Fundamentación Teórica
Las normas de seguridad en el laboratorio son protocolos establecidos

internacionalmente, que permiten hacer de la actividad de práctica de
laboratorio, una actividad segura con el conocimiento previo del manejo
de los reactivos a través de la consulta de la hoja de seguridad, la cual
describe los peligros de una sustancia o producto químico.
Normas Personales
El vestuario para asistir a la práctica de laboratorio debe ser apropiado,

debe cubrir porciones considerables de piel, con el fin de evitar posibles
accidentes por salpicaduras de productos químicos, para esto se
recomiendan pantalones largos, tipo jeans, blusas manga larga, la bata:
blanca y de algodón, zapato cerrado, los guantes de nitrilo. Otros
elementos importantes son el tapabocas y la cofia. Durante la
permanecías en el laboratorio, no llevar ningún elemento a la boca,
como lapicero lápiz y los dedos. Igualmente se recomienda evitar
recostarse en los mesones y no oler sustancias químicas por agradables
que puedan resultar.
Normas para la utilización de productos químicos
10
Recomendaciones generales en la operación segura de los productos
químicos en el laboratorio.
Es importante que cada grupo de estudiantes, tengan asignado las

mínimas cantidades posibles de los productos químicos, vidriería o
equipos. Esta precaución puede evitar accidentes de gravedad.
Antes de usar cualquier sustancia es importante leer la etiqueta qué el

recipiente tiene como información sobre el producto.
Cada vez que se utilice una determinada sustancia química es

importante cerrar el envase para evitar que se altere las propiedades
químicas o evitar accidentes.
Al finalizar la tarea de laboratorio es importante consultar al docente de

práctica, sobre la disposición final de los residuos químicos.
Llevar de regreso todos los recipientes que contienen los reactivos

químicos en los gabinetes correspondientes evitando mezclar productos
que puedan reaccionar generando explosiones o fuego.
Al finalizar la práctica, limpia el área de trabajo y entrega los materiales

utilizados limpios y en buenas condiciones. Por último, esperar las
indicaciones para retirarse de las instalaciones del laboratorio.
Normas de emergencia
En caso de emergencia mantenga la calma y escuché las instrucciones

que el docente encargado de la práctica. Recuerde que algunas medidas
las pueden realizar cualquier integrante del grupo de estudiantes que
11
asiste, tales como lavar con abundante agua, los ojos o porción de la
piel que termine afectada por alguna sustancia química.
Descripción de la práctica.
La práctica de bioseguridad consta de la observación del video sobre

este tema de normas de seguridad en el laboratorio, y una puesta en
común de las aplicación e importancia de las mismas.
Recursos a utilizar en la práctica (Equipos / instrumentos)
Equipos
• Computador y video beam.
Software a utilizar en la práctica u otro tipo de requerimiento

para el desarrollo de la práctica
No se necesita software adicional.
Seguridad Industrial
Guantes de nitrilo, gafas de seguridad translucidas, blusa para

laboratorio blanca manga larga, tapa bocas.
Metodología
12
Procedimiento.
1. Para el desarrollo de esta práctica el estudiante debe observar el

video normas de seguridad en el laboratorio
2. Se hará la discusión sobre las normas de seguridad antes
descriptas y las que encuentran en el Reglamentación y Normas
de Bioseguridad en los Laboratorios de la UNAD y Otras
Disposiciones.
3. Realice las siguientes actividades
a. Identifique la señalización que encuentra en el laboratorio,
fotografié o dibuje los pictogramas y describa en el informe
de laboratorio que significan con que elementos de
seguridad se cuenta. (Duchas, extintores, cámaras
extractoras, etc.)
b. Defina Riesgo biológico y Riesgo químico
c. Escoja uno de los reactivos utilizados en el componente
práctico y conteste las siguientes preguntas:
i. Escriba las propiedades físicas y químicas de la
sustancia.
ii. Mencione posibles riesgos que representa la sustancia
para la salud.
iii. Indique cual es el equipo o la vestimenta de seguridad
necesaria para manipular la sustancia.
Sistema de Evaluación
La evaluación se llevará a cabo por medio de las siguientes

actividades. El tutor asignado al componente práctico evaluará el
13
laboratorio de acuerdo a los aspectos de la rúbrica de evaluación,
entre estos están:
1. Evaluación parcial presencial al iniciar la práctica (Quiz)
2 .Asistencia, participación acorde con las normas de bioseguridad y

manejo de residuos durante todas las prácticas y presentación del
informe de la práctica realizada durante el laboratorio.
La valoración de la práctica se dará en términos de una nota de 0.0 a

5.0.
Informe o productos a entregar
• El Preinforme (entregarlo antes de comenzar la práctica) debe

contener la respuesta a las siguientes preguntas:
o Explicación de los principales elementos de protección

personal
o Clasificación de los productos químicos de acuerdo a la
norma NFPA 704
• Informe (entregarlo después de realizada la práctica, cuando lo

determine el tutor de laboratorio) debe contener:
o Portada
o Introducción (diferente a la presentada en esta guía de
componente práctico)
o Respuesta a cuestionario del informe
o Conclusiones
o Referencias bibliográficas ( de acuerdo a las Normas APA
vigentes)
14
NOTA: Recuerde que el pre informe es individual y el informe en grupo
de máximo 4 estudiantes( de acuerdo como el tutor de componente
práctico indique durante el desarrollo del mismo).
Rúbrica de evaluación
La evaluación estará a cargo de los tutores de laboratorio siguiendo la
Guía y Rúbrica de Evaluación de la tarea 4 – componente practico.
Realimentación
El tutor de laboratorio hará la correspondiente retroalimentación 15 días

luego de entregado el informe o en la fecha que se coloquen de acuerdo
con el tutor.
15
4.2. Práctica No. 2. Identificación de Lípidos
Tipo de practica
Presencial X Autodirigida Remota
Porcentaje de 15%
evaluación
Horas de la practica Dos
Temáticas de la Ácidos nucleicos (estructura, función y
práctica propiedades químicas)
Intencionalidades Propósito
formativas
Relacionar los conceptos de los lípidos a partir
de procedimientos de laboratorio que describen
el comportamiento químico de los mismos.
Objetivo general.
Identificar propiedades de los ípidos
Competencia
El estudiante relaciona los procedimientos de

laboratorio con los conceptos teóricos de
biomoléculas, a través de medidas
experimentales físicas y químicas.
16
Éstas biomoléculas se encuentran en todos los tejidos de los animales,
vegetales y en la flora y fauna microscópicas. Todos los lípidos contienen
carbono, hidrógeno y oxígeno, y algunos nitrógeno, fósforo y azufre. El
metabolismo intermedio de los lípidos en animales superiores está
íntimamente relacionado con el de los glúcidos y con algunas
degradaciones de las proteínas, pues sus vías metabólicas tienen
diversos puntos en común; forman la parte principal de los combustibles
productores de energía del cuerpo. Lípidos.
a-Sustancias insolubles en agua pero solubles en los disolventes (de las

grasas) como éter, cloroformo, éter de petróleo, etc.
b.-Son ésteres reales o potenciales de los ácidos grasos.
Descripción de la practica
Esta práctica realizará la emulsificación, saponificación e índice de yodo

de lípidos
Equipos
Baño maría o plancha de calentamiento
Materiales
• Espátulas o cucharas de tamaño pequeño.

• Pipetas graduadas de 5
• Pipetas pasteur.
• Tubos de ensayo.
• Gradilla
17
Reactivos
•
• Agua destilada
• Al(OH)2
• NaOH
• Etanol
• Solución de NaCl a saturación
• Aceite vegetal de cocina
• Aceite de oliva
• Manteca de cerdo
Software a utilizar en la practica

Metodología
Procedimiento.
Parte I. Emulsificación.
a) Tome dos tubos de ensayo agregue a cada uno 5 ml de agua y

10 gotas de aceite vegetal de cocina en uno y 10 gotas de aceite
de oliva en el otro.
18
b) Agitar fuertemente, observar y registras cuanto tiempo dura la
emulsión.
Parte II. Saponificación.
a. Colocar 3 ml de NaOH en un tubo de ensaye y 3 ml de Al(OH)2 en

otro.
b. Agregar 10 gotas de aceite de oliva a cada tubo y mezclar bien
c. Hervir a fuego directo 4 veces cada uno de los tubos, por dos
minutos.
d. Vaciar en otros tubos el contenido de NaOH y Al(OH)2 por

separado, dejando en ellos el precipitado formado.
e. Agregar a cada uno de los tubos con el precipitado 3 ml de agua

destilada. Agitar y observar.
f. .Agregar a cada uno de los tubos NaCl a saturación
g. Observar la formación de precipitado que se aglomera en la parte

inferior del tubo (después de un breve reposo).
h. .Decantar el líquido y observar el precipitado en el mismo tubo.
i. Agregar 3 ml de agua destilada, agitar y observar si se disuelve y

forma espuma jabonosa.
Parte III. Índice de Yodo.
19
a. Tomar 3 tubos de ensayo y colocar a cada uno de ellos 2 ml de
alcohol y 1 g de una muestra de lípido diferente en cada tubo
(manteca, aceite de cocina y aceite de oliva).
b. Colocar en baño María a ebullición por un minuto cada tubo y dejar

enfriar.
c. Agregar 10 gotas de lugol a cada tubo y mezclar.
d. Agitar perfectamente y observar el resultado anotando cuales son

los cambios para cada una de las muestras.
El tutor asignado al componente práctico evaluará el laboratorio de

acuerdo a los aspectos de la rúbrica de evaluación, entre estos están:
desempeño individual mostrado durante el desarrollo de la práctica por
parte del estudiante, quiz, preinformes e informes de laboratorio. La
valoración de la práctica se dará en términos de una nota de 0.0 a 5.0

contener la metodología propuesta en un mapa de flujo, y hoja de
seguridad de los reactivos utilizados durante la práctica.

determine el tutor de laboratorio) debe contener marco teórico
diferente al propuesto en las guías de cada práctica,
procedimiento elaborado en un mapa conceptual, Descripción y
registro de datos obtenidos en la práctica de laboratorio, análisis
de los resultados, conclusiones y bibliografía.
20
de máximo 4 estudiantes.

Retroalimentación
con el tutor.
21
4.3. Práctica No. 3. Extracción y Caracterización de ADN.
Tipo de practica
Porcentaje de 15%
evaluación
Horas de la practica Dos
Temáticas de la Ácidos nucleicos (estructura, función y
práctica propiedades químicas)
formativas
Relacionar los conceptos de los ácidos
nucleicos a partir de procedimientos de
laboratorio que describen el comportamiento
químico de los mismos.
Objetivo general.
Extraer el ácido nucleico ADN a partir de

células vegetales.
Competencia

laboratorio con los conceptos teóricos de
biomoléculas, a través de medidas
experimentales físicas y químicas.
22
El ácido desoxirribonucleico (ADN) está conformado por un azúcar,

llamado desoxirribosa, bases nitrogenadas adenina A, timina T, citosina
C o guanina G y un grupo fosfato. En el ADN se presenta una doble
cadena, una hebra de ADN está formada por unidades alternas de
grupos fosfato y azúcar. Los bases nitrogenados, se unen a la
desoxirribosa y se forman dos hebras, unidas entre sí por puentes de
hidrógeno. El genoma de las células eucarióticas se encuentra
organizado en cromosomas, que son estructuras de DNA relacionadas
con proteínas básicas, a las que se les denomina histonas, y proteínas
no histonas; las histonas tienen carga positiva a pH fisiológico y
neutralizan las cargas negativas del fosfato de los nucleótidos, lo que
confiere estabilidad y permite que el DNA que mide casi 2 metros de
longitud se empaquete en un núcleo de 10 µm de diámetro. El genoma
humano está constituido por 46 cromosomas y contiene 5 × 106 kpb
en su totalidad.
El ácido ribonucleico (ARN) es una molécula similar al ADN. El ARN

difiere en que es monocatenario, es decir, presenta una hebra de ARN;
tiene un esqueleto formado por grupos alternantes de azúcar ribosa y
fosfato. Se adjunta a cada azúcar una de las cuatro bases: adenina A,
uracilo U, citosina C o guanina G.
Esta práctica realizará la extracción del ácido desoxirribunocleico de

células vegetales de Kiwi. Utilizando un método de extracción químico.
23
Equipos
No Aplica
Materiales
• Vasos de precipitado de 250 y 100 mL.

• Probetas de 250, 100 y 50 mL.
• Mortero.
• Espátulas o cucharas de tamaño pequeño.
• Pipetas graduadas de 5, 10 mL.
• Pipetas pasteur.
• Embudos
• Papel de filtro
• bisturí
Reactivos
• Agua destilada.
• Cloruro de sodio.
• Alcohol Isopropílico frío (-20)
• Jabón líquido para lavar platos
• Zumo de piña fresco
Software a utilizar en la practica
24
Metodología
Procedimiento.
c) En un vaso de precipitado prepare una solución de Lisis, adicione

a 50ml de agua destilada 1ml de jabón líquido y 2 gramos de
NaCl, mezcle suavemente evitando la formación de burbujas.
d) Con el bisturí pele y corte el Kiwi en pequeños trozos, colóquelos

en un mortero, y macere el Kiwi adicionando poco a poco la
solución preparada en el punto anterior (a), realice el
procedimiento suavemente evitando la formación de burbujas.
Realice este procedimiento durante 10 minutos. L
e) Filtre la solución obtenida hasta obtener aproximadamente 5mL

de filtrado.
f) Transfiera 3ml de la muestra a un tubo de ensayo y adicione 1ml

de zumo de piña (fresco y filtrado). Agite suavemente, evitando
que las paredes tubo se unten de la solución.
g) Adicioné el alcohol isopropílico frío lentamente, para esto incline

el tubo de ensayo con la muestra 45° y adicione con una pipeta
pasteur gota a gota el isopropanol hasta formar una capa sobre
la muestra(Opcional: adicione 2 gotas de azul de metileno a 50ml
de alcohol isopropílico, previo a la adición de este reactivo a la
muestra).
h) Deje reposar la muestra 5 minutos y Verifique la formación de

25
cadenas blancas o azules en el caso de usar azul de metileno en
el paso anterior.



procedimiento elaborado en un mapa conceptual, Descripción y
registro de datos obtenidos en la práctica de laboratorio, solución
a los siguientes interrogantes, conclusiones y bibliografía.
Preguntas
• ¿Cuál es la función de los componentes de la solución de Lisis?

• ¿Para qué se usa el zumo de piña, cual es el compuesto clave y
su función durante el proceso de extracción de ADN?
• Explique las diferencias de solubilidad del ADN en medio salino y
alcohólico.
26

Retroalimentación
con el tutor.
27
4.4. Practica No. 4. Extracción de la caseína, determinación del
punto isoeléctrico y precipitación salina de proteínas.
Tipo de practica
Porcentaje de 15%
evaluación
Horas de la practica Tres
Temáticas de la Propiedades estructurales de aminoácidos y
práctica proteínas
formativas
Relacionar las propiedades estructurales y
químicas de los aminoácidos y proteínas, a
partir de procedimientos de laboratorio que
describen su comportamiento bioquímico.
Objetivo general.
Analizar el efecto del pH y la fuerza iónica

sobre proteínas con solubilidad acuosa.
Competencia

laboratorio sobre punto isoeléctrico y
precipitación de proteínas, a través de
medidas experimentales físicas y químicas.
28
Kappa caseína de la leche, es una proteína, la cual está asociada al

calcio en forma de fosfato de calcio. Esta proteína es globular y tiene
gran influencia en la composición de la leche, se encuentra en la fase
acuosa y presenta un predominio en la composición de la leche
relacionada con la coagulación, el tiempo de formación del cuajo y en
general en la formación de quesos.
La Kappa caseína se considera una fosfoproteína; bioquímicamente,

esta sustancia contiene ácido fosfórico que son la mayoría del grupo
fosfatos que están unidos por grupos hidroxilo a los aminoácidos de
serina y treonina principalmente.
1.
Gráfico 3. Grupos fosfatos de la proteína.

Miller D.D. 2001. Química de Alimentos, Manual de
Laboratorio. Limusa Wiley, México
Durante la adición de ácido a la leche, las cargas negativas en la

superficie exterior de la micela se neutralizan (los grupos fosfato
29
están protonados) y la proteína neutra precipita como se muestra en
el gráfico 3.
La kappa caseína, sin embargo, tiene pocos grupos fosfato y un alto
contenido de carbohidratos unidos a ella. También tiene todos sus
residuos de serina y treonina con sus correspondientes grupos
hidroxilo, así como los carbohidratos dispuestos en una sola cara de
su superficie por lo que esta parte exterior es fácilmente soluble en
agua gracias a los grupos polares que posee. La otra parte de su
superficie se une fácilmente a las alfa y beta caseína insolubles, lo
que da lugar a la formación de la micela.
La caseína está presente en la leche como sal de calcio y caseinato
de calcio. Es una mezcla de caseínas alfa, beta y kappa para formar
un grupo llamado micela. Estas micelas son responsables de la
apariencia opaca blanca de la leche. Como se muestra en el gráfico
5.
Gráfico 5. Micela de caseína. Tomado de
30
El gráfico 5 muestra la kappa-caseína formando una micela o unidad
soluble. La caseína presenta baja solubilidad a pH 4,6. El pH de la
leche es 6,6 aproximadamente, estando a ese pH la caseína se
encuentra cargada negativamente y se solubiliza como sal cálcica. Si
se añade ácido a la leche, la carga negativa de la superficie de la
micela se neutraliza (los grupos fosfato se protonan) y la proteína
neutra precipita
Ca2+ Caseinato + 2HCl ➔ Caseína + CaCl2
La función biológica de las micelas de caseína es transportar grandes

cantidades de calcio y fósforo altamente insoluble en forma líquida a
los lactantes y formar un coagulo en el estómago para favorecer una
nutrición eficiente.
El punto isoeléctrico
Las moléculas grandes adquieren una carga eléctrica y se puede definir

como el pH en el cual una proteína tiene cargas netas cero. Puede
presentar grupos con cargas positivas y negativas y la suma de las
mismas debe ser cero. La caseína, como las proteínas, está formada por
muchos cientos de aminoácidos individuales. Cada uno puede tener una
carga positiva o negativa, dependiendo del pH del sistema, en este caso
la leche. A algún valor de pH, todas las cargas positivas y todas las
cargas negativas en la proteína (caseína) estarán en equilibrio, por lo
que la carga neta en la proteína será cero. Ese valor de pH se conoce
como el punto isoeléctrico (IEP) de la proteína y generalmente es el pH
en el que la proteína es menos soluble.
31
De lo anterior se deduce que las proteínas tienen un pH característico
al cual su carga neta es cero. A este pH se le denomina punto
isoeléctrico (pI). Estas moléculas constituidas por múltiples
aminoácidos unidos por enlaces peptídicos, cuyos grupos R,
determinan las cargas positivas y negativas al igual que el grupo amino
y el grupo carboxilo libres, como se muestra en el gráfico 6.
Gráfico 6. En lace polipéptido. Tomado de

En esta práctica se va a estudiar el efecto del pH y la fuerza iónica

sobre las propiedades químicas y estructurales de las proteínas.
32
Mediante el análisis del pH vs absorbancia por métodos
espectrofotométricos.
Equipos
• Espectrofotómetro
• Potenciómetro (pHmetro)
• Centrífuga
Materiales
• Diez vasos precipitados de 25 ml

• Dos vasos de precipitados de 50ml
• Un vaso de precipitado de 250ml
• Probeta de 50ml
• Matraz aforado de 50 ml
• pipeta graduada de 5,0 ml
• Embudo de vidrio mediano
• Papel de filtro
• Termómetro
Reactivos
33
• Leche 200mL
• Agua destilada
• Acetato sódico 0,1 N
• Ácido acético 0,01 N
• NaOH 1N
• Éter etílico
• Etanol al 70%


Metodología
Procedimiento.
Parte I. Extracción de la Caseína.
a. Caliente en un vaso de precipitado 150 ml de agua destilada a

38ºC, Añada 50ml de leche y luego gota a gota, con agitación,
adicione ácido acético 1M hasta que observe que se forma un
precipitado (la leche se corta).
b. Deje sedimentar y filtre sobre papel de filtro usando un embudo.
34
Guarde el filtrado para realizar la Parte IV de esta práctica.
c. Lave el precipitado con 20ml de etanol en el mismo filtro.
d. Seque el precipitado colocando varios pliegues de papel de filtro.
e. Coloque el precipitado en un vaso de precipitado pequeño
previamente pesado, vuelva a pesar el vaso con el precipitado y
luego adicione 5ml/g de éter etílico.
f. Filtre nuevamente.
g. Deseche el líquido quedando un precipitado blanco de fácil
manipulación que es la caseína.
Parte II. Preparación de la solución de caseína
a. Coloque aproximadamente 250 mg de caseína en un vaso de

50ml.
b. Agregue 20ml de agua destilada y 5 ml de NaOH 1N; agite hasta
lograr una solución total de la caseína.
c. Una vez disuelta la caseína, se vierte en un matraz aforado de
50 ml, adicione 5 ml de ácido acético 1N y diluya con agua
destilada hasta 50ml y mezcle bien.
d. La solución debe ser clara y limpia y si no es así, debe volver a
filtrar.
Parte III. Determinación del punto Isoeléctrico de la caseína.
a. En diez vasos de 25 ml, limpios y secos adicione exactamente los

volúmenes de los reactivos según la siguiente tabla:
TABLA 1. De Disoluciones añadir 1 ml de disolución de caseína a

cada tubo.
35
TUBO Acetato Acético Acético pH
0.1N 0.1N 0.01 N resultante
(aprox.)
1 0.5 9.5 - 3.2
2 1 9 - 3.6
3 1.5 8.5 - 3.8
4 2 8 - 4.0
5 3 7 - 4.2
6 4 6 - 4.5
7 6 4 - 4.7
8 8 2 - 5.1
9 6 - 4 5.5
10 8 - 2 6.1
b. Medir experimentalmente el pH de todos los vasos, que debe cubrir

un rango aproximado semejante al teórico (3 a 6,5). Anotar los
valores reales en la Tabla, que deben ser semejantes a los
expresados y en todo caso crecientes.
c. Añadir 1 ml de disolución de caseína preparada en la parte II a cada
tubo.
d. Agitar suavemente cada uno de los tubos y esperar
aproximadamente 3 minutos.
e. Medir la absorbancia de cada muestra a 640 nm.
36
f. Anotar los resultados, y graficar la absorbancia frente al pH, y
determinar el pI.
Parte IV. Precipitación salina de Proteínas.
a. Prepare 10mL de una solución saturada de sulfato de amonio.

b. Tome dos tubos de ensayo adicione a cada uno 1,5 mL de la
solución de sulfato de amonio saturada
c. A uno de los tubos adicione 1,5 mL del filtrado que guardo en la
parte I de esta práctica. Al otro tubo adicione un 1,5mL de la
solución de caseína preparada en la parte II.
d. Centrifuge y observe si se forma un pellet.



procedimiento elaborado en un mapa conceptual, tablas de
registro de datos obtenidas de las prácticas de laboratorio,
37
cálculos realizados, análisis y resultados obtenidos, solución a las
preguntas, conclusiones y bibliografía.
Preguntas:
2. 1) ¿Qué sucedería si se representa la transmitancia vs pH en lugar

de absorbancia?
3. 2) ¿Cuál es el punto isoeléctrico de la caseína?
4. 3) Por qué las proteínas tienen solubilidad mínima en la pI?
5. 4) Explique cuál es el fundamento de la precipitación salina y porque

aparece un precipitado en el filtrado obtenido durante la extracción
de la caseína.
6.

Retroalimentación

con el tutor.
38
Practica No. 5. Cuantificación de proteínas.
Tipo de practica
Porcentaje de 15%
evaluación
Horas de la practica dos
Temáticas de la Propiedades estructurales de aminoácidos y
práctica proteínas
formativas
Relacionar las propiedades estructurales y
químicas de los aminoácidos y proteínas, a
partir de procedimientos de laboratorio que
describen su comportamiento bioquímico.
Objetivo general.
Conocer métodos de cuantificación de

proteínas y aplicar los conceptos de curva de
calibración.
Competencia

laboratorio sobre estructura de las proteínas,
a través de medidas experimentales físicas y
químicas.
39
Para el estudio de la estructura de una proteína, de la actividad de una

enzima o el contenido proteínico de un alimento, es necesario conocer
cuantitativamente la concentración de las proteínas.
Existen diferentes métodos para la cuantificación de proteínas. Muchos

de estos métodos se basan en: a) la propiedad intrínseca de las
proteínas para absorber luz en el UV, b) para la formación de derivados
químicos, o c) la capacidad que tienen las proteínas de formar
complejos.
Entre los métodos que se basan en la formación de complejos

colorimétricos entre las proteínas y reactivos específicos se encuentran:
Bradford, Lowry y Biuret.
Método de Bradford
Está basado en el cambio de color del colorante azul brillante de

Coomassie en respuesta a diferentes concentraciones de proteínas. Este
compuesto interacciona con aminoácidos básicos (especialmente
arginina) y aromáticos. Esta unión del colorante con las proteínas
provoca un cambio en el máximo de absorción del colorante desde 465
a 595 nm. Por lo tanto, este método se basa en la propiedad del Azul
Brillante de Coomasie G-250 de presentarse en dos formas con colores
diferentes, rojo y azul. La forma roja se convierte en azul cuando el
colorante se une a la proteína. Experimentalmente se mide la diferencia
de Absorbancias entre 595 y 465 nm.
40
En esta práctica se va a evaluar la concentración de proteínas en una

muestra mediante la cuantificación por métodos espectrofotométricos.
Equipos
• Espectrofotómetro
• Incubadora
• Agitador
Materiales
• Matraz aforado de 50mL

• pipetas graduada de 1,0 ml o micropipetas
• Tubos de ensayo
• Gradilla
• Termómetro
Reactivos
• Reactivo de Bradford
• Solución de Albúmina sérica Bovina (10mg/mL)
• Caseína y sobrenadante (obtenidos en la práctica anterior)
• Leche
• NaCl al 1%
• NaOH 1N
41

Metodología
Procedimiento.
1. Pesar 0.1 g de caseína y colocarla en un vaso de precipitado de

100 mL. Añadir 30 mL de solución de NaCl al 1%, agregar gota
a gota una disolución concentrada de NaOH 1N hasta completar
la disolución de la proteína.
2. Pasar la disolución anterior a un matraz aforado de 50 mL y
aforar. Esta es la disolución problema y de estas se tomarán
alícuotas.
3. Para la preparación de la muestra problema de leche; tomar 0.1
mL de leche y realizar una dilución de 1:10 (Vol. Final: 1 mL). Si
la concentración de proteína no se encuentra dentro del rango
de absorbancia preparar diluciones de 1:20, 1:100 y 1:1000 de
la solución inicial.
4. A continuación, separar los tubos de ensayo en dos grupos, los
seis primeros se utilizaron para obtener la curva patrón y los
otros seis para analizar la muestra problema, el tubo 1
contendrá el blanco, del tubo 2 al 6 adicionar los siguientes
volúmenes: 0.1ml, 0.2ml, 0.4ml, 0.8ml y 1.0ml de solución de
albumina sérica bovina (BSA), respectivamente.
5. En seguida, los tubos 7 a 12 se tratará con la muestra problema
y el reactivos de Bradford con la misma cantidad (3 mL), como
se muestra en la tabla 1, se homogeniza la solución por medio
42
de un agitador tipo vortex. (Solamente al tubo 1 se le agregaron
3 ml de reactivo de Bradford y 3 ml de NaCl).
Tubo No. Solución * Absorbancia Proteína (mg)

1 3 ml NaCl al 0.9%, Blanco
2 0.1 ml BSA y 2.9 ml NaCl
6 1 ml BSA y 2 ml NaCl
7 0.25 ml caseína y 2.75 ml NaCl
8 0.5 ml caseína y 2.5 ml NaCl
9 0.25 ml sobrenadante y 2.75 ml
NaCl
10 0.5 ml sobrenadante y 2.5 ml
NaCl
11 0.25 ml leche diluida y 2.75 ml
NaCl
12 0.5 ml leche diluida y 2.5 ml
NaCl
6. Posteriormente, llevar los tubos a 100 °C durante 10 minutos

hasta la formación del complejo. Dejar reposar las soluciones
hasta alcanzar la temperatura ambiente. (Realizar un ensayo
con y sin calentamiento)
7. Finalmente, realizar la cuantificación de la solución por medio
de un espectrofotómetro a 595 nm para el reactivo de Bradford,
entre cada medición lavar las celdas; al tener todas las
mediciones realizar la curva de calibración.
8. Realice y grafique la regresión lineal a partir de los datos de la
curva de calibración realizada con la albumina de suero bovino y
halle las concentraciones de las muestras problema.
43



Preguntas:
7. 1) Explique la ley de Beer-Lambert


44
Retroalimentación

con el tutor.
45
4.6. Práctica No. 6. Hidrólisis del Almidón
Tipo de practica Presencial X Autodirigida Remota

Porcentaje de 20%
evaluación
Horas de la Tres
practica
Temáticas de la Polisacáridos, enlaces glicosídicos y Actividad
práctica enzimática.
Propósito
Relacionar los conceptos básicos de enzimas y

actividad enzimática a partir de procedimientos
de laboratorio que describen el comportamiento
bioquímico de las enzimas.
Objetivo general.
Relacionar el proceso de digestión con la

actividad enzimática.
Competencia
El estudiante relaciona los conceptos de actividad

enzimática con procesos biológicos, a través de
medidas experimentales físicas y químicas.
46
Un catalizador es una sustancia que aumenta la velocidad de una

reacción química, sin sufrir ningún cambio al final de la misma. Casi
todas las reacciones químicas que ocurren en los seres vivos son
catalizadas por proteínas especializadas llamadas enzimas.
La sustancia sobre la que actúa una enzima se llama sustrato. La enzima

se une al sustrato formando un complejo enzima-sustrato que al final
se disocia en enzima y producto. La enzima libre queda así en capacidad
de unirse a otras moléculas del sustrato y generar más producto, hasta
que se agote la disponibilidad del sustrato o se presenten efectos
reguladores que inhiban la actividad catalítica de la enzima.
Las enzimas son proteínas de peso molecular elevado (más de 10 K

daltons). Su estructura tridimensional está determinada por la
secuencia de aminoácidos que caracteriza a cada una. En su estructura
contienen un pequeño espacio llamado sitio activo, catalítico o sitio
isostérico, al que se une una región específica del sustrato, por medio
de un acoplamiento muy específico semejante al de una llave con su
cerradura. Esto explica una de las características de las enzimas: una
alta especificidad por su sustrato. Por ejemplo, la enzima SACARASA
actúa sólo sobre SACAROSA y no lo puede hacer sobre otros disacáridos
parecidos.
La actividad enzimática puede verse afectada por cualquier factor físico

o químico que altere su estructura tridimensional. Generalmente, las
condiciones óptimas se encuentran entre límites estrechos de
temperatura, pH, concentración salina, etc. A medida que las
condiciones se alejan del punto óptimo, la actividad de la enzima
empieza a decrecer y en condiciones extremas, puede perder su
estructura tridimensional y se dice que la enzima es desnaturalizada.
47
De acuerdo con las reacciones que catalizan, las enzimas se clasifican
en 6 clases:
1. OXIDORREDUCTASAS
2. TRANSFERASAS
3. HIDROLASAS
4. LIASAS
5. ISOMERASAS
6. LIGASAS
La digestión es un proceso que involucra la acción catalítica de

Hidrolasas, las cuales rompen uniones covalentes y saturan las
valencias libres aprovechando los componentes de la molécula de agua
(C—C + H2O → C—OH + C—H). Así, reducen los compuestos orgánicos
que recibimos en la dieta, hasta moléculas pequeñas que pueden ser
absorbidas por las células del epitelio intestinal. Un ejemplo será
demostrado al efectuar la hidrólisis del almidón por la actividad de la
enzima amilasa salival (o ptialina), secretada en las glándulas salivales,
cuyo sustrato (el almidón) será convertido a maltosa, maltotriosa y alfa
dextrinas.
Debido a que se necesitan muy bajas concentraciones de enzima para

catalizar una reacción dada, pocas enzimas pueden medirse
directamente. Por consiguiente, la presencia de una enzima se
demuestra generalmente midiendo los cambios de concentración,
conforme ocurre la desaparición del sustrato o la aparición del producto
de su acción catalizadora.
48
En esta sección se va a estudiar carbohidratos poliméricos, enlaces
glucosídicos y actividad enzimática determinada por la identificación de
sustrato y productos de la reacción catalizada por la amilasa salival.
Equipos
• Baño de Maria
• Plancha de calentamiento
Materiales
• Vasos de precipitados de 100, 200 mL.

• Pipeta graduada de 5, 10 mL.
• Gradilla.
Reactivos
• Lugol
• Reactivo de Benedict
• Solución de Almidón al 1%
• Solución de celulosa al 1%
• HCl concentrado
• NaOH 0,4M


49
Metodología
Procedimiento
Parte I hidrolisis de almidón en medio ácido
a. Coloque 10 mL de una solución de almidón al 1% en un tubo de

ensayo grande.
b. Añadir 1 mL de HCl concentrado al tubo. Agitar bien y luego
colocar el tubo en un baño de agua hirviendo durante 2h con
cuidado de no quemarse.
c. Realice la prueba de yodo, desde el tiempo cero y
sucesivamente cada 15 minutos durante las dos horas del
tiempo de incubación. Para esto en un tubo de ensayo adicione
5mL de agua destilada, 2 gota de solución de yodo y 0,5 ml dela
solución de yodo que se está hidrolizando en el baño maría a
ebullición, registre el resultado de la prueba en cada tiempo de
evaluación.
d. Una vez transcurrida las dos horas o cuando obtenga una prueba
de yodo negativa, efectúe la prueba de Benedict. Tome o,5mL
de la solución de almidón hidrolizado , 1ml de NaOH 0,4M (para
neutralizar el ácido) y 2,5 mL de reactivo de Benedict. Incubar
por 8 minutos en agua hirviendo. Anotar y analizar los
resultados.
Parte II hidrolisis enzimática del almidón
a. Tome cuatro tubos de ensayo y márquelos del 1 al 4. Y a los

tubos 1 a 3 agregue 2mL de solución de almidón al 1%
50
b. Al tubo 1 adicione 1mL de saliva y llévelo a baño maría a 37°
durante 5 minutos.
c. Al tubo 2 agregue dos gotas de lugol, observe y reporte el
resultado.
d. Al tubo 3 adicione 2mL de reactivo de Benedict y póngalo a baño
maría en ebullición. Agite suavemente y observe los cambios
que se presentan.
e. Pase la mitad del contenido del tubo . 1 al tubo 4. Al tubo Nº. 1
agréguele 2 gotas de lugol. Observe y explique el resultado.
f. Al tubo 4 agréguele 2 ml de reactivo de Benedict y póngalo en el
baño de María en ebullición. Observe y explique el resultado.



51
Preguntas
1. Compare los resultados entre los dos ensayos de hidrolisis del

almidón.
2. Explique bioquímicamente las diferencias en el tiempo de
hidrólisis entre los dos ensayos


Retroalimentación

con el tutor.
52
4.7. Práctica No. 7. Efectos de la temperatura y el pH
sobre la actividad enzimática
Tipo de practica
Otra
¿Cuál
Porcentaje de 15%
evaluación
Horas de la practica Tres
Temáticas de la Factores físicos, químicos y actividad
práctica enzimática.
formativas
Relacionar los conceptos del cinética e
inhibición enzimática, a partir de
procedimientos de laboratorio que describen
el comportamiento bioquímico de las
enzimas.
Objetivo general.
Relacionar los conceptos de la cinética

enzimática para determinar la inhibición por
factores físicos y químicos, a partir de
procedimientos de laboratorio que describen
el comportamiento bioquímico de las
enzimas.
53
Competencia

laboratorio de la cinética enzimática y su
inhibición por agentes físicos y químicos
como la temperatura, el pH y la
concentración de sustrato a través de
medidas experimentales químicas.
Las enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH;

amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus
aminoácidos. El pH óptimo de una enzima puede guardar relación con
cierta carga eléctrica de la superficie, o con condiciones óptimas para la
fijación de la enzima a su sustrato. Cuando hay un exceso de iones
hidrogeno, las enzimas los unen a sus moléculas y ante un déficit los
ceden.
Según el pH del medio, estos grupos pueden tener carga eléctrica

positiva, negativa o neutra. Como la conformación de las proteínas
depende, en parte, de sus cargas eléctricas, habrá un pH en el cual la
conformación será la más adecuada para la actividad catalítica, este es
el llamado pH óptimo. Cuando la concentración de iones hidrógeno es
muy baja en comparación con la concentración óptima, la molécula los
cede desapareciendo cargas positivas o apareciendo cargas negativas en
su superficie. Ante una concentración elevada de iones hidrógeno,
algunos se fijan a la molécula desapareciendo cargas (-) o poniendo
cargas (+) que no existían.
54
La mayoría de las enzimas son muy sensibles a los cambios de pH.
Desviaciones de pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo
pueden afectar drásticamente su actividad. Así, la pepsina gástrica tiene
un pH óptimo de 2, la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH
10. Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalización
de la proteína, los seres vivos han desarrollado sistemas más o menos
complejos para mantener estable el pH intracelular: Los amortiguadores
fisiológicos.
La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama

temperatura óptima. En general, los aumentos de temperatura aceleran
las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento, la velocidad de
reacción se duplica. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta
ley general. Sin embargo, al final, si la energía cinética de la enzima
excede a la barrera energética, se rompen los enlaces débiles de
hidrogeno que conservan su estructura secundaria y terciaria.
A esta temperatura predomina la desnaturalización con pérdida

precipitada de la actividad catalítica. Por tanto las enzimas muestran una
temperatura óptima de acción. Los límites de actividad para la mayor
parte de las enzimas tiene lugar entre los 10°C y 50°C; la temperatura
óptima para las enzimas en el cuerpo se halla alrededor de 37°C.
En la práctica se determinará el efecto de factores físicos y químicos en

la cinética enzimática de la enzima amilasa salival, mediante el análisis
de cambios colorimétricos.
55
Equipos
• Baño de María
• Plancha de Calentamiento
Materiales
• Vasos de precipitados de 100, 200 mL.

• Pipeta graduada de 5, 10 mL.
• Gradilla.
• Agitadores de vidrio
• Cinta indicadora de pH
Reactivos
• Lugol
• Reactivo de Benedict
• Solución de Almidón al 2%
• HCl 0,1N
• NaOH 0,1M

No Aplica

56
Metodología
Procedimiento
Parte I. Efecto del pH sobre la actividad amilasa salival.
1. Prepare una solución de amilasa salival diluida, para esto tome 1mL
de saliva y adicione 9mL de agua destilada, agite cuidadosamente
hasta formar una solución homogénea.
2. Tome tres tubos de ensayo y adicione:
• Tubo 1: 2mL de HCl 0,1N + 2mL de solución de almidón al
2%
• Tubo 2: 2mL de NaOH 0,1N + 2mL de solución de almidón al
2%
• Tubo 3: 2mLde agua destilada + 2mL de solución de almidón
al 2%
3. Adicione 2mL de solución de amilasa salival diluida a cada tubo de
ensayo.
4. Agite bien y mida rápidamente el pH de cada tubo , para esto utilice
cinta indicadora de pH, compare el color obtenido con el de la
escala.
5. Coloque los tres tubos en baño de maría a 37°C durante 15
minutos.
6. Transcurridos los 15 minutos, por cada una de las tres condiciones
evaluadas (HCL 0,1N, NaOH 0,1N y Agua destilada) tome dos tubos
de ensayo y transfiera 1mL de la solución.
7. En un tubo, realice el ensayo de yodo, por adición de 2 gotas de
Lugol y en el otro adicione 2mL de reactivo de Benedict y lleve a
baño maría a ebullición
57
Parte II. Influencia de la temperatura en la velocidad enzimática
1. Prepare 8 tubos: cuatro de ellos con 2ml de almidón 2% y los otros

cuatro
con 2 ml de saliva diluida.
2. Colocar durante 15 minutos dos tubos, uno conteniendo almidón
y el otro saliva, a cada una de las cuatro temperaturas siguientes
(marque cada pareja de tubos según la temperatura a la que
se ensaya).
i. Baño de hielo (0OºC, ponga hielo en un vaso de precipitado
y añada un poco de agua, si dispone de nevera coloque todo
el montaje a 4° para garantizar la temperatura durante el
ensayo)
ii. Temperatura ambiente (20ºC)
iii. Baño maría a 37ºC B
iv. Baño maría a ebullición (100ºC).
3. Añadir al tubo que contiene el almidón el contenido del tubo que
tiene la saliva, agitar bien y dejar que siga a su temperatura
correspondiente
4. Empiece a contar el tiempo (los tubos deben mantenerse bien
inmersos en los respectivos baños para que la acción de la amilasa
tenga lugar a las temperaturas indicadas).Transcurridos 1, 2, 3,
4, 6 y 8 minutos tomar una muestra de 0,5 ml de cada tubo y
transferirlo a un tubo de ensayo y realizar la prueba de yodo.
5. Analice los cambios de coloración y realice las comparaciones entre
las cuatro condiciones de temperatura evaluadas.

58
parte del aprendiente, informes y pre informes de laboratorio. La


diferente al propuesto en las guías de cada práctica, procedimiento
elaborado en un mapa conceptual, tablas de registro de datos
obtenidas de las prácticas de laboratorio, cálculos realizados,
análisis y resultados obtenidos, conclusiones y bibliografía.

de máximo 4 estudiantes según lo estipule el tutor de componente
práctico.

Retroalimentación
con el tutor.
59
5. Anexos.
Presentación de preinformes
Se sugiere que los preinformes de laboratorio sean de 4 páginas máximo,

en los cuales los estudiantes deben incluir:
• Datos: Nombre y grupo de laboratorio

• Marco Teórico elaborado en un mapa conceptual
• Procedimiento elaborado en un mapa conceptual
• Hoja de seguridad de los reactivos utilizados
• Bibliografía
Este documento debe estar hecho con base en las siguientes

características
• Editor de texto MS Word para Windows

• Fuente: Verdana
• Tamaño fuente: 10
• Espacio entre líneas: Sencillo
• Márgenes: izquierda, derecha, superior e inferior de 3 cm.
• Títulos en la fuente, tamaño 12 y centrado.
• Subtítulos en cursiva, tamaño 11
60
Presentación de informes
Se sugiere que los informes de laboratorio sean de máximo grupos de 4

personas, en los cuales los estudiantes deben incluir:
• Datos: Nombres de los integrantes y grupo de laboratorio

• Marco Teórico elaborado en un mapa conceptual
• Procedimiento elaborado en un mapa conceptual
• Tablas de registro de datos obtenidas de las prácticas de
laboratorio
• Análisis y resultados obtenidos
• Conclusiones
• Bibliografía
Este documento debe estar hecho con base en las siguientes

características
• Editor de texto MS Word para Windows

• Fuente: Verdana
• Tamaño fuente: 10
• Espacio entre líneas: Sencillo
• Márgenes: izquierda, derecha, superior e inferior de 3 cm.
• Títulos en la fuente, tamaño 12 y centrado.
• Subtítulos en cursiva, tamaño 11
61
62

Protocolo de Prácticas de Laboratorio de Bioquímica

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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGIA E INGENIERIA

Protocolo de práctica de laboratorio de Bioquímica

LEONARDO BONILLA RAMÍREZ

Las guías del componente práctico del curso de Bioquímica fueron

La presente Guía fue diseñada y actualizada por Biólogo, Magister y

Para la presente actualización se recibieron observaciones, sugerencias y

✓ Reconocimiento. Debe reconocer los créditos de la obra de la

✓ No comercial. No puede utilizar esta obra para fines comerciales.

✓ Sin obras derivadas. No se puede alterar, transformar o generar

✓ Al reutilizar o distribuir la obra, tiene que dejar bien claro los

✓ Alguna de estas condiciones puede no aplicarse si se obtiene el

✓ Nada en esta menoscaba o restringe los derechos morales del autor.

4.1. Práctica No. 1. Bioseguridad. 9

4.2. Práctica No. 2. Identificación de Lípidos 16

4.3. Practica No. 3. Extracción y Caracterización de ADN 22

4.4. Práctica No. 4. Extracción de la caseína, determinación del

4.5. Práctica No. 5. Cuantificación de proteínas por el método de

4.6. Práctica No. 6. Hidrólisis del Almidón 46

4.7. Práctica No. 7. Efectos de la temperatura, el pH y la

El componente práctico del curso de bioquímica

Durante el desarrollo de las prácticas favorecerá

Los contenidos de las prácticas fueron seleccionados,

Es requisito para los estudiantes en formación en

Intencionalidades Relacionar los procedimientos de laboratorio con los

Desarrollar en el estudiante la capacidad analitica

Aplicar los conceptos relacionados con la bioquímica

El estudiante aplica los conceptos teóricos de la

Práctica No. 1. Bioseguridad.

Porcentaje La rúbrica de evaluación del laboratorio 25% del

Seguridad Guantes de nitrilo, gafas de seguridad translucidas,

4.1 Práctica No. 1. Bioseguridad.

Tipo de practica Presencial X Autodirigida Remota

Conocer y aplicar las principales normas de

El estudiante relaciona de manera cognitivo

Las normas de seguridad en el laboratorio son protocolos establecidos

El vestuario para asistir a la práctica de laboratorio debe ser apropiado,

Normas para la utilización de productos químicos

Es importante que cada grupo de estudiantes, tengan asignado las

Antes de usar cualquier sustancia es importante leer la etiqueta qué el

Cada vez que se utilice una determinada sustancia química es

Al finalizar la tarea de laboratorio es importante consultar al docente de

Llevar de regreso todos los recipientes que contienen los reactivos

Al finalizar la práctica, limpia el área de trabajo y entrega los materiales

En caso de emergencia mantenga la calma y escuché las instrucciones

La práctica de bioseguridad consta de la observación del video sobre

Recursos a utilizar en la práctica (Equipos / instrumentos)

• Computador y video beam.

Software a utilizar en la práctica u otro tipo de requerimiento

No se necesita software adicional.

Guantes de nitrilo, gafas de seguridad translucidas, blusa para

1. Para el desarrollo de esta práctica el estudiante debe observar el

La evaluación se llevará a cabo por medio de las siguientes

1. Evaluación parcial presencial al iniciar la práctica (Quiz)

2 .Asistencia, participación acorde con las normas de bioseguridad y

La valoración de la práctica se dará en términos de una nota de 0.0 a

Informe o productos a entregar

• El Preinforme (entregarlo antes de comenzar la práctica) debe

o Explicación de los principales elementos de protección

• Informe (entregarlo después de realizada la práctica, cuando lo

El tutor de laboratorio hará la correspondiente retroalimentación 15 días

Identificar propiedades de los ípidos