Universidad Central de Ecuador

Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Inmunología
Informe N° 1

Nombre: Brigitd Ortiz Fecha: 21/10/2019 Curso: Tercero ´´A´´

Docente: MVZ. Lucía Cabascango MSC.

Título: Frotis sanguíneo

1. Objetivo
Realizar un frotis de tejido sanguíneo e identificar células sanguíneas con la técnica
de Diff Quick.

2. Introducción

Es muy importante conocer la morfología y las características de tinción de las diferentes

células sanguíneas para diferenciarlas y clasificarlas. Por lo que debe haber una técnica de
frotis y tinción adecuada. Sin embargo, para una buena identificación se usa la tinción
Wrigth- Giemsa (tinción policrómica), que tiene afinidad por los grupos básicos pero en la
práctica se utilizó tinción de Diff Quick esta es una tinción rápida que se realiza en tres pasos.
(Carr & Rodak, 2014).
Sin embargo, este tipo de tinción rápida presenta ciertos inconvenientes, como la
formación de precipitados, si se usa sangre con heparina como anticoagulantes o la
incapacidad de distinguir ciertos elementos intracelulares como parásitos hemáticos
(Samour, 2010).
Por otro lado existe una variedad de métodos para la preparación del frotis de sangre, pero
la más común es la técnica del portaobjetos en cuña, esta requiere dos portaobjetos limpios.
Uno de estos funcionara como extensor y en el otro se realizara el extendido sanguíneo. Es
recomendable que la capa de extendido sea sumamente fina y tenga una distribución
uniforme para una mejor observación al microscopio. Es importante contar con un extendido
bien teñido (Samour, 2010).
3. Métodos y materiales

Microscopio compuesto
Portaobjetos
Muestra de sangre con EDTA
Capilares
Pipeta plástica
Equipo de protección personal
Colorante Diff Quick

1. Colocar una gota de sangre en el portaobjetos y realizar el frotis (extender la

gota con un ángulo de 45 grados) uniformemente.
 2. Colocar el frotis secado al aire sobre la cubeta de tinción.
3. Cubrir completamente el portaobjetos con la solución de fijación (metanol)
uniformemente por un minuto y lavar.
4. Repetir el proceso anterior con la solución de eosina y luego la tinción II (azul
de metileno), dejar un minuto y enjuagar.
5. Secar al ambiente y observar al microscopio.

4. Resultados

Para la práctica se usó una muestra humana de mujer en esta evidenció células
sanguíneas blancas, en su mayoría linfocitos, en poca cantidad eosinófilos y un
eosinófilo cayado.
En la figura 1 y 2 se observa la técnica, en la figura 3 se observa las tinciones dos
incorrectas debido a que no tienen buena coloración y tiene una especie de camino en
donde no se puede apreciar las células, a diferencia de la placa con una tinción
correcta claramente se nota una uniformidad en la tinción.
Finalmente en la figura 4 en el campo óptico se evidencia las células sanguíneas
con una excelente coloración.

Figura 1. Técnica de frotis sanguíneo

a b

c d

Figura 1. a) Muestra de sangre con aticoagulante EDTA, b) Gota de sangre en el

portaobjetos, c) Técnica de frotis a 45o y d) Placas con el extendido sanguíneo.
Fuente: (Ushiña & Cabezas, 2019)
 Figura 2. Técnica de tinción Diff Quik

a b c

d e

Figura 2. a) Muestra con solución de fijación, b) Muestra con solución de tinción

(eosina), c) Muestra con solución de tinción II, d) Enjuague y e) Resultado
Fuente: (Ushiña & Cabezas, 2019)

Figura 3. Resultados Figura 4. Resultados

Figura 3. a) Tincion incorrecta, b) Figura 4. Muestra humana (mujer)

Tinción incorrecta (eosina) y c) Células sanguíneas blancas, vistas con el
5. Conclusiones
tinción correcta lente objetivo de 40x/4000x
Fuente: (Ushiña & Cabezas, 2019) Fuente: (Ushiña & Cabezas, 2019)

6. Conclusiones
 Al realizar el frotis se pudo obtener un extendido bastante fino, este paso es
clave debido que en una placa con una capa gruesa de extendido no se puede
observar bien. Este proceso se lo logra con un buen ángulo del portaobjetos
extensor que debe ser de 30 a 45 grados de inclinación.
Además, es importante realizar el frotis de una manera rápida para evitar que
la sangre se coagule.
Se logró identificar y diferenciar las células sanguíneas.
Para la tinción se debe tener una buena técnica con el tiempo debido a que
esto influye mucho en la coloración final y nos puede quedar la placa con
grumos o caminos como se evidencio en la figura 3.

7. Referencias

Carr, J., & Rodak, B. (2014). Atlas de Hematología clínica. Obtenido de

https://books.google.com.ec/books?id=qvBh3LtPRYMC&printsec=frontcover&dq=frotis+s
anguineo+practica+de+laboratorio&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwj0y5WimqvlAhWswFkKHSJOByAQ6AEIKDAA#v=onepage&q&f=fa
lse
Samour, J. (2010). Medicina aviaria. Obtenido de
https://books.google.com.ec/books?id=vvclCQpqYD4C&pg=PA48&dq=tecnica+de+frotis+c
elulas+sanguineas&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwjLhrX40q7lAhXHmVkKHU_TCpQQ6AEILzAB#v=onepage&q=tecni
ca%20de%20frotis%20celulas%20sanguineas&f=false
Ushiña, S., & Cabezas, N. (18 de Octubre de 2019). Técnica de frotis sanguíneo. Fotografías en el
laboratorio de patología. Quito.