Replicación del ADN Biología molecular

DEFINICIÓN
FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS • Es el proceso por el que las células sintetizan una
Y BIOQUÍMICA copia idéntica de una molécula de ADN, usando el
ADN existente como molde de nuevas hebras de
ADN.
BIOLOGÍA MOLECULAR

REPLICACIÓN DEL ADN

Mg. Q.F. OSCAR MUGURUZA

Prof. Oscar Muguruza

REQUERIMIENTOS IMPORTANCIA
• Cadena de ADN molde. • La transferencia de información genética de padres a
• Presencia de desoxirribonucleótidos y ribonucleótidos hijos constituye el fenómeno más importante de la
libres en el núcleo. materia viva, garantiza la sucesión de la vida y
• Proteínas enzimáticas para la identificación del constituye el mecanismo básico de conservación de
origen, desarrollo de la cadena de ADN, separación las especies, pues los descendientes siempre
de las bandas y unión de las polimerasas poseen características estructurales y funcionales
específicas. similares a los progenitores.
• Enzimas: ADN polimerasa, primasa, helicasa, ADN • La transferencia de información genética de una
ligasa y topoisomerasa. célula o un organismo a sus descendientes tiene su
fundamento molecular en la replicación del ADN.

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CARACTERÍSTICAS REPLICACIÓN DEL ADN

• Tiene lugar en la fase S del ciclo celular. • 1. El desenrollamiento es efectuado por helicasas, las cuales recorren la hélice,
desenrollando las cadenas a medida que avanzan.
• Es semiconservativa.
• 2. Una vez que las cadenas están separadas, proteínas desestabilizadoras de la
• La reacción comienza en el origen y es bidireccional. hélice se unen por separado a cada cadena, impidiendo que vuelva a formarse la
• El ADN es sintetizado siempre en sentido 5`→3´ por ADN polimerasas. doble hélice mientras se copian las cadenas.
• 3. Las topoisomerasas producen roturas en la molécula de ADN y después vuelven a
• En la horquilla de replicación la cadena adelantada se sintetiza unir cada cadena, liberando la tensión (previenen nudos).
continuamente en la misma dirección que el movimiento de la horquilla
de replicación; la cadena atrasada se sintetiza de forma discontinua en
fragmentos de Okazaki, que son unidos posteriormente.
• Para los eucariontes es más complejo que para los procariontes pero
fundamentalmente es el mismo proceso.
• Es fundamental para la transferencia de la información genética de
generación en generación.
• Garantiza la disponibilidad de una copia del genoma de la célula
madre, para cada una de las células hijas.
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Replicación del ADN
REPLICACIÓN DEL ADN
• 4. La duplicación del ADN comienza en sitios específicos de la molécula de ADN,
denominados orígenes de la duplicación (o punto de crecimiento), y ambas cadenas
se duplican al mismo tiempo en una estructura en forma de Y llamado horquilla o
burbuja de replicación. Se necesita un cebador o primer (primeros nucleótidos
creados de ARN) colocados por la primasa para que la ADN polimerasa continúe la
replicación.
• 5. La posición de la horquilla de duplicación está en constante desplazamiento a
medida que el proceso avanza a cargo de dos moléculas de ADN polimerasa
idénticas.
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• 8. Finalmente en este proceso se liberan dos moléculas de ADN, cada una conserva
una cadena original y tiene otra cadena nueva (replicación semiconservativa).
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FIDELIDAD DEL PROCESO
• La replicación del material genético ocurre una sola vez durante el ciclo
de vida de la célula por lo que es imprescindible que sea realizado con
una elevada fidelidad de copia, que la secuencia de bases de las
moléculas hijas sea exactamente igual a la de las células madre.
• Existen mecanismos que garantizan esta elevada fidelidad de copia:
- La elevada especificidad del apareamiento de bases formando los
pares adenina-timina y citosina-guanina.
- La elevada especificidad de las polimerasas que incorporan los
desoxinucleótidos que forman pares complementarios al ADN que se
está copiando.
- Utilización de un ARN iniciador que al ser eliminado y reemplazado
por el segmento de ADN correspondiente provoca que estas zonas
sean rectificadas siempre.
- Existencia de un mecanismo de rectificación de errores.
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Biología molecular
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• 6. Debido a la replicación obligatoria por la ADN polimerasa, existe una cadena
continua (adelantada) y una discontinua (atrasada), ésta última se va construyendo
por partes (creando los fragmentos de Okazaki).
• 7. Al igual que con la cadena continua, cada segmento de Okazaki es iniciado por un
ARN cebador distinto y crece hacia el extremo 5’ del fragmento previamente
sintetizado por la ADN polimerasa. Al terminar, dicho ARN se degrada, y el espacio
resultante es llenado con ADN. Los fragmentos son unidos luego por la ADN ligasa.
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RECTIFICACIÓN DE ERRORES
• La replicación del ADN tiene una exactitud muy elevada, la posibilidad de error es de
uno por cada 1010 nucleótidos incorporados por las ADN polimerasas, sin embargo
siempre existe la posibilidad de que ocurran incorrecciones como las siguientes:
- Mal apareamiento de las bases.
- Inserción incorrecta de bases.
- Supresión de bases.
• Estos errores son rectificados antes de que se produzca la transición hacia la próxima
etapa del ciclo celular y este trabajo se realiza de la forma siguiente:
- El sitio del error es reconocido por un grupo de proteínas específicas para cada
error.
- La hebra que contiene el error es cortada en un sitio por la actividad hidrolítica de
una enzima del tipo endonucleasa.
- Los nucleótidos de este sector son eliminados uno a uno por una exonucleasa.
- Los nucleótidos correspondientes son incorporados por la polimerasa.
- La brecha es sellada por la ADN ligasa.
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INHIBIDORES DE LA REPLICACIÓN
• La replicación puede ser inhibida por la actuación de
algunos antibióticos y antivirales, entre los que se
encuentran:
- Actúan sobre la cadena molde: Actinomicina D y
Metropsina.
- Actúan sobre las proteínas replicativas: Ácido
nalidíxico y novobiocina.
- Actúan sobre la cadena en crecimiento: AZT,
desoxiadenosina, didanosina (ddl) y timidina.
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Biología molecular
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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• WATSON, J. Molecular Biology of the Gene. 5ta edición. España:
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Zipursky, S y J. Darnell. Biología Celular y
• Molecular. 5ta. Edición. Argentina. Editorial Médica Panamericana.
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• DEVLIN, Thomas. ”Bioquímica“; Edit. Reverte–4º edición. 2004.
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• DARNELI. “Biología Molecular y Celular” – Edit. Omege – Madrid –
España 2005
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