SEPARACIÓN DE FOSFOLÍPIDOS POR CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA Y

DETERMINACIÓN DE COLESTEROL EN LA YEMA DE HUEVO

3FV2 Sección 1
Introducción Separación de fosfolípidos por
cromatografía en capa fina
Los lípidos son un grupo heterogéneo de
biomoléculas; se definen por su insolubilidad Reactivo Rf Rf Rf Rf Rf Rf.
en agua y su solubilidad en disolventes no Lípidos F. F. F. Esfin- L.
polares. Se clasifican en saponificables, estos Neutros Etanol- Serina Colina Gomiel- Colina
contienen ácidos grasos en su estructura Amina ina
como son los ácidos grasos saturados e
Rf6 Rf5 Rf4 Rf3 Rf2 Rf1
insaturados, los fosfolípidos, ceras y Molibdato --- --- 0.41 0.30 0.29 0.16
esfingolípidos. Y los no saponificables como
Bismuto --- --- --- 0.55 0.39 0.29
son los esteroides, terpenos y
Ninhidrina --- 0.8 0.45 --- --- ---
prostaglandinas.
Yodo 0.98 0.83 0.62 0.42 0.33 0.19
Los fosfolípidos son lípidos que contienen un
grupo fosfato, son los principales
constituyentes lipídicos de las membranas
biológicas, se encuentran en los tejidos de
plantas y animales.

Dentro de los esteroides, el colesterol es el

mejor conocido y más abundante en el cuerpo
humano, forma parte de las membranas
biológicas y es el percusor de las hormonas
sexuales, ácidos biliares, vitamina D y otras
sustancias.

Objetivo
Identificar los fosfolípidos presentes en la
yema de huevo utilizando la técnica de Determinación de colesterol en la yema
cromatografía en capa fina. de huevo
Determinar la concentración de colesterol
en la yema de huevo, aplicando el Cálculos de la concentración de colesterol
fundamento de la reacción de Lieberman-
4mg 50ml.
Burchard.
x 1ml.
. X= 0.08 mg = 80µg
Tubo 1. 1 ml. 80 µg colesterol
0.25 ml. x
x= 20 µg
Tubo 2. 1 ml. 80 µg colesterol
0.50 ml x
x= 40 µg
Tubo 3. 1 ml. 80 µg colesterol esfingomielina, el reactivo de ninhidrina
0.75 ml. x identificaría al fosfatidil etanol-amina y
x= 60 µg fosfatidil serina mientras que el yodo
revelaría lípidos neutros; f. etanolamina; f
Tubo 4. 1 ml. 80 µg colesterol
serina; f. colina; Esfingomielina y l.
1.00 ml x
colina, por tener las características
x= 80 µg
estructurales que revelan los reactivos
Tubo 5. 1 ml. 80 µg colesterol antes mencionados
1.25 ml x
Determinación de colesterol en la yema
x=100µg
de huevo
T problema. Absorbencia=0.354
La yema de huevo posee una
Con la ecuación de la recta, se despeja x: concentración de colesterol de 200 mg
según la bibliografía, al compararla con el
0.0313 + (0.354)
𝑥= = 𝟕𝟎. 𝟖𝟑µ𝐠 valor obtenido que fue de 99.16 mg.
0.005 Podemos decir que existen factores que
3.5 ml. 3500µL afecten esta diferencia, una de ellas puede
ser el tamaño de huevo, ya que en la
5 µL 70.83 µg
bibliografía indica que esa concentración
3500 µL x se encuentra en la yema de un huevo que
pesa aproximadamente 60 gramos. Otro
X= 49581 µg = 49.581mg ½ yema factor es que el huevo pudo haberse
99.16 mg yema encontrado en un estado de refrigeración,
completa o expuesto a los rayos solares. Y un
último factor es que depende de cómo sea
Anexo de la curva tipo. el huevo, por ejemplo, puede ser huevo
comercial, huevo orgánico o huevo
comercial.
Discusión Conclusión
Separación de fosfolípidos por
Separación de fosfolípidos por
cromatografía en capa fina
cromatografía en capa fina
A una muestra de yema de huevo se le
La separación de los fosfolípidos en capa
realizó una cromatografía en capa fina,
fina y la adición de los distintos reactivos
para identificar con un reactivo específico
demuestran la composición de cada uno
distintos tipos de fosfolípidos presentes
de los fosfolípidos que integran la yema
en la misma, la tabla ya realizada, indica
de un huevo, correspondiente a cada
el tipo de fosfolípido revelado por cada
animal.
uno. Según las manchas del
cromatograma, se esperaría según la La técnica de cromatografía en capa fina
literatura que el reactivo de bismuto es muy buena técnica para separar, los
identificará a la fosfatidil colina y la resultados se obtienen de inmediato a
comparación de una cromatografía en
papel, pero una desventaja es que los
resultados se mantienen muy poco
tiempo, y para la aplicación se requiere
mucho cuidado, ya que se puede dañar la
silica gel.
Determinación de colesterol en la yema
de huevo
Se determinó la concentración de
colesterol de la yema de huevo por medio
de la reacción colorida de Liberman-
Burchard .

Bibliografía

 www.alimentacionynutricion.org/
es/index.php%3Fmod%3Dcontent
_detail%26id
%3D90+&cd=4&hl=es&ct=clnk
&gl/aspectos_basicos_huevo/
 http://www.institutohuevo.com/im
ages/archivos/ana_barroeta._el_h
uevo_alimento_funcional08_1313
5328.pdf