32.estudo Fitoquímico e Atividades Biológicas Do Limãozinho (Zanthoxylum Syncarpum Tull.)

Silva et al., Revista Brasileira de Higiene e Sanidade Animal (v.8, n.1) p.
37 – 53 jan - març (2014)
http://www.higieneanimal.ufc.br Artigo Cientifico
http://dx.doi.org10.5935/1981-2965.20140003
Estudo fitoquímico e atividades biológicas do limãozinho (Zanthoxylum syncarpum Tull.)

Phytochemical studies and biological activities little lemon (Zanthoxylum syncarpum Tull.)
Antonio Adailson de Sousa Silva*1, José Milton Ferreira Júnior2, Maria Goretti de
Vasconcelos Silva3, Selene Maia de Morais4.
1
Biólogo, Mestre em Ciências Veterinárias, Núcleo de Pesquisa em Sanidade Animal,
Faculdade de Veterinária, Universidade Estadual do Ceará, Fortaleza, CE, Brasil; e-mail:
adailsonbio@yahoo.com.br
2
Químico, Doutorando em Biotecnologia, Laboratório de Produtos Naturais, Universidade
Estadual do Ceará, Fortaleza, CE, Brasil;
3
Professora Associada da Universidade Federal do Ceará.
4
Química Industrial, Doutora em Química Orgânica, Professora Titular da UECE, Laboratório
de Produtos Naturais, Fortaleza, CE, Brasil.
___________________________________________________________________________
Resumo: Algumas doenças consideradas negligenciadas, como o dengue e a

leishmaniose, ainda não têm medicamentos e/ou formas de controle eficazes. O gênero
Zanthoxylum apresenta vários metabólitos secundários como alcaloides, flavonoides,
cumarinas, lignanas e terpenos, e tem sido amplamente utilizado na medicina popular para
diversos fins. O objetivo deste estudo foi identificar os principais compostos do extrato
etanólico das folhas do limãozinho (EEFL), Zanthoxylum syncarpum Tull. e avaliar sua
atividade contra Artemia salina, Aedes aegypti e Leishmania infantum chagasi e inibição da
acetilcolinesterase (AChE). O teste de toxicidade frente à A. salina foi realizado nas
concentrações de 1.000, 100, 10 e 1 μg/mL com 10 larvas por tubo. A atividade contra A.
aegypti foi testada nas concentrações de 1000, 500, 250, 100 e 50 μg/mL com 25 larvas por
tubo. O ensaio leishmanicida foi realizado em placa de 96 poços, com 106 parasitos por poço
com EEFL nas concentrações de 100, 50, 25, 12,5 e 6,25 µg/mL. Para determinar a atividade
de inibição da AChE foram usadas soluções de ácido 5,5’-ditiobis-2nitrobenzóico e iodeto de
acetilcolina em tampão em cromatoplaca. A inibição foi verificada com base na medição da
espessura dos halos brancos em torno das amostras. Dicromato de potássio, pentamidina e
fisostigmina foram usados como droga padrão para os testes artemicida, leishmanicida e
anticolinesterásico respectivamente. Todos os ensaios foram realizados em triplicatas. O
37
Silva et al., Revista Brasileira de Higiene e Sanidade Animal (v.10, n.1) p. 37 – 53 jan - març (2014)
EEFL apresentou CL50 com valores de 17,73 e 49,39 µg/mL para A. salina e A. aegypti
respectivamente e contra L. infantum chagasi, apresentou CE50 semelhante à droga padrão,
com valores de 16,03 e 23,71 µg/mL respectivamente. A partir destes resultados, conclui-se
que o EEFL, Z. syncarpum Tull. apresenta alternativa para o desenvolvimento de drogas
leishmanicidas e larvicidas.
Palavra-chave: Atividade leishmanicida, Larvicida, Zanthoxylum syncarpum Tull.
Abstract: Some considered neglected diseases such as dengue and leishmaniasis, still
do not have drugs or forms of effective control. The genus Zanthoxylum presents various
secondary metabolites such as alkaloids, flavonoids, coumarins, lignans and terpenes, and has
been widely used in folk medicine for various purposes. The aim of this study was to identify
the main compounds of the ethanol extract of the leaves of the limãozinho (EEFL),
Zanthoxylum syncarpum Tull. and assess their activity against Artemia salina, Aedes aegypti
and Leishmania infantum chagasi and inhibition of acethylcholinesterase (AChE). The
toxicity test in A. Saline was performed at concentrations of 1000, 100, 10 and 1 µg/mL with
10 larvae per tube. The activity against A. aegypti were tested at concentrations of 1000, 500,
250, 100 and 50 µg/mL with 25 larvae per tube. The antileishmanial assay was performed in a
96 well plate with 106 parasites per well EEFL with concentrations of 100, 50, 25, 12.5 and
6.25 µg/mL. To determine the activity of AChE solutions were used 5,5'-dithiobis
2nitrobenzóico and acetylcholine iodide in buffer cromatoplaca. The inhibition was observed
based on the measurement of the thickness of the white halos around the samples. Potassium
dichromate, pentamidine and physostigmine were used as standard drug for artemicida tests,
leishmanicidal and anticholinesterase respectively. All assays were performed in triplicate.
The EEFL presented LC50 with values of 17.73 and 49.39 µg/mL for A. salina and A. aegypti
and respectively against L. infantum chagasi, showed a similar pattern to the drug, with values
of EC50 16.03 and 23.71 µg/mL, respectively. From these results, it is concluded that the
EEFL, Z. syncarpum Tull . shows an alternative for the development of antileishmanial drugs
and larvicides.
Key words: Leishmanicidal activity, Larvicidal, Zanthoxylum syncarpum Tull.
_____________________________
Autor para correspondência: e-mail: adailsonbio@yahoo.com.br
Recebido em 10.1.2014. Aceito em 30.3.2014.
Introdução farmacológicos de plantas medicinais que

Os estudos químicos e
visam obter novos compostos com
propriedades terapêuticas têm obtido são descritas 25 espécies de Zanthoxylum,
grandes avanços nos últimos anos. A dentre estas, a espécie Z. syncarpum Tull.
utilização de plantas medicinais sempre foi conhecida popularmente por “limãozinho”,
um recurso terapêutico alternativo de têm sua ocorrência principalmente na
grande aceitação pela população e região nordeste, em especial nos estados do
ultimamente vem crescendo junto à Ceará, Rio Grande do Norte, Paraíba e
comunidade médica, desde que sejam Pernambuco (ROSS et al., 2004; VIEIRA
utilizadas plantas cujas atividades et al., 2009). As plantas deste gênero
biológicas tenham sido investigadas apresentam uma grande variedade de
cientificamente, comprovando sua eficácia metabólitos secundários como alcaloides,
e segurança (CECHINEL FILHO, 1998). flavonoides, cumarinas, lignanas e
As plantas medicinais terpenos, e tem sido objeto de estudo
constituem a melhor fonte para obtenção devido principalmente às suas
de uma grande variedade de drogas propriedades febrífugas, sudoríferas e
(BERTINI et al., 2005). Portanto, o estudo diuréticas, além de serem amplamente
de princípios biologicamente ativos de utilizadas pela medicina popular no
plantas, é urgentemente necessário. tratamento de doenças cardiovasculares,
Gebhardt et al. (2000), reforçam que a tuberculose, malária, dor de dente e contra
elucidação destes compostos, bem como alguns tipos de mordidas de cobra
seus mecanismos de ação, vem sendo um (FACUNDO et al., 2005).
dos maiores desafios para a química Inúmeras doenças consideradas
farmacêutica, bioquímica e a farmacologia. negligenciadas, como o dengue e a
O gênero Zanthoxylum leishmaniose, não têm ainda medicamentos
(Rutaceae) compreende cerca de 200 e/ou vacinas eficazes. Portanto, as plantas
espécies de árvores, arbustos e lianas podem fornecer compostos bioativos para
distribuídas em todo o mundo. No Brasil o desenvolvimento de fármacos para o

tratamento destas doenças. dengue. O controle do A. aegypti é feito
O dengue é uma infecção utilizando inseticidas organofosforados
reemergente que desperta preocupação nas como temephos, malathion e fenitrothion,
autoridades sanitárias de todo o mundo, constituindo a principal medida adotada
por ser uma arbovirose com circulação nos pelos Programas de Saúde Pública
cinco continentes e elevado potencial para (MACORIS et al., 2003). No entanto, o
assumir formas graves e letais uso contínuo de inseticidas sintéticos tem
(HALSTEAD, 1997). Considerada um dos elevado à resistência de muitas populações
principais problemas de saúde publica no de mosquito, além de causar poluição
mundo, a OMS estima que 2,5 bilhões de ambiental e toxicidade a organismo não
pessoas estão sob risco de contrair dengue alvo. Estes fatores têm estimulado a
e que ocorram anualmente cerca de 50 procura por métodos alternativos para o
milhões de casos. Desse total, cerca de 550 controle do mosquito (GARCEZ et al.,
mil necessitam de hospitalização e pelo 2013).
menos 20 mil morrem em consequência da Outro grupo de doenças
doença (BRASIL, 2009). consideradas negligenciadas é o das
Nesse contexto, o dengue leishmanioses, zoonoses causadas por
tornou-se um problema contemporâneo e protozoários Leishmania spp., endêmicas
urgente para o sistema sanitário mundial em 98 países, com uma estimativa de dois
(GARCEZ et al., 2013) e até o presente milhões de novos casos por ano, sendo que
momento, não foi desenvolvido nenhum 500 mil são de leishmaniose visceral (LV),
tratamento preventivo ou curativo do potencialmente fatal (WHO, 2010). No
Dengue. A principal estratégia adotada Brasil, a LV é causada pela L. infantum
para diminuir sua incidência consiste em chagasi (SILVA et al., 2007).
controlar a população de larvas de Aedes Atualmente, o arsenal
aegypti, vetor do arbovirus causador do terapêutico disponível para tratamento da

leishmaniose é considerado precário, sendo 2. Material e métodos
restrito a duas classes de medicamentos: os 2.1 Planta utilizada
antimoniais e os não antimoniais (GIL et Foi utilizada neste estudo, a
al., 2008), ambos apresentam alta espécie Zanthoxylum syncarpum Tull.,
toxicidade e resistência (TEMPONE et al, popularmente conhecida como limãozinho.
2005). Outros fatores inconvenientes ao As folhas do limãozinho foram coletadas
tratamento convencional são as vias de no horto medicinal da Universidade
aplicação, que geralmente são dolorosas e Estadual do Ceará, Campus do Itaperi, em
desconfortáveis e o fármaco precisa ser Fortaleza, Ceará, em janeiro de 2013. A
administrado diariamente por longos exsicata foi confeccionada e depositada no
períodos, o que muitas vezes requer Herbário Prisco Bezerra da Universidade
hospitalização acarretando em desconforto Federal do Ceará, sob o número 51937.
ao paciente e alto custo aos cofres públicos 2.2 Preparação do extrato etanólico
(BRAGA et al, 2007). das folhas do limãozinho (EEFL)
Portanto, novos e melhores O extrato etanólico das folhas
medicamentos são urgentemente do limãozinho (EEFL) foi preparado com
necessários (OPPERDOES; MICHEL, base na metodologia proposta por
2008). Neste contexto, o objetivo deste PIZZOLATTI et al. (2003). As folhas do
trabalho foi qualificar os principais limãozinho foram coletadas, picadas e
constituintes químicos e avaliar o potencial colocadas para secar a 40 °C por uma
de atividade leishmanicida contra a L. semana. Subsequentemente, este material
infantum chagasi, larvicida contra Aedes foi moído e colocado em etanol comercial
aegypti e inibição da enzima (70%) por mais sete dias. Em seguida, a
acetilcolinesterase do limãozinho (Z. solução foi filtrada e o solvente etanol foi
syncarpum Tull.).
38
removido num evaporador rotativo, obtendo-se o EEFL.
2.3 Testes fitoquímicos cada concentração testadas. Um grupo
Os testes fitoquímicos controle foi preparado contendo apenas o
qualitativos de fenóis, esteróides, DMSO, água salina e as larvas. O controle
triterpenos, alcalóides e flavonóides foram positivo usado foi o dicromato de potássio.
realizados com base em MATOS (2009). Os ensaios foram realizados em triplicata.
Esses testes foram baseados na observação A contagem do número de larvas mortas
visual das mudanças de cor ou a formação foi realizada após 24 horas e esse número,
de precipitado após a adição dos reagentes usado para o cálculo da CL50 utilizando o
específicos. programa Microcal Origin versão 4.1.
2.4 Toxicidade frente à Artemia salina 2.5 Testes larvicida contra Aedes
O teste de letalidade contra A. aegypti
salina foi realizado de acordo com o Os bioensaios para determinar
método proposto por MEYER et al. a atividade larvicida frente ao vetor da
(1982), com algumas modificações. Ovos dengue e da febre amarela, o A. aegypti,
de A. salina foram incubados em água do foram realizados no Laboratório de
mar artificial à temperatura ambiente por Química de Produtos Naturais da
48 horas em um pequeno aquário. Com a Universidade Estadual do Ceará. As larvas
ajuda de uma fonte de luz, as larvas foram de A. aegypti foram gentilmente cedidas
atraídas para o claro e coletadas com pipeta pelo Núcleo de Controle de Vetores
de Pasteur e transferidas para um becher (Nuvet). O teste foi realizado de acordo
com água salina. O EEFL foi dissolvido com SILVA e SILVA (1999). Os ovos
em DMSO e água do mar nas foram eclodidos em água isenta de cloro.
concentrações de 1.000, 100, 10 e 1 Em condições normais, os ovos maduros
μg/mL. 10 metanáuplios foram transferidos eclodem após alguns minutos quando
para tubos de ensaio contendo 5 mL de submersos em meio líquido e apresentam

quatro estágios larvários. Foram dissolvidos em dimetilsulfoxido (DMSO) e
selecionadas as larvas no estágio 3. Para diluídos em meio Shneider (Sigma ®). A
tanto, o EEFL foi dissolvido em 0,3 mL de concentração final de DMSO não
DMSO e posteriormente diluído em 19,7 ultrapassou 1%. Os experimentos foram
mL de água para a preparação das realizados em placas de 96 poços com
concentrações do EEFL em recipientes de extratos nas concentrações de 100; 50; 25;
vidro transparentes. Posteriormente, 12,5 e 6,25 µg/mL. Os inóculos
colocou-se 25 larvas em cada frasco. Após constituíram-se de 106 parasitas por poço
24 horas realizou-se a contagem das larvas em fase logarítmica. O medicamento de
vivas, para determinar a concentração letal referência usado foi a pentamidina. Os
média (CL50), com o auxílio do programa controles negativos foram realizados com
estatístico Statplus 2009. 106 parasitas em meio Shneider (Sigma ®) e
2.6 Testes in vitro contra a forma 10% de PBS. As promastigotas foram
promastigota de Leishmania incubadas a 26°C por 48 horas.
infantum chagasi Posteriormente foi analisada a viabilidade
A metodologia utilizada para celular baseada na conversão do sal de
avaliar a atividade leishmanicida do EEFL terazólio MTT solúvel (3-[4,5-
sobre as formas promastigotas de L. dimetiltiazol-2-il]-brometo de 2,5-
infantum chagasi teve como base difeniltetrazólio (Sigma®) para dentro do
TEMPONE et al. (2001). Para isso, as formazan insolúvel por enzimas
leishmanias foram acondicionadas em mitocondriais. Vinte mL de MTT [5
meio Shneider (Sigma®) suplementado e mg/mL] por poço foram adicionados à
10% de PBS (tampão fosfato-salino) com cultura, mantida durante 4 horas a 26 °C.
diferentes concentrações do extrato e com Posteriormente foi adicionado 100 µL de
inóculo do parasito na ausência dos uma solução de dodecil sulfato de sódio
compostos (controle). Os extratos foram (SDS) a 10%: álcool isopropílico (1:1).

Após 15 minutos sob agitação, foi feito a composto capaz de inibir 50% do parasita),
leitura da densidade óptica no com um intervalo de confiança de 95%
espectrofotômetro a 570 nm. Os ensaios foram calculados usando uma curva de
foram realizados em triplicatas. regressão não-linear com o auxílio do
2.7 Inibição da enzima software de estatística GraphPad Prism 5.0.
acetilcolinesterase (AChE) A CL50 contra A. salina e A. aegypti, foi
Esse ensaio foi realizado com determinada através da análise do Probit,
base em RHEE et al., (2001), com utilizando o programa SPSS.
pequenas modificações. Foram usadas 3 Resultados e discussão
soluções de ácido 5,5’- ditiobis- Na busca por novos compostos
2nitrobenzóico (DTNB) e iodeto de com atividade leishmanicida e larvicida, as
acetilcolina (ATCI) em tampão. As plantas tem sido a principal fonte de
amostras foram aplicadas na cromatoplaca. pesquisas, uma vez que apresentam grande
Após evaporação do solvente, pulverizou- diversidade de compostos químicos. Neste
se o substrato (ATCI, 1mM em tampão) e estudo, foram realizados teste
o reagente de Ellman (DTNB, 1 mM em fitoquímicos, artemicida, larvicida,
tampão). Após 3 a 5 minutos borrifou-se a leishmanicida e atividade de inibição da
enzima (3U/mL) e em 10 minutos a placa enzima acetilcolinesterase (AChE) do
desenvolveu cor amarela. Halos brancos EEFL. Nos testes prévios para verificar a
apareceram em torno das amostras presença fenóis e taninos, obteve-se uma
indicando a inibição. Os halos foram mudança na tonalidade do composto inicial
medidos e comparados com o padrão, o para um verde profundo, indicando a
alcaloide fisostigmina. presença de taninos condensados. O teste
2.8 Análises estatísticas de antocianinas, antocianidinas e
Para a atividade leishmanicida, flavonoides, ao ser regulada com pH 11,
os valores da CE50 (concentração do apresentou uma coloração amarela,

sinalizando a presença de Flavonas, Na literatura há relatos de que
Flavonóis e Xantonas, que pertencem ao o limãozinho é boa fonte de alcaloides
grupo dos flavonoides. As antocianinas e (OLIVEIRA JÚNIOR et al., 2009).
antocianidinas não foram identificadas Confirmando esses achados, foi detectada
neste procedimento. A presença de a presença destes compostos (Tabela 1).
flavonóis foi confirmada através da Observou-se claramente a
metodologia de Barbosa (2004), ocorrendo formação de precipitado na presença de
o aparecimento e intensificação da cor reagentes de Mayer e Dragendorff. Os
vermelha, que é indicativo da presença de alcaloides, nas plantas e na pele de alguns
flavonoides. No teste de esteroides e anfíbios funcionam como mecanismo de
triterpenoides, surgiu coloração azul defesa contra seus predadores, sistema de
evanescente, passando posteriormente para armazenamento de energia e proteção
o verde profundo, indica a presença de contra a intensidade dos raios UV.
esteroides livre em solução. Enquanto que, Eles também correspondem aos
no teste para identificação de saponinas, principais terapêuticos naturais com ação:
não houve aparecimento de espuma anestésica, analgésica, psicoestimulantes,
consistente, indicando que não há neurodepressores etc.
saponinas na amostra estudada (Tabela 1).
Tabela 1 – Prospecção fitoquímica do EEFL
Componentes Presente Componentes Presente
Taninos Condensados X Xantonas X
Antocianinas - Esteroides X
Antocianidinas - Triterpenoides -
Flavonas X Saponinas -
Flavonóis X Alcaloides X
Na Determinação do Teor de toxicidade contra A. salina mostrou alta
Fenóis Totais, onde o resultado expresso atividade do EEFL, o que demonstra que
por mg de ácido gálico (EAG)/g de extrato este extrato é rico em metabólitos com
bruto foi de 166,74 mg EAG/g, atividades biológicas (Tabela 2). A
demonstrando alto teor de fenóis totais, atividade larvicida contra A. aegypti do
sendo uma fonte natural de compostos EEFL foi testada em cinco concentrações
fenólicos e possíveis alternativas para diferentes: 1000, 500, 250, 100 e 50 μg/mL
atividades biológicas. A. salina (Tabela 2). Foram usadas 25 larvas por
(Artemiidae), também conhecida como a tubo. Os testes foram realizados em
larva do camarão salmoura, é um triplicata para cada concentração. No
microcrustáceo invertebrado, normalmente Brasil, o controle das larvas de A. aegypti é
usada em ensaios biológicos para feito principalmente à base de
determinar a atividade e/ou toxicidade de organofosforados como o temefós, que é
compostos naturais. O uso de A. salina aplicado á uma concentração de 100
para este fim é justificado por ser um teste μg/mL nos locais que servem de criadouros
seguro, prático e econômico e estudos têm para larvas do mosquito (BRASIL, 2009).
demonstrado que esses ensaios são eficazes O temefós utilizado como droga
na pesquisa de substâncias leishmanicidas padrão frente à larvas de A. aegypti em
(BARBOSA et al., 2009). Quanto a concentração única de 100 μg/mL obteve-
toxicidade de compostos, Meyer et al. se taxa de mortalidade de 100% (TELES,
(1982) consideram uma substância bioativa 2009). O EEFL apresentou CL50 com valor
com CL50 até 1.000 µg/mL. O ensaio de de 49,39 μg/mL (Tabela 2).
38
Tabela 2: Toxicidade contra A. salina e atividade larvicida frente ao A. aegypti do EEFL
CL50 µg/mL (intervalo de confiança)

Composto
A. salina A. aegypti
EEFL 17,73 (10,33 – 30,63)a 49,39 (41,70 – 53,02)
Dicromato de potássio 11,01 (7,09 – 17,59)a -
Temefós - 100%*
*
percentagem de morte à 100 µg/mL (Teles, 2009).
A procura por larvicidas Quanto aos mecanismos de
naturais para combater o A. aegypti, tem ação de larvicidas naturais, existem
despertado pesquisadores do mundo inteiro trabalhos na literatura que fazem uma
a realizar diversos trabalhos voltados para correlação desta ação com a atividade de
este fim. Uma das principais vantagens inibição da enzima acetilcolinesterase
desta linha de pesquisa é que os larvicidas (SILVA, 2006; TELES, 2009). O EEFL
de origem natural reduzem de forma apresentou moderada atividade inibitória
significante o impacto que atualmente os da AChE (tabela 3) o que sugere que há
inseticidas sintéticos causam à saúde da outros mecanismos de ação envolvidos na
população e ao ambiente (TELES, 2009). atividade larvicida.
No entanto, além dos riscos à saúde e ao O tratamento da leishmaniose,
meio ambiente, larvicidas além de caro e doloroso, tem se tornado
organofosforados como o temefós cada vez mais ineficaz, o que evidencia a
apresenta-se de forma ineficaz e envolve urgente necessidade de novas drogas
enormes investimentos financeiros leishmanicidas (RATH et al., 2013). Neste
(AUGUSTO; FREITAS, 1998). Portanto o estudo, o EEFL apresentou atividade
EEFL constitui-se uma potencial fonte de contra L. infantum chagasi semelhante à
compostos com atividade larvicida. pentamidina (tabela 3), mostrando que a

espécie Z. syncarpum Tull. compõe fonte desenvolvimento de fármacos
de compostos com potencial para o leishmanicidas.
Tabela 3: Atividade leishmanicida frente à L. infantum chagasi e inibição da
acetilcolinesterase do EEFL
Extrato / droga CE50 L. infantum chagasi Inibição da acetilcolinesterase (cm)
EEFL 16,03 (13,21 – 19,44)a 0,6
Pentamidina 23,71 (18,44 - 30,50)a -
Fisostigmina - 0,9
CE50 = µg/mL
De acordo com VILA-NOVA Conclusões
et al. (2013), um possível mecanismo de O EEFL apresenta metabólitos
ação de compostos leishmanicidas poderia secundários de grande relevância na
ser a inibição da enzima AChE, com farmacologia de plantas medicinais, como
redução do substrato colina, essencial para alcalóides, triterpenos, flavonoides,
a formação de lipídeos de membrana de xantonas e taninos condensados. Este
Leishmania spp. Como o EEFL apresentou extrato apresentou atividade larvicida,
baixa atividade de inibição da AChE, é artemicida e leishmanicida. Portanto, a
provável que a atividade leishmanicida espécie Zanthoxylum syncarpum Tull.
deste extrato apresente outro mecanismo apresenta fonte alternativa para o
de ação. A excelente atividade do EEFL desenvolvimento de drogas leishmanicidas
frente à L. infantum chagasi, pode ser e larvicidas.
justificada pela presença de taninos,
flavonoides, esteroides e alcalóides.

Referências BRAGA, F. G.; BOUZADA, M. L. M.;

AUGUSTO, L.G.S.; FREITAS, C.M. O FABRI, R. L.; MATOS, M. O.;
Princípio da Precaução no uso de MOREIRA, F. O.; SCIO, E.; COIMBRA,
indicadores de riscos químicos ambientais E. S. Antileishmanial and antifungal
em saúde do trabalhador. Revista Ciência activity of plants used in tradicional
& Saúde Coletiva, v.3, n.2, p.85-95, 1998. medicine in Brazil. Journal of
BAKKALI, F.; AVERBECK, S.; Ethnopharmacology, v.111, p.396-402,
AVERBECK, D.; IDAOMAR, M. 2007.
Biological effects of essential oils - A BRASIL. Ministério da Saúde. Secretaria
review. Food Chemical Toxicology, v.46, de Vigilância em Saúde. Departamento de
p. 446-475, 2008. Vigilância Epidemiológica. Diretrizes
BARBOSA, T. P., JUNIOR, C. G. L., nacionais para prevenção e controle de
SILVA, F.P.L., LOPES, H.M., epidemias de dengue. Brasília: Ministério
FIGUEIREDO, L.R.F., SOUSA, S.C.O., da Saúde, 2009. 160 p. – (Série A. Normas
BATISTA, G.N., SILVA, T.G., SILVA, e Manuais Técnicos).
T.M.S., OLIVEIRA, M.R., CECHINEL FILHO, V. Estratégias para a
VASCONCELOS, M. L. A. A. Improved obtenção de compostos
synthesis of seven aromatic Baylise farmacologicamente ativos a partir de
Hillman adducts (BHA): evaluation against plantas medicinais. Conceitos sobre
Artemia salina Leach. and Leishmania modificação estrutural para otimização da
chagasi. Eur. J. Med.Chem., n.44, atividade. Química Nova, v.21, p.1, 1998.
p.1726–1730, 2009. FACUNDO, V.A.; SILVEIRA, A.S.P.;
BARBOSA, W. L. R. Manual para Análise FILHO, R.B.; REZENDE, A.C.P.C.
Fitoquímica e Cromatográfica de Extratos Constituintes químicos de Zanthoxylum
Vegetais (Edição Revisada). Revista ekmanii (URB.) ALAIN. Química Nova,
Científica da UFPA, v.4, Belém – PA, v. 28, n.2, 2005.
2004. GARCEZ, W.S.; GARCEZ, F.R.; SILVA,
BERTINI, L.M.; PEREIRA, A.F.; L.M.G.E.; SARMENTO, U.C. Substâncias
OLIVEIRA, C.L.L.; MENEZES, E.A.; de Origem Vegetal com Atividade
MORAIS, S.M.; CUNHA, F.A.; Larvicida Contra Aedes aegypti. Revista
CAVALCANTI, E.S.B. Perfil de Virtual de Química, v.5, n.3, 363-393,
sensibilidade de bactérias frente a óleos 2013.
essenciais de algumas plantas do nordeste GEBHARDT, R. In vitro screening of
do Brasil. Infarma, v.17, p.80-83. 2005. plant extracts and phytopharmaceuticals:
novel approaches for the elucidation of OLIVEIRA, J.R.; E.P.; LIMA, G.V.;
active compounds and their mechanisms. MORAIS, S.M.; COSTA, S.M.O.;
Planta Med, v.66, p.99-105, 2000. MAGALHÃES, C.E.C.; SILVA, R.C.B.
GIL, E. S.; PAULA, J. R.; Uso do extrato de Z. syncarpum Tull como
NASCIMENTO, F. R. F.; BEZERRA, J. inibidor da corrosão do cobre, 32ª Reunião
C. B. Produtos naturais com potencial anual da Sociedade Brasileira de Química,
leishmanicida. Rev. Ciênc. Farm. Básica Fortaleza, CE, 2009.
Apl., v.29, n.3, p.223-230, 2008. OPPERDOES, F.R.; MICHELS, P.A.A.
HALSTEAD, S.B. IN DENGUE AND The metabolic repertoire of Leishmania
DENGUE HEMORRHAGIC FEVER; and implications for drug discovery.
GUBLER, D. J.; KUNO, G., eds.; CAB Disponível em
International: New York , p.23- 44, 1997. http://www.icp.ucl.ac.be/trop/research/200
MACORIS, M.L.G.; ANDRIGHETTI, 8_Opperdoes.pdf> Acesso em 24 de
M.T.M.; TAKAKU, L.; GLASSER, C.M.; outubro de 2013.
GARBELOTO, V.C.; BRACCO, J.E. PIZZOLATTI, M.G.; CUNHA JÚNIOR,
Resistance of Aedes aegypti from the state A.; SZPOGANICZ, B.; SOUSA, E.;
of São Paulo, Brazil to organophosphates BRAZ-FILHO, R.; SCHRIPSEMA, J.
insecticides. Mem Inst Oswaldo Cruz, v. Flavonóides glicosilados das folhas e flores
98, p.703-708, 2003. de Bauhinia forficata (Leguminosae).
MATOS, F. J. A. Introdução à Fitoquímica Química Nova, v.26, p.466-469, (2003).
Experimental. UFC. Fortaleza-Ceará, RHEE, I. K.; MEEN, M.; INGKANINAN,
45pp. Ed. UFC, 2009. K.; VERPOORTE, R. Screening for
MEYER, B.N., FERRIGINI, N.R., acetylcholinesterase inhibitors from
PUTNAN, J.E., JACOBSEN, L.B., Amaryllidaceae using silica gel thin-layer
NICHOLS, D.E., MCLAUGHLIN, J.L. chromatography in combination with
Brine shrimp: a convenient general bioactivity staining. Journal of
bioassay for active plant constituents. Chromatography A,, v.915, p.217-223,
Planta Med., v.45, p.31-34, 1982. 2001.
MOREIRA, T.M.S.; SALGADO, H.R.N.; ROSS, S.A.; SULTANA, G.N.;
PIETRO, R.C.L.R. O Brasil no contexto de BURANDT, C.L.; ELSOHLY, M.A.;
controle de qualidade de plantas MARAIS, P.J. FERREIRA, D.
medicinais. Revista Brasileira de Syncarpamide, a New Antiplasmodial (+)-
Farmacognosia, v.20, n.3, 2010. Norepinephrine Derivative from
Zanthoxylum syncarpum. 67ª ed. J. Nat. Graduação em Química, Universidade

Prod., 2004. Federal da Paraíba, João Pessoa, PB, 2009.
SILVA, W. J. Atividade Larvicida de TEMPONE, A. G.; ANDRADE, H. F.;
Óleos Essenciais de Plantas existentes no SPENCER, P. J.; LOURENCO, C. O.;
Estado de Sergipe contra Aedes aegypti. ROGERO, J. R., NASCIMENTO, N.
2006, 69p. Dissertação (Mestrado) – Bothrops moojeni venom kills Leishmania
Universidade Federal de São Cristóvão, spp. with hydrogen peroxide generated by
São Cristóvão, SE, 2006. its l-amino acid oxidase. Biochemical and
SILVA, H. H. G., SILVA, I. G. Influência Biophysical Research Communications.
do período de quiescência dos ovos sobre o v.280, p.620–624, 2001.
ciclo evolutivo de Aedes aegypti TEMPONE, A. G.; BORBOREMA, S. E.
(Linnaeus, 1762) (Diptera, Culicidae) em T.; ANDRADE JR, H. F.; GUALDA, N.
condições de laboratório. Revista da C. A.; YOGI, A.; CARVALHO, C. S.;
Sociedade Brasileira de Medicina BACHIEGA, D.; LUPO, F.N.;
Tropical, v.32, p.349-355, 1999. BONOTTO, S.V.; FISCHER, D.C.H.
SILVA, J. G. D.; WERNECK, G. L.; Antiprotozoal activity of Brazilian plant
CRUZ, M. S. P.; COSTA, C. H. N.; extracts from isoquinoline alkaloid-
MENDONÇA, I. L. Infecção Natural de producing families. Phytomedicine, v.12,
Lutzomyia longipalpis por Leishmania sp. p.382-390, 2005.
em Terezina, Piauí, Brasil. Caderno VIEIRA, M.G.S.; FREITAS, J,V,B,;
Saúde Pública, Rio de Janeiro, v.23, n.7, LIMA, M.N.; GRAMOSA, N.V.
p.1715-1720, jul, 2007. Constituintes químicos voláteis das folhas
SOUSA, A.E.F.; RIBEIRO, V.V. Perfil e galhos de Zanthoxylum syncarpum Tull.
dos raizeiros e estudos de suas indicações Química Nova, v.32, n.2, 2009.
acerca das plantas medicinais utilizadas no WHO, (2010). Report of a meeting of the
tratamento das doenças do trato WHO Expert Committee on the Control of
respiratório. Revista de Biologia e Leishmaniases, Geneva, 22–26 March,
Farmácia, v.03, 2008. 2010.
TELES, R.M. Caracterização Química,
Avaliação Térmica e Atividade Larvicida
Frente ao Aedes aegypti do Óleo Essencial
da Espécie Vegetal Aniba duckei
Kostermans, 2009, 126p. Tese (Doutorado
em Química Orgânica), Programa de Pós

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Silva et al., Revista Brasileira de Higiene e Sanidade Animal (v.8, n.1) p.

37 – 53 jan - març (2014)

http://www.higieneanimal.ufc.br Artigo Cientifico

Estudo fitoquímico e atividades biológicas do limãozinho (Zanthoxylum syncarpum Tull.)

Resumo: Algumas doenças consideradas negligenciadas, como o dengue e a

Introdução farmacológicos de plantas medicinais que

propriedades terapêuticas têm obtido são descritas 25 espécies de Zanthoxylum,

utilização de plantas medicinais sempre foi conhecida popularmente por “limãozinho”,

um recurso terapêutico alternativo de têm sua ocorrência principalmente na

grande aceitação pela população e região nordeste, em especial nos estados do

ultimamente vem crescendo junto à Ceará, Rio Grande do Norte, Paraíba e

utilizadas plantas cujas atividades et al., 2009). As plantas deste gênero

biológicas tenham sido investigadas apresentam uma grande variedade de

cientificamente, comprovando sua eficácia metabólitos secundários como alcaloides,

e segurança (CECHINEL FILHO, 1998). flavonoides, cumarinas, lignanas e

As plantas medicinais terpenos, e tem sido objeto de estudo

constituem a melhor fonte para obtenção devido principalmente às suas

de uma grande variedade de drogas propriedades febrífugas, sudoríferas e

(BERTINI et al., 2005). Portanto, o estudo diuréticas, além de serem amplamente

de princípios biologicamente ativos de utilizadas pela medicina popular no

plantas, é urgentemente necessário. tratamento de doenças cardiovasculares,

elucidação destes compostos, bem como alguns tipos de mordidas de cobra

seus mecanismos de ação, vem sendo um (FACUNDO et al., 2005).

dos maiores desafios para a química Inúmeras doenças consideradas

farmacêutica, bioquímica e a farmacologia. negligenciadas, como o dengue e a

O gênero Zanthoxylum leishmaniose, não têm ainda medicamentos

(Rutaceae) compreende cerca de 200 e/ou vacinas eficazes. Portanto, as plantas

espécies de árvores, arbustos e lianas podem fornecer compostos bioativos para

distribuídas em todo o mundo. No Brasil o desenvolvimento de fármacos para o

tratamento destas doenças. dengue. O controle do A. aegypti é feito

O dengue é uma infecção utilizando inseticidas organofosforados

reemergente que desperta preocupação nas como temephos, malathion e fenitrothion,

autoridades sanitárias de todo o mundo, constituindo a principal medida adotada

cinco continentes e elevado potencial para (MACORIS et al., 2003). No entanto, o

assumir formas graves e letais uso contínuo de inseticidas sintéticos tem

(HALSTEAD, 1997). Considerada um dos elevado à resistência de muitas populações

principais problemas de saúde publica no de mosquito, além de causar poluição

e que ocorram anualmente cerca de 50 procura por métodos alternativos para o

mil necessitam de hospitalização e pelo 2013).

menos 20 mil morrem em consequência da Outro grupo de doenças

doença (BRASIL, 2009). consideradas negligenciadas é o das

Nesse contexto, o dengue leishmanioses, zoonoses causadas por

tornou-se um problema contemporâneo e protozoários Leishmania spp., endêmicas

tratamento preventivo ou curativo do potencialmente fatal (WHO, 2010). No

Dengue. A principal estratégia adotada Brasil, a LV é causada pela L. infantum

para diminuir sua incidência consiste em chagasi (SILVA et al., 2007).

controlar a população de larvas de Aedes Atualmente, o arsenal

aegypti, vetor do arbovirus causador do terapêutico disponível para tratamento da

leishmaniose é considerado precário, sendo 2. Material e métodos

restrito a duas classes de medicamentos: os 2.1 Planta utilizada

antimoniais e os não antimoniais (GIL et Foi utilizada neste estudo, a

al., 2008), ambos apresentam alta espécie Zanthoxylum syncarpum Tull.,

toxicidade e resistência (TEMPONE et al, popularmente conhecida como limãozinho.

2005). Outros fatores inconvenientes ao As folhas do limãozinho foram coletadas

tratamento convencional são as vias de no horto medicinal da Universidade

aplicação, que geralmente são dolorosas e Estadual do Ceará, Campus do Itaperi, em

desconfortáveis e o fármaco precisa ser Fortaleza, Ceará, em janeiro de 2013. A

administrado diariamente por longos exsicata foi confeccionada e depositada no

períodos, o que muitas vezes requer Herbário Prisco Bezerra da Universidade

hospitalização acarretando em desconforto Federal do Ceará, sob o número 51937.

(BRAGA et al, 2007). das folhas do limãozinho (EEFL)

Portanto, novos e melhores O extrato etanólico das folhas

medicamentos são urgentemente do limãozinho (EEFL) foi preparado com