ANÁLISIS DE RESULTADOS

Como primer paso para la obtención de pigmentos vegetales, se

trituro 5 g de oyuelo en un mortero que contenía 20 mL de
etanol hasta obtener un color verde, el etanol se utiliza debido a
que es capaz de solubilizar la clorofila y otros pigmentos
presentes en el vegetal, por ser un compuesto orgánico , Los
pigmentos clorofílicos son insolubles en el solvente universal
llamado agua. Pero sí son solubles (afinidad química)
en solventes orgánicos como por ejemplo alcohol etílico y
acetona. A los solventes que extraen simultáneamente todos los
pigmentos de la hoja se los suele llamar extractantes. Existen
otros solventes que presentan afinidad por algunos pigmentos y
se los llama separadores, como por ejemplo el tetracloruro de
carbono y el éter de petróleo [1].
Se filtró la mezcla para separar los residuos de la ortiga del
etanol con la clorofila. A continuación, se lleva el extracto a un
embudo de decantación y se agregó 30 mL de hexano, el cual es
un solvente separador, esto quiere decir que presentan afinidad
con algunos pigmentos [1], se eliminó la capa inferior. Al
producto del embudo se le agrego 50 mL de agua para recoger algunas impurezas y se eliminó la capa acuosa.
Se añadió 40 mL de alcohol metílico para disolver la clorofila, la capa inferior se guardó en un vaso precipitado,
dicha capa contiene a alcohol metílico con clorofila, debido a que el alcohol metílico es más denso que el
hexano. En la capa superior se obtiene hexano con otros pigmentos. A la capa superior en el embudo de
decantación se le agrega 5 mL de solución de KOH en alcohol la capa superior tomo un color amarillo y la
inferior verde claro. La capa amarilla contiene xantofilas y la capa verde claro contiene carotenos.
Se tomó la capa inferior del alcohol metílico guardada en un vaso precipitado, se llevó al embudo de
decantación y se le agrego hexano , el cual extrae la clorofila, debido a su solubilidad con esta y se le agrego 50
mL de agua. Se eliminó la capa inferior que contiene agua y alcohol etílico, este diferencia miento de capas es
debido a que el alcohol metílico es más denso que el éter etílico. A la capa superior se le añadió 15 mL de
solución de KOH en alcohol metílico y agua .Dejando separar las capas se observó de color verde azulado la
capa superior y la capa inferior verde oscuro. En la capa superior se obtuvo la clorofila A y en la capa inferior la
clorofila B. La clorofila B se encuentra en la capa inferior debido a que en su estructura tiene un grupo aldehído
(CHO) en el carbono 3 y la clorofila A presenta un grupo metilo (CH3) en el carbono 3. La técnica de
separación es liquido-liquido. Esta técnica se basa en la diferencia de solubilidad de los pigmentos en el alcohol
metílico [1].
La extracción de las clorofilas se realizó con una mezcla de etanol, hasta quedar las hojas de la planta
incoloras, después se realizó una extracción líquido-líquido en un embudo de separación en solución saturada de
hexano y etanol el cuál extrae pigmentos, clorofilas y betacarotenos, por lo cual en este disolvente fue en el que
se obtuvieron los pigmentos para la cromatografía posterior [2].Al realizar la cromatografía de absorción en el
que este medio fue la alúmina (fase estacionaria) y el diluyente la mezcla de hexano en etanol, de manera que el
diluyente comenzó a bajar y los componentes de la mezcla fueron adsorbidos por la fase estacionaria con
diferente intensidad, de manera que el proceso de adsorción-desorción hizo que unos componentes avanzaran
más rápidamente que otros [3]. Aparecieron varias bandas de diferentes colores que estuvieron más o menos
alejados de la disolución de etanol en hexano según la mayor o menor solubilidad de los pigmentos en dicha
disolución.

Estas bandas tenían diferente grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución. Las que
tenían más afinidad por el disolvente bajaban más rápido que los otros pigmentos [4].Las primeras clorofilas que
 se extrajeron fueron las xantofilas, las cuáles son de color amarillo. Estas se obtuvieron en pequeña cantidad
cada uno de sus coloraciones diferentes. Después se obtuvo la clorofila, la cual se obtuvo en mayor cantidad ya
que esta es la que constituye aproximadamente el 75% de toda la clorofila en las plantas verdes y es de color
verde azulado [5]. Seguida por la clorofila beta que fue la que se obtuvo en segundo lugar en cantidad en color
verde amarillento. Por último se obtuvieron los carotenos que fueron de color amarillo más intenso que las
xantofilas y estos se obtuvieron al final debido a que eran menos afines al disolvente empleado [6].

BIBLIOGRAFIA
[1] Prieto .F. , (1983) Manual del Laboratorio de Química. Gráficas Cervantes. Salamanca
[2] García JL. (1980) Experiencias básicas en la enseñanza de las ciencias de la naturaleza II. Instituto de la
educación. Universidad de Santander. Santander,
[3] Gutiérrez R. (1990) .Enseñanza de las ciencias en la educación intermedia. Ed. Rialp. Madrid.
[4] Villarreal F (1981) Experimentos de Química. Ed. Trillas. México,
[5] J. Azcón-Bieto, M. Talón (2000). Fundamentos de Fisiología Vegetal. Madrid: McGraw-Hill/Interamericana,
Edicions Universitat de Barcelona,
[6] B.B. Buchanan, W. Gruissem, R. Jones.(2000.) Biochemistry and Molecular Biology of plants. Rockville
(USA): American Society of Plant Physiologists.