UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS-FILIAL-TARAPOTO

FACULTAD DE INGENIERÍA Y ARQUITECTURA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL

MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

INFORME
“AISLAMIENTO DE BACTERIA MEDIANTE EL METODO SIEMBRA
EN PLACA POR ESTRÍAS”

DOCENTE : Blgo.Mblgo. Prstlgo.Mg: Oscar Rojas Sánchez

CICLO : VI - 2019-II

ALUMNOS : SINARAHUA SANANCIMA, Katerin

TARAPOTO – PERU
2019
I. INTRODUCCIÓN
La técnica de siembra en estría es usada para aislar cepas puras en una placa
Petri a partir de un inóculo o muestra con diferentes especies. La técnica consiste
en, mediante un asa de siembra previamente esterilizada, rayar la superficie de
cultivo de una placa Petri de forma que en cada pasada sea menor el número
de células depositado, las últimas pasadas deberán depositar un número tan bajo
de células que, una vez incubadas, se formen colonias puras.

Para obtener cultivos puros a partir de una población microbiana mixta, se utilizan
las denominadas técnicas de aislamiento, que fueron desarrolladas durante el siglo
XIX. En un principio, Lister utilizó diluciones seriadas en medio líquido con esta
finalidad, pero la presencia de contaminación, es decir, de microorganismos no
deseados, dificultó el aislamiento. La escuela de Robert Koch introdujo los medios
sólidos, complementados con agar, y las placas de Petri en Bacteriología,
permitiendo así la separación física de las colonias sobre la superficie del medio
de cultivo o en el interior del mismo. El aspecto de las colonias sirve para
diferenciar distintas especies microbianas.
Agar EMB : es un medio de cultivo usado para el aislamiento y diferenciación
de E.coli, tiene un aspecto purpúreo, aunque naranja tras su esterilización, es
semisólido, y está destinado al cultivo en placa. Es un medio selectivo y
diferencial, adecuado para el crecimiento de enterobacterias, que inhibe el
crecimiento de bacterias Gram positivas y permite la diferenciación de bacterias
fermentadoras y no fermentadoras de lactosa, dando lugar a colonias incoloras, las
no fermentadoras, y colonias de color azulado-negro con cierto brillo metálico, las
fermentadoras.
 Agar MacConkey : es un medio de
cultivo selectivo y diferencial para bacterias diseñado para aislar
selectivamente bacilos Gram negativos y entéricos (encontrados normalmente en
el tracto intestinal) y diferenciarlos sobre la base de la fermentación de la lactosa.1
El cristal violeta y las sales biliares inhiben el crecimiento de
organismos grampositivos, lo que permite la selección y el aislamiento de bacterias
gramnegativas.

II. Objetivos
 Aislar las bacterias mediante el método de siembra en placa por estrías.
 Observar el crecimiento de las bacterias.
 Determinar y aislar Escherichia coli.

III. Materiales
 Muestras biológicas (agua contaminada, muestra de orina, muestra de
heces).
 Medios de cultivo (Agar MacConkey, Agar EMB)
 Placas Petri
 Mechero
 Asas en punta
 Hisopos estériles
 Tubos de ensayo

IV. Procedimiento

 Siembra de cultivo en el Agar MacConkey

 Paso 1: En nuestro caso los medios de cultivo los conseguimos ya

preparados, una vez tenido el cultivo en nuestras manos se
procedió a marcar y enumerar la parte trasera de la placa,
respectivamente se hizo la siembra con cada muestra.
  Paso 2: se procedió hacer el sembrado de cada muestra.
 Muestra de agua contaminada: con un asa en anillo esterilizada
se tomó una muestra. El asa de sumergió en el recipiente con agua,
luego se procedió al sembrado por medio de cultivo en la placa por
estrías.
 Muestra de heces: la muestra se llevo en hisopo esterilizado,
sumergido en un tubo de ensayo. Se procedió en hacer la siembra
en forma de estría.
 Muestra de orina: con un asa en anillo esterilizado se tomó la
muestra, lo que se hizo es sumergir el asa en el tubo con muestra y
luego sembrar en la placa.

 Aislamiento de bacterias en el medio de cultivo Agar EMB

 Paso 3: se procedió en hacer el aislamiento de bacterias

sembradas:
Las muestras ya sembradas y crecidas en las placas se pasaron a
sembrar en el Agar EMB, con el marcador se delineo en 3 partes,
luego con el asa en punta se tomó una pequeña muestra de
bacteria crecida para sembrarlo, siempre protegido por el mechero,
para cada siembra es necesario volver a esterilizar las asas.
 Se hizo el mismo procedimiento con las demás muestras.

V. Resultado

Resultado del aislamiento de las bacterias en medio de cultivo AGAR EMB.

VI. Conclusiones

 La labor experimental que se ha llevado a cabo en esta práctica ha comprendido el

estudio taxonómico de aislamientos bacterianos.
 Se logró aislar la colonia de bacterias.

VII. Recomendaciones

 Se recomienda desinfectar la zona de trabajo.

 Seguir haciendo practicas de laboratorio para ir familiarizándonos como
estudiantes y profesionales.
 Tener en cuenta las recomendaciones del docente.
 Ponerse adecuadamente los equipos de trabajo.
VIII. Anexos