LABORATORIO BIOLOGÍA I

Práctica 9
RESPIRACIÓN CELULAR AERÓBICA
(Preparado por M. Tellkamp & V. Sandoya)

1. INTRODUCCIÓN
El metabolismo es la suma total de todas las reacciones bioquímicas necesarias para la vida.
Cada ser vivo es un sistema abierto que necesita obtener energía para transformarla en trabajo,
energía química y finalmente calor. Por lo tanto para determinar el metabolismo de un organismo
de forma directa pudiéramos medir la cantidad de energía térmica que produce. Sin embargo, medir
el calor emitido por un organismo es problemático y por tanto los fisiólogos usan métodos
indirectos que estiman la tasa de metabolismo midiendo la cantidad de oxígeno consumido o
dióxido de carbono producido. Para entender cómo funcionan los métodos indirectos tenemos que
considerar lo que pasa durante la respiración celular.

La respiración celular es el proceso que convierte moléculas orgánicas, tal como la

glucosa, en moléculas portadoras de energía, comúnmente el adenosin trifosfato (ATP). Aunque
más de la mitad de la energía producida por la “descomposición” de glucosa se libera en forma de
calor, las células son muy eficientes al captar la energía química, atrapan alrededor del 40 por ciento
de la energía de la glucosa en forma de ATP. Este nucleótido forma parte de todas las reacciones
en la célula que requieren un aporte energético para transformar reactivos en productos (o sea
permite catalizar reacciones endergónicas). Ya que la glucosa es la fuente principal de energía que
reciben las células vamos a enfocarnos en el metabolismo, o estrictamente el catabolismo, de esta
molécula. Podemos resumir al metabolismo de la glucosa con la siguiente fórmula química:

C6H12O6 + 6O2 → 6CO2 + 6H2O + energía química (ATP) + energía calorífica (1)

Obsérvese que por cada molécula de glucosa se consumen seis moléculas de oxígeno y se generan
seis moléculas de dióxido de carbono y seis moléculas de agua. Si queremos estimar la energía
liberada por el metabolismo podemos calcular el coeficiente respiratorio (CR) que relaciona el
volumen de dióxido de carbono producido y el volumen de oxígeno consumido (Hill et al. 2012),
en base a la siguiente fórmula:

𝑪𝑶𝟐 (producido)
CR = (2)
𝑶𝟐 (consumido)

El valor de CR depende de la fuente de energía (biomolécula) que se está metabolizando, para los
carbohidratos el CR = 1, para grasas es de aproximadamente 0.7 y para proteínas es de 0.8.

¿De dónde provienen las 6 moléculas de CO2 producidas en la ecuación (1)? La respuesta es fácil:
de los seis carbonos de la glucosa. Pero ¿para qué se consumen las 6 moléculas de O2? La respuesta
a esta pregunta es un poco más compleja. En la Figura 1 podemos ver un esquema general del
metabolismo de la glucosa.
 Figura 1. Resumen del metabolismo de la glucosa (tomado de Audesirk et al. 2008).

Como vemos, las cadenas de reacciones bioquímicas no sólo convierten glucosa a piruvato en la
glicólisis y luego a otras moléculas orgánicas en el ciclo de Krebs, sino que también se produce
NADH y FADH2. ¿Cuál es la función de estas moléculas? Prácticamente son portadores de
electrones de alto contenido de energía (cosechados de la glucosa) que llevan la energía hacia la
matriz de la mitocondria donde esa energía es usada para hacer ATP mediante la fosforilación
oxidativa (que incluye la cadena transportadora de electrones y la quimiósmosis). Una vez que los
electrones pasan de una molécula orgánica a otra, ¿cuál es su destino final? Como se puede ver en
la Figura 1, el aceptor final de los electrones es el oxígeno que, aceptando los electrones, se une
con dos protones para producir agua.

En la práctica de hoy vamos a medir el metabolismo (tasa de respiración) de grillos alimentados

principalmente con carbohidratos (CR = 1), bajo el efecto de dos temperaturas. Conociendo de
antemano el CR, y midiendo la cantidad (volumen) de dióxido de carbono producido, estimaremos
el volumen de oxígeno consumido.
2. OBJETIVOS
 Estimar la tasa de metabolismo de los grillos, de forma indirecta, bajo el efecto de
dos temperaturas.
 Determinar la influencia de la temperatura ambiental sobre el metabolismo de organismos
poiquilotermos (“animales de sangre fría”).

3. MATERIALES
 Neulog CO2 Logger Sensor™
 Computadora
 Baño maría a 23°C
 Baño maría a 33°C
 Cámara metabólica
 Bolsitas con sílica gel
 Pinza metálica
 Grillos (de nombre científico desconocido)

4. PROCEDIMIENTO
1. Descargar e instalar el software del dispositivo Neulog CO2 Logger Sensor
(http://neulog.com/software/).
2. Descargar el manual para NeuLog™ Neuron Logger Sensor Network Technology
(http://neulog.com/wp-content/uploads/2014/07/NeuLog_User_Guide_Ver_6_3_.pdf).
3. Conecte el sensor a la computadora y espere 30 min para calentarlo. Luego ubíquelo
verticalmente para compensarlo y espere hasta que la lectura sea de alrededor de 350
ppm (que es el valor mínimo de concentración que el sensor puede detectar). Para
esto, es necesario la presencia de viento; por lo que, necesita salir del aula.
4. Coloque sílica gel en la cámara metabólica (para absorber las moléculas de agua
producto de la respiración).
5. Coloque los grillos en la cámara metabólica y tápela con el sensor.
6. Coloque la cámara metabólica en un baño maría a 23°C, TOME PRECAUCIONES
PARA EVITAR QUE EL SENSOR SE MOJE.
7. Configure el software del sensor para que registre lecturas cada 2 segundos, durante 20
minutos.
8. Configure el software para que los datos del sensor comiencen a registrarse cuando la
concentración de CO2 en la cámara (proveniente de la respiración) supere los 350 ppm
(esto es necesario porque la concentración de CO2 en la atmósfera en altitudes
relativamente grandes (>2000 m) es <350 ppm).
9. Durante los 20 minutos del experimento es necesario monitorear el comportamiento de
los grillos, registrando el inicio y final de actividades como: caminar, saltar, estridular
o mover las antenas (estos movimientos aumentarán la respiración celular de los
grillos).
10. Luego de terminado el experimento grabe los datos en su computadora.
11. Repita el experimento a una temperatura de 35 °C.

4.1 Cálculos
Los siguientes cálculos convierten las unidades de concentración de CO2 de ppm a µl/h, y
deben hacerse para los datos de los dos experimentos (para las dos temperaturas):
1. Calcule la diferencia de concentración de CO2 [CO2, en ppm] antes y después del
experimento:

Δ [CO2] = [CO2] final – [CO2] inicial

 2. Determine el número de moles (n) de CO2 producido:

1 𝑚𝑜𝑙
n (CO2 producido, en 𝑚𝑜𝑙) = Δ [CO2] × 6.023 × 1023

𝑛𝑅𝑇
3. De la Ecuación de los Gases Ideales sacamos la relación V = , por lo tanto
𝑃
(unidades en paréntesis):

V (CO2 producido, en µ𝑙 ) =

𝑛 (𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠) × 8.21 x 104 (µ𝑙 𝑎𝑡𝑚 𝑚𝑜𝑙 −1 𝐾 −1 ) × 𝑇 (°𝐾) 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑥𝑝𝑒𝑟𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜

0.78 (𝑎𝑡𝑚)

4. Nota que esta fórmula calcula el volumen en µl. Este valor necesita estandarizarse con
respecto al volumen de un millón de moléculas de aire, V1.000.000, que es de 4.06 x 10-11
µl. Divida, por tanto, el valor V (CO2) para V1.000.000.

5. Multiplica ese cociente por el volumen de la cámara metabólica (120 ml = 120 000 µl).

6. Divida el resultado obtenido en el paso 5 para 0.33 h (los 20 minutos del experimento).

5. LITERATURA CITADA
Audesirk, T., G. Audesirk y B. E. Byers. 2008. Biología: la vida en la tierra, 8a edición. Pearson
Educación, Naucalpan de Juárez, Estado de México, México.

Hill, R. W., G. A. Wyse y M. Anderson. 2012. Animal physiology, 3a edición. Sinauer Associates,
Sunderland, Massachusetts, USA.
6. ANEXO. ACTIVIDAD GRUPAL
Fecha: Paralelo:
Nombres:
1.
2.
3.
4.
5.

1. Realice los cálculos respectivos para determinar el volumen de oxígeno utilizado por los
grillos durante la respiración celular, bajo la condición de baño maría a 23°C (temperatura
ambiente).
2. Realice los cálculos respectivos para determinar el volumen de oxígeno utilizado por los
grillos durante la respiración celular, bajo la condición de baño maría a 33°C.
3. En base a los gráficos obtenidos en el Neulog CO2 Logger Sensor™, compare las dos
tendencias de tasa metabólica (bajo las dos temperaturas), en relación a consumo de O2 y
producción de CO2.
4. ¿Cómo afectan las diferentes actividades del grillo al consumo de oxígeno? O sea, ¿cuáles
actividades son energéticamente más costosas?
5. Qué podría inferir acerca de la influencia de la temperatura ambiental sobre el
metabolismo de organismos poiquilotermos (“animales de sangre fría”).