Sinalização celular

Importância dos processos de sinalização

Seres unicelulares
Seres multicelulares

• Moléculas sinalizadoras
(proteínas, peptídeos, aminoácidos, nucleotídeos,
hormônios, derivados de ácidos graxos, gases)

• Receptores (de superfície ou intracelulares)

•  Alvo: geralmente proteínas efetoras

 Cada célula é programada para responder a
combinações específicas de moléculas sinalizadoras
 Princípios Gerais da comunicação Celular

1. Uma molécula sinalizadora se liga a

um receptor

2. Ativação da cadeia de sinalização

3. Uma ou mais proteínas sinalizadoras

interagem com proteína alvo

4. Alteração da proteína alvo - efeito

 Etapas da Sinalização
1) Síntese e liberação da
molécula sinalizadora pela
célula sinalizadora 3) Detecção do sinal pela
célula alvo através de um
receptor específico

2) Transporte da
molécula sinalizadora até
a célula alvo Resposta
celular

4) Modificação do metabolismo, da
função ou do desenvolvimento celular
acionada pelo complexo sinal-receptor
 Sinalização Contato-Dependente
(Importante durante o desenvolvimento e resposta imune)

Proteínas ligadas à membrana plasmática de uma célula podem

interagir com receptores de uma célula adjacente.
Ex: Fator de crescimento epidérmico (EGF)

Proteína

Resposta
celular

Receptor

Célula sinalizadora Célula-alvo

 Sinalização Parácrina
As moléculas sinalizadoras (mediadores locais) agem em
múltiplas células-alvo, próximas do local de sua síntese. Ex:
fatores de crescimento, citocinas, interleucinas, eicosanóides e
neurotransmissores

Receptor Receptor

Resposta
Resposta celular
celular
Célula-alvo Célula-alvo

Célula sinalizadora

Meio
extracelular
Resposta
celular
Receptor
Célula-alvo
 Sinalização
Autócrina
A célula responde a substâncias
liberadas por ela mesma. As
moléculas sinalizadoras são os
mediadores locais, como por
exemplo alguns fatores de
crescimento

Meio
extracelular

Receptor

Resposta celular
 Sinalização Endócrina
A molécula sinalizadora (hormônio) age na célula alvo distante
do sítio de síntese

Célula (glândula)
endócrina

Receptor

Corrente sanguínea Resposta

celular

Célula-alvo
 Sinalização Sináptica
A molécula sinalizadora (neurotransmissor) age em uma célula
alvo próxima de onde ela foi formada.

Sinapse

Fenda Sináptica

Axônio

Vesícula Sináptica

Resposta
celular
Receptor

Neurônio pré-sináptico Célula pós-sináptica

 Moléculas sinalizadoras
•  Óxido nítrico (gás)
•  Neurotransmissores (acetilcolina,
adrenalina, etc)
•  Hormônios esteroidais (receptores
intracelulares nucleares)
•  Hormônios peptídicos e não peptídicos
 Um mesmo sinal pode causar diferentes efeitos em
diferentes células

Célula muscular Célula muscular

cardíaca esquelética

acetilcolina
acetilcolina

Diminuição na contração

Célula de glândula contração

salivar
acetilcolina
acetilcolina

secreção
 Receptores

Receptores na superfície celular

A maioria das moléculas sinalizadoras

são hidrofílicas e se ligam a receptores
na superfície celular.

Receptores intracelulares
Algumas podem se difundir pela
membrana (hidrofóbicas) e chegar ao
núcleo,
transportadas por carreadores.
Sinalização por NO (óxido nítrico)

Terminal nervoso
ativado

acetilcolina
NO ligado a proteína
Ativa a NO sintase alvo (guanilil ciclase)

Difusão rápida do NO
através da membrana
Célula endotelial

Relaxamento rápido da Célula muscular

célula muscular lisa
 Ação do medicamento Viagra®

Terminais nervosos
NO

Célula da musculatura lisa da parede do vaso sanguíneo

 Sinalização por Hormônios

Receptor inativo

Receptor ativo

Sinais têm baixa solubilidade em água:

transporte via proteínas carregadoras

Os receptores são intracelulares (citosólicos ou nucleares) e irão regular a

expressão gênica quando ativados pelos ligantes
 Receptores de superfície celular

•  A maioria das moléculas sinalizadoras são grandes

demais ou muito hidrofílicas;

•  Não atravessam a membrana e ligam-se a receptores

transmembrana.

•  Agem na transdução do sinal: convertem um evento

extracelular em sinal intracelular
Diferentes tipos de proteínas de sinalização intracelular
 Principais classes de receptores de
superfície celular
Receptor associado a canal iônico

Molécula sinalizadora

Receptor
Receptorassociado
Receptor
associadoàà
proteína
associado a canalGiônico
proteína G
Molécula sinalizadora

Enzima Enzima
Proteína G Proteína G ativada
ativada
Receptor
Receptorassociado
associadoaa
enzimas
enzimas
Molécula sinalizadora Molécula sinalizadora
em forma de dímero

ou

Domínio catalítico Domínio catalítico Enzima ativada

inativo ativo
 Quem são os “atores” intracelulares que
participam da sinaização?

•  Moléculas pequenas: “segundos mensageiros;

–  Ex. cAMP, cGMP, Cálcio, etc.

•  Proteínas de sinalização intracelular:

–  Ex.: quinases/fosfatases; proteínas de liagação a
GTP
 Mediadores intracelulares pequenos:
segundos mensageiros

Pequenas moléculas liberadas ou formadas no citosol em resposta a um

sinal extracelular;

Ajudam a propagar o sinal dentro da célula.

 Muitas proteínas de sinalização atuam como
interruptores moleculares

Há 2 classes
principais
de proteínas que
funcionam
como interruptores
moleculares:

•  Controladas por
fosforilação;

•  Ligadoras de GTP
Receptor ligado a
canal iônico:
exemplo da acetilcolina
 Receptores ligados à proteínas G (GPCR)

Receptores de superfície – a família + numerosa

Grande diversidade de moléculas sinalizadoras

Sinalização através de receptores associados à proteínas G

RECEPTOR

PROTEÍNA G

Proteína transmembrana sete-passos

 Nobel Prize - 2012
•  Robert Lefkowitz and Brian
Kobilka are awarded the
2012 Nobel Prize in Chemistry
for groundbreaking
discoveries that reveal the
inner workings of an important
family of such receptors: G-
protein-coupled receptors
(GPCR).

An illustration shows the crystal structure of an

activated beta-adrenergic receptor, as mapped
out by Brian Kobilka and his colleagues.

R. J. Lefkowitz & B. Kobilka

Sinalização via
proteína G
Inativação da
subunidade α
da proteína G

http://www.youtube.com/watch?
v=V_0EcUr_txk&list=PLEEBFCEEBB32A537A
Proteínas G podem :
- regular canais iônicos;

- ativar enzimas
Exemplo: adenilil ciclase

AMP-cíclico exerce seus efeitos na maioria das células animais principalmente

pela ativação da PKA
 Ativação da PKA
(proteína quinase dependente de AMP-cíclico)

PKA fosforila Ser ou Thr específicas em proteínas-alvo

 Molécula sinal Adenilil ciclase ativada

Ativação
receptor de outras
enzimas
Subunidade α AMP cíclico no citosol
Proteínas G da proteína G
ativada
ou …

agindo em
conjunto com
Complexo
PKA ativa
CITOSOL PKA inativa

a adenilil
ciclase
NÚCLEO
PKA ativa
PKA = proteinaquinase
dependente de AMP cíclico CREB fosforilada é ativada

Proteína de CREB inativa

CREB= proteína regulatória ligação à CREB Gene alvo ativado

TRANSCRIÇÃO
Elemento de
ligação à CREB TRADUÇÃO

Nova proteína
 Ação da toxina da cólera

A toxina altera a subunidade α da

proteína Gs (por ribosilação);
ê
Impede a hidrólise do GTP;
ê
Aumenta a [cAMP]
ê
Provoca efluxo de Cl- e água
para a luz intestinal

Ação da toxina da cólera: A, B (subunidades da toxina); GM1 (GM1 receptor gangliosidio);

Gsα (subunidade alpha da proteína G estimulatória); AC (adenilato ciclase); Gi (subunidade
alpha da proteína G inibitória); cAMP (AMP cíclico); CFTR (regulador de condutância
transmembrana de fibrose cística).Trends Pharmacol Sci. 26, J. R. Thiagarajah and A. S.
Verkman, New Drug Targets for Cholera Toxin, PP. 172-5, 2005.
Proteínas G podem agir em conjunto com a fosfolipase C

filme
 O Ca2+ na sinalização intracelular
As células mantêm um baixo nível de Ca2+ no citosol bombeando-o para fora da
célula, para dentro do ER e mitocôndria e ligando-se a proteínas intracelulares
O complexo Ca2+-calmodulina

Várias proteínas citosólicas auxiliam na transmissão

do sinal de Ca2+, a calmodulina é a mais importante.
 Receptores ligados a enzimas
•  Tirosina quinase (RTK)

•  Associados à tirosina quinase •  Respondem às proteínas

extracelulares que regulam
•  Tirosina fosfatase crescimento, proliferação,
diferenciação e sobrevivência
•  Serina-Treonina quinase das células e tecidos animais;

•  Guanilil ciclase – cGMP •  Medeiam reconfigurações

rápidas do citoesqueleto;
•  Associados à histidina
quinase
 Receptores tirosina-quinase

EGF – Fator de crescimento epidermal

IGF – Fator de crescimento tipo insulina
NGF – Fator de crescimento neuronal
PDGF – Fator de crescimento derivado de plaquetas
FGF – Fator de crescimento de fibroblastos
VEGF – Fator de crescimento do endotélio vascular
Diferente dos receptores de proteína G, os receptores
associados à enzimas possuem uma única hélice
transmembrana
Ativação de um receptor Tirosina - quinase pode resultar na
agregação e ativação de diversas proteínas
e amplificação do sinal

Molécula sinal

ESPAÇO
EXTRACELULAR

CITOSOL
Proteínas sinalizadoras
intracelulares ligadas a
tirosinas fosforiladas

Receptor tirosina-
quinase ativado

Tirosinofosfatases, comumente, ou endocitose

e degradação do receptor desativam o sinal.
A rota principal de
sinalização dos receptores
tirosinaquinases para o
núcleo segue a rota de
ativação da Ras
A Ras pode ativar uma cascata de
fosforilação
A organização da via MAP-kinase por proteínas de
suporte (ex. Em levedura)
As vias de sinalização usam componentes
em comum
 Sinalização celular
Moléculas Necessitam de receptores extracelulares (não atravessam a membrana
livremente): proteínas, peptídeos, neurotransmissores, etc.
Sinalizadoras
Atravessam livremente a membrana: moléculas pequenas
extracelulares hidrofóbicas (gases, hormônios)

Endócrinos
Sinápticos
Tipos de sinais Parácrinos
Autócrinos
Dependentes de contato

Associados a canais iônicos

superfície celular Associados à proteína G

Tirosina-quinase/ou associados
Sinalização Associados a enzimas Serina/treonina-quinase
por Guanilil ciclase
receptores
Intracelulares