UNIVERSIDAD POPULAR CODIGO: 201-300-PRO05-

FOR03
DEL CESAR VERSIÓN: 1
GUIA DE LABORATORIO
ASIGNATURA: SISTEMAS Y
METABOLISMOS I

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES Y MEDIO AMBIENTE

GUIA DE LABORATORIO No.1

TEMA: DETERMINACION DEL POTENCIAL HIDRICO POR OBSERVACION
DE PLASMOLISIS

OBJETIVOS:
-Calcular valores de potencial hídrico por el método de plasmólisis Insipiente.
-Observar el movimiento del agua en la célula vegetal por el fenómeno de
plasmólisis.
-Identificar la función que desempeña la vacuola en el proceso de osmosis en la
célula vegetal.

INTRODUCCIÓN:
El potencial hídrico (Ψ) es una medida de la tendencia del agua a moverse hacia o
dentro de un sistema, como son los tejidos vegetales, el suelo o la atmosfera. Si los
líquidos de un tejido vegetal, están en equilibrio osmótico con alguna solución
externa circundante ( Ψ = 0) y no existe presión de turgencia en el tejido (Ψp = 0),
entonces el potencial osmótico del líquido intracelular puede ser igual a la presión
osmótica de la solución circundante. El problema para esta determinación, es el
tener realmente un valor de cero para la presión de turgencia, sin cambiar las otras
propiedades osmóticas. Una aproximación consiste en el denominado método de
determinación de la presión osmótica por detección de la plasmólisis incipiente. La
plasmólisis incipiente ocurre, si más o menos la mitad de las células comienzan a
plasmolizarse (separándose la membrana plasmática de la pared celular), y se
considera que esto corresponde a una presión de turgencia igual a cero. Entonces
el potencial osmótico de la solución que causa plasmólisis incipiente, equivale al
potencial osmótico dentro de las células, después de que han llegado al equilibrio
con la solución.

Para determinar el valor del potencial osmótico vamos a utilizar la epidermis interna
de una hoja de bulbo de cebolla, que incubaremos en una serie de soluciones de
sacarosa de concentración creciente. Como ocurría en el caso de la patata, en
función de las diferencias de Ψ entre la solución externa y el interior de las células
epidérmicas, tenderá a entrar o a salir agua. Cuando entra agua, aumenta la
turgencia de las células; cuando sale, se contrae la vacuola y las células se
plasmolizan:
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A concentraciones relativamente bajas de sacarosa, pero cuando el valor del Ψ

exterior ya es inferior al del Ψ interior, se produce una pérdida leve de agua en la
célula que no resulta en un cambio de volumen, sino en una reducción del valor de
la presión del agua en su interior. Cuando el valor de Ψp llega a cero, se considera
que las células se encuentran en un estado denominado plasmólisis incipiente.
En esa situación, el valor de Ψ se iguala al de Ψo.
Consideramos que las células de epidermis de cebolla están en plasmólisis
incipiente cuando el 50% de las mismas se encuentran plasmolizadas. La
concentración de sacarosa con la que se produzca plasmólisis incipiente tendrá un
valor de Ψ igual al del Ψo las células de cebolla.
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Ψ exterior > Ψ interior: Células Ψ exterior < Ψ interior: Células en

Turgentes. Plasmólisis
METODOLOGÍA:
∞ Explicación por parte del docente y la asignación de los materiales y
equipos de laboratorio necesarios para el desarrollo de la práctica.
∞ Desarrollo de la guía de laboratorio por los estudiantes.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

Microscopios Espátulas Solución de sacarosa
al 1 M
Portaobjetos
Bulbo De
Cebolla
Cubreobjetos Pipetas De 10
Ml
Balanza Papel
Absorbente
Nota: los materiales que tiene * los deben traer los
estudiantes. Debe tenerse en cuenta en todas las
prácticas.
PROCEDIMIENTO:
∞ Preparar en tubos de ensayo soluciones de sacarosa (10 mL de cada una)
con concentraciones 0.0M, 0.1M, 0.2M, 0.3M, 0.4M, 0.5M y 0.6M. Para
ello, se utilizará una solución de sacarosa 1M y agua destilada.
∞ Extraer la epidermis interna de la tercera hoja del bulbo de cebolla y cortar
siete cuadraditos de 4-5 mm de lado.
∞ Introducir los fragmentos de epidermis en las soluciones de sacarosa,
cuidando que queden bien cubiertos. Incubarlos 1 hora.
∞ Extraer los fragmentos de epidermis y colocarlos en portaobjetos con un
poco del líquido en el que estaban sumergidos.
∞ Observar 25 células y anotar cuántas aparecen turgentes y cuántas
plasmolizadas. [Recomendación: comenzar por observar las muestras
de 0.0M y 0.6M]
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∞ Representar gráficamente el porcentaje de plasmólisis frente a la

concentración de sacarosa.
∞ Calcular Ψ para la concentración de sacarosa con la que se produce
plasmólisis incipiente.
∞ Calcular el valor de Ψo para las células de epidermis de cebolla.
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[Sacaros Nº Células %
a] Plasmolizadas Plasmólisis
0.0M
0.1M
0.2M
0.3M
0.4M
0.5M
0.6M
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PREGUNTAS DE PROFUNDIZACIÓN
1) Haga una gráfica representando el porcentaje de las células
plasmolizadas contra la concentración de la solución en la que se
sumergieron. Utilice papel milimétrico (página anexa).
2) ¿A qué concentración molar se observa el 50% de las células se
plasmolizadas?
3) En plasmólisis incipiente P es igual a cero, calcule el potencial hídrico
en esta condición, utilizando la siguiente fórmula:
Ψs= -imRT
m = molaridad de la solución que induce un 50% de células plasmolizadas
en el tejido.
i = Constante de ionización (se considera generalmente igual a uno,
aunque en el caso del NaCl se considerará igual a 2)
R = Constante general de los gases (0.0083143 L MPa mol-1 °K-1)
T = Temperatura absoluta (considere 20 C, recuerde que para
pasarlos a K tiene que sumarle 273 al valor en C)

4) Haga un esquema de una célula completamente plasmolizada.

BIBLIOGRAFIA:
∞ http://es.wikipedia.org/wiki/Membrana_plasm%C3%A1tica
∞ biología celular y molecular- Harvey Lodish, Berk, Matsudaira, Káiser,
Krieger, Scott, Zipursky, Darnell -5° edición 2005-editorial medica
panamericana.