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EXTRACCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS Y VEGETALES

GUERRERO ZAMBRANO, Vladimir; MANCIPE LEAL, Leidy Yusset;

MENDIVELSO GUALDRON, Ronal Ismael
RESUMEN: Los ácidos nucleicos son polímeros de nucleótidos unidos por enlaces
fosfodiéster. Por su composición química, se han clasificado en dos tipos: ácido
desoxirribonucleico (DNA) y ácido ribonucleico (RNA). Los nucleótidos que forman al
DNA están constituido por el azúcar 2′-desoxirribosa unido mediante enlace éster a ácido
fosfórico y mediante enlace N-glucosídico a una de las cuatro bases nitrogenadas (adenina,
guanina, timina o citosina). (Uribe. L, 2019) el objetivo de esta práctica fue extraer los
ácidos nucleicos de vegetales con base en las propiedades físicas y químicas de los ácidos
nucleicos. La práctica empezó pesando en la balanza analítica 10 g de sal, Se preparó una
solución lisis la cual su función fue romper la pared celular, luego trituramos un tomate
agregándole a su vez solución lisis, filtramos y le agregamos 2 gotas de jugo de piña,
diluimos y llevamos a una probeta y a una caja de Petri, adicionándole alcohol, dejando
actuar la solución por un determinado tiempo se logró evidenciar las fibras de ADN. Con
esta práctica se pudo concluir que existen métodos sencillos de extracción de ácidos
nucleicos y también que la solución lisis es lo suficientemente fuerte para romper el
material inicial, pero suficientemente suave para preservar el ácido nucleico.
PALABRAS CLAVE: Lisis, ADN, Tomate, Sal, Balanza analítica, Jugo de Piña, Alcohol.

INTRODUCCIÓN
En la naturaleza existen dos clases de ácidos nucleicos, el ácido desoxirribonucleico (ADN
o DNA por su sigla en inglés) y el ácido ribonucleico (ARN o RNA por su sigla en inglés)
que son macromoléculas que actúan en el almacenamiento y en la transferencia de la
información genética. Aunque los ácidos nucleicos reciben su nombre porque fueron
aislados por primera vez del núcleo celular, tanto el ARN como el ADN pueden
encontrarse en otras partes de las células (Nelson & Cox, 2013).
La obtención de ADN de buena calidad para la realización de procedimientos
moleculares es vital para el éxito de cualquier proyecto de identificación de especies
vegetales, o para su simple caracterización y aporte a la base de datos mundial conocida
como “BARCODE” (Cadavid-Sánchez et al. 2013). El paso inicial de la extracción del
ADN vegetal es muy importante pues según Solano-Flórez y colaboradores (2009)
algunos de los principales factores que afectan a perfiles de amplificación, son
justamente la calidad, pureza y cantidad del ADN extraído de las muestras disponibles. Uno
de los principales inconvenientes técnicos en la purificación de ADN vegetal se da por la
obtención de fenoles y polisacáridos en conjunto con el material genético lo que disminuye
su cantidad y calidad (Molinari y Crochemore 2001; Orozco-Gutiérrez et al. 2010).
 El ADN es la molécula de la herencia en todas las formas de vida celulares, así como en
muchos virus, y tiene como funciones principales dirigir su propia replicación durante la
división celular y, la transcripción de moléculas de ARN complementarias. Mientras que, el
ARN cumple con funciones biológicas variadas como: dirigir la síntesis ribosómica de
proteínas mediante el proceso de traducción del ARN mensajero (mRNA) obtenido de las
secuencias del ADN; transportar los aminoácidos al ribosoma mediante el ARN de
transferencia (tRNA) durante la síntesis de proteínas; formar ribonucleoproteínas que
participan en el procesamiento postranscripcional de otros ARNs, entre otras (Voet & Voet,
2012).
El ADN y el ARN son polímeros de nucleótidos formados por enlaces fosfodiéster. Los
nucleótidos consisten en bases de moléculas de purina y pirimidina ligadas a azúcares
fosforilados desoxirribosa (en el ADN) o ribosa (en el ARN). El ADN contiene dos purinas
(adenina y guanina) y dos pirimidinas (citosina y timina). En el caso del ARN, adenina,
guanina y citosina también están presentes, pero en lugar de timina tiene uracilo (Cooper,
1996). En cuanto a su estructura, el ADN es una molécula de doble hebra que consiste en
dos cadenas de polinucleótidos trenzadas de forma helicoidal. La característica fundamental
de esta estructura es la formación de puentes de hidrógeno entre las bases de las dos hebras
de cada molécula, además de las interacciones dipolo-dipolo y fuerzas de Van der Waals
que también ayudan a estabilizar la doble hélice. Por su parte, debido a la variación en su
composición química, la molécula de ARN existe como un polinucleótido de una sola hebra
(Chang, 2010).
MATERIALES.

Materiales suministrados por el estudiante: Tomate, Sal (NaCl), Jugo de piña, papel filtro,
shampoo.
 Balanza analítica.
REACTIVOS.
1. Cloruro de sodio
2. Agua destilada
3. Solución lisis (Agua destilada, shampoo y sal)
4. Alcohol.
PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS
1. Preparación de la lisis.
Se tomaron aprox. 16 mL de shampoo, pesamos 10 g de sal (NaCl) y tomamos 84 mL de
agua destilada en una probeta de 100 mL. Teniendo en cuenta estos productos se pudo
obtener la solución de lisis mediante dilución.
2. Maceración
Con ayuda de un mortero con pistilo trituramos el tomate (agregamos solución lisis) para
romper las membranas celulares.
3. Filtración.
Con ayuda de papel filtro se logró purificar y obtener la solución, luego le agregamos 2
gotas de jugo de piña y se disolvieron.
4. Obtención de la muestra.
Agregamos 10 mL de la solución en una probeta y 10 mL en la caja de Petri, se le
agregaron 10 mL de alcohol a la caja de Petri y a la probeta donde se encontraba la solución
y después de esperar un tiempo en el que el alcohol reaccionara con la solución se pudo
evidenciar las fibras de ADN. La cual se observa a continuación (Figura 1,2).
Figura 1. Figura 2.

ANÁLISIS
En la práctica de laboratorio EXTRACCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS Y VEGETALES,
se identificó y se obtuvieron los siguientes resultados: Al extraer el ADN del tejido vegetal
del tomate, en el cual se vio la separación en capas con la agrupación de muchas fibras de
ADN. El procedimiento de lisis suele consistir en un equilibrio de técnicas y ha de ser
suficientemente fuerte para romper el material inicial, pero suficientemente suave para
preservar el ácido nucleico. Uno de los componentes de la lisis es el detergente separa los
lípidos de las proteínas en la membrana celular y forma complejos con estos para que puedan ser
precipitados en una solución.

El ADN en el interior de las células se encuentra enrollado e interactuando con varias proteínas. En
la solución se separa o se liberan los ácidos nucleicos y proteínas, y en el etanol forma una capa en
la superficie por ser menos denso que la solución acuosa
El ADN se precipita en el alcohol fuera de la solución, donde puede ser visto. Además de
permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los
cuales son dejados en la solución acuosa.

CONCLUSIONES
Se logró extracción y separación del ADN a partir de tejido vegetal (tomate) y
seguidamente la obtención de miles fibras de ADN.
Al realizar el procedimiento adecuadamente, resulta que las fibrillas de ADN comenzaron a
salir, de un color blanco precipitado por sobre el alcohol (mezcla Heterogénea).
La extracción de ADN consta de una etapa de lisis, que consiste en romper las estructuras
que confinan el citoplasma y liberar al medio su contenido y otra de purificación.

Referencias
Uribe. L, (2019) ácidos nucleicos
Nelson & Cox, (2013) ADN y ARN

Voet & Voet, (2012) ADN y ARN

Cooper, (1996) ADN y ARN

Chang, (2010) estructura del ADN

Dashek, (1997) Ácidos nucleicos

Cadavid-Sánchez et al. (2013). ADN

Orozco-Gutiérrez et al. (2010). Purificación de ADN en vegetales.