Biosensores

BIOSENSORES ACÚSTICOS

2019
 Efecto Piezoeléctrico
¿Que es el efecto piezoeléctrico?

Capacidad de ciertos materiales

como el cuarzo de generar un
voltaje eléctrico cuando se lo
comprime o se los estira.

 Proceso reversible.

 Fue descubierto por los hermanos

Curie, Pierre y Jacques.

 La primer publicación
mencionando el efecto fue en
1880.
Estructura del Cuarzo

 Estructura única de cristal

tetraedro

 Cuatro moléculas de oxígeno en

un solo tetraedro (SiO4)

 Las cuatro moléculas de

oxígeno se comparten con los
tetraedros cercanos (SiO2)

 Estos tetraedros se apilan de

una manera ordenada para
crear la estructura cristalina.
 Estructura del Cuarzo

La polaridad no es uniforme en
toda su estructura cristalina
creando dipolos.

Todos los tetraedros

están ordenados en
una dirección.

monocristalino

Los dipolos también.

 Estructura del Cuarzo

Se aplica un voltaje eléctrico al policristal para

alinear los dipolos en una dirección.

polarización

Otros materiales tienen estructura de policristal como cerámicas o polímeros.

El titanato zirconato de plomo (PZT) es la cerámica mas utilizada.

El polímero piezoeléctrico más desarrollado es el poli(fluoruro de vinilideno)

(PVDF).
 Cristal de Cuarzo

Factores a tener en cuenta en

función de su aplicación:

❖ El corte
❖ La frecuencia de oscilación
❖ El tamaño y la forma
❖ La textura de la superficie
❖ El metal de los electrodos
❖ La capacidad del recipiente para
la muestra líquida
❖ El posible uso de un cristal de
referencia adicional.
 Cristal de Cuarzo

En la naturaleza los cristales completos de cuarzo tienen una sección trigonal o

hexagonal con extremos en punta.

Con un cristal se asocian 3 conjuntos de ejes: óptico, eléctrico y mecánico.

El eje longitudinal que une las puntas en los extremos del cristal se llama eje
óptico o eje Z.

Los voltajes aplicados en el eje óptico no producen efecto piezoeléctrico.

El eje eléctrico o eje X, pasa en dirección diagonal a través de las esquinas

opuestas del hexágono.

El eje que es perpendicular a las caras es el eje mecánico o eje y.

 Cristal de Cuarzo

Para utilizar el cuarzo monocristalino como sensor, hay que cortar el cristal en un cierto ángulo
para permitir cierta alineacion entre los dipolos y el voltaje eléctrico.
Muy estables en frecuencia y con un coeficiente de temperatura prácticamente nulo a
temperatura ambiente.
El ángulo más utilizado es 35° 10’’, llamado AT.

Fuente:http://www.geovirtual2.cl/Mineral/402mincuarzo.htm

https://www.youtube.com/watch?v=YEJ2qryXcIQ
 Cristal de Cuarzo
Se pueden obtener diversos cortes
girando el plano de corte respecto a
uno o mas ejes

a) Estructura cristalina básica

b) Ejes cristalográficos
c) Cortes del cristal
d) Montura del cristal
 Cristal de Cuarzo

Polarización

 Cuando se comprime un cristal

de cuarzo, el dipolo también se
comprime, creando un voltaje
eléctrico que tiene la misma
dirección que el dipolo.

 Cuando se estira el cristal de

cuarzo, el dipolo también se
estira, creando un voltaje
eléctrico negativo.
 Cristal de Cuarzo

 Este efecto es reversible: Cuando se aplica una tensión eléctrica con la

misma dirección que el dipolo, el cristal de cuarzo se comprime.

 Cuando se aplica una tensión eléctrica con la dirección opuesta al dipolo, el

cristal de cuarzo se estira.

 Si se aplica una tensión de corriente alterna (CA), el cristal debe repetir el

ciclo de compresión y estiramiento.

https://ebuah.uah.es/dspace/bitstream/handle/10017/33621/TFG_Gomez_Molina_2
018.pdf?sequence=1&isAllowed=y
 Microbalanza de cristal de cuarzo – QCM

La aplicación de un campo eléctrico

alterno de alta frecuencia entre los
electrodos, provoca una vibración en el
cristal, que da lugar a ondas acústicas.

Estas se propagan a través del mismo en

dirección perpendicular a la superficie.

Si la longitud de onda de estas ondas es

un múltiplo impar del doble del espesor
del cristal, la condición de oscilación se
mantiene, entrando en resonancia.

Un cristal piezoeléctrico que vibra

en su modo de resonancia es un
oscilador armónico.
Cristal de Cuarzo - Frecuencias de oscilación

El rango de frecuencias para el modo fundamental del corte AT está entre

800KHz y 30 MHz.

En las aplicaciones de sensor de masa el rango utilizado va de 5 a

10 MHz.

El incremento de la frecuencia de resonancia implica una mayor sensibilidad,

también supone un decremento del espesor del cristal.

Un cristal de 5 MHz tiene un espesor de 0.33 mm y uno de 30 MHz tiene un

espesor de solo 55 µm.

La señal de frecuencia generada a partir de un cristal de cuarzo está

generalmente en el rango de MHz, que es aproximadamente el mismo que un
oscilador LC o RLC.

Los cristales de cuarzo que generan una señal de frecuencia fija se llaman
osciladores de cristal.
 Aplicaciones - Osciladores de cristal

❖ El cristal de cuarzo puede almacenar temporalmente el potencial

eléctrico y liberarlos más tarde.

❖ Tiene la misma capacidad que un circuito RLC es capaz de generar

una oscilación armónica a una cierta frecuencia resonante.

❖ Es excitado por un voltaje aplicado, y oscila mecánicamente (vibra) a

una frecuencia resonante para generar voltaje de CA.
Osciladores de cristal -Circuito RLC
Modelo Matemático
 Modelo eléctrico
 Fuerza de inercia
Carga acumulada en los extremos del
cristal proporcional a la deformación
 Reacción elástica
Cm= capacidad mecánica del cristal

 Reacción viscosa

r= coeficiente de roce viscoso del cristal

Donde

 K= constante de acoplamiento
electromecánico del cristal
 l= x0/K
Modelo de Butterworth-Van Dyke (BVD)
 Cristal de Cuarzo - Geometría del cristal

El diámetro de los cristales Ejemplo: Biosensor de proteínas

utilizados como sensores oscila para FGN
entre los 13-14mm y los 2,54 cm.

El uso de los de mayor tamaño se

da porque una mayor distancia
entre el área activa del cristal y los
bordes, mejora la estabilidad del
mismo.
Se reducen los saltos de
frecuencia que puede provocar la
presión mecánica ejercida por el
soporte sobre los bordes.
 Cristal de Cuarzo
Textura de la superficie y Electrodos

La superficie del cristal puede ser áspera o lisa.

Para medidas en fase líquida se recomienda utilizar cristales pulidos. La

rugosidad de la superficie puede provocar un aumento artificial de la
masa debido al líquido atrapado en las porosidades de la superficie.

 Metal de los electrodos

El oro (100-1000 nm) es el más utilizado en las aplicaciones QCM, por la

facilidad con la que se deposita por evaporación.

También se pueden utilizar otros metales como Platino, Aluminio, Plata,

Titanio etc.
 Cristal de Cuarzo
Textura de la superficie y Electrodos

El diseño de los electrodos debe permitir aislar sus conexiones eléctricas,

que se pueden hacer en la cara no expuesta

El modo de sujeción, es uno de los factores críticos para:

✓ Garantizar la estabilidad de la medida

✓ Maximizar la relación señal a ruido

Debe ser suave para evitar tensiones mecánicas que provoquen saltos
extraños en la frecuencia de oscilación, especialmente en medio líquido.
 Cristal de Cuarzo

Soporte del cristal

Permiten hacer medidas en fase gas y/o líquida.

El propio soporte proporciona al usuario las conexiones eléctricas con los

dos electrodos.

El cristal se sujeta al soporte generalmente mediante un anillo circular

que permite fijarlo por sus bordes manteniendo libre el espacio del
electrodo sensor.

La sujeción debe hacerse lo más cerca posible de los bordes del cristal
para evitar el amortiguamiento de la oscilación.

Para hacer medidas en líquidos es preciso que se exponga al líquido una

cara del cristal (electrodo sensor), mientras que la otra permanece al aire,
aislada del medio líquido.
Sensores de Masa Piezoeléctricos – Ventajas:

Las ventajas de los sensores de masa como técnica de monitoreo son:

◊ Rapidez
◊ Simplicidad de su construcción y funcionamiento
◊ bajo costo
◊ Bajo peso
◊ Pequeños requisitos de potencia.
◊ Precisión
◊ Alta reproducibilidad
◊ Robustez ante parámetros ambientales como temperatura
◊ Bajos lımites de detección de la sustancia de interés
◊ Estables en su frecuencia de resonancia

La medición del cambio de frecuencia es una de las mediciones físicas más

simples y precisas.
 Microbalanza de cristal de cuarzo – QCM

La frecuencia resonante del dispositivo

depende de las propiedades
piezoeléctricas del cuarzo, de sus
dimensiones, del tipo de corte de la
oblea y de la masa de los electrodos
metálicos depositados

Donde:

f= frecuencia de resonancia,
n= armónico,
hq= espesor del cristal
v0= velocidad de propagación de la onda
acústica a través del cuarzo
Microbalanza de cristal de
cuarzo
QCM es esencialmente un oscilador
de cristal que utiliza un cristal de
cuarzo con corte AT

Esta frecuencia de resonancia

podría reducirse cuando una masa
se carga a un lado de un cristal de
cuarzo (en la superficie de un
electrodo)
 Microbalanza de cristal de cuarzo

 Como los sensores QCM modernos tienen una resolución de 1 Hz o a

veces hasta 0.1 Hz, la resolución teórica de detección de masa puede
estar en la escala de nanogramos.

 La detección de masa de subnanogramos puede hacerse posible

aumentando la frecuencia de resonancia (f0) a un valor más alto.

 La relación cuantitativa entre el desplazamiento relativo de la

frecuencia resonante y la masa añadida→ Sauerbrey
Para relacionar la variación de frecuencia con la
masa de metal depositado se empleó desde 1958 la
ecuación de Sauerbrey

Donde

f0: frecuencia de resonancia en el vacío.

rq: Densidad del cuarzo(2,648 g/cm3)
mq= es el módulo de cizalla del cuarzo de corte AT
(para fo = 20 MHz corresponde un valor de 2.947 x
1011 g/cm. s2 )
Dm: Masa de la capa depositada
A: superficie efectiva
 MCQ

El "límite de Sauerbrey" es la cantidad superior de masa

añadida más allá de la cual la ecuación no es válida varia con el
material.

Para un cuarzo con corte AT (ρ = 2.650 kgm-3, v = 3.340 ms-1) que tiene
una frecuencia de resonancia en F = 5 MHz, la constante de cristal es Cq =
5.65 MHz cm2 kg-1.

Esto significa que un cambio de 1 Hz corresponde a 17,7 ng/cm2 de masa

adicional.

El rango dinámico se extiende hasta 20 mg/cm2, que a menudo excede el

límite de Sauerbrey.
 MCQ

La ecuación es válida para capas uniformes, finas y rígidas perfectamente

acopladas sobre la superficie del resonador de cuarzo.

A mediados de los 80, con la contribución de Kanazawa, se amplía el

modelo para aplicaciones en líquidos newtonianos.

Ley de viscosidad de Newton

El esfuerzo cortante: t= F/A
Constante de proporcionalidad: m (viscosidad)
Gradiente de velocidad= dv/dy
Los fluidos que cumplen esta ley → newtonianos
 Cuando el cristal se encuentra en contacto con
un liquido newtoniano la variación de la
frecuencia depende también de las propiedades
del líquido.
Eso esta representado pro la ecuación de
Microbalanza Kanasawa:
de cristal de
cuarzo - QCM

Donde

 rl: densidad del líquido

 hl: viscosidad del líquido
 Ck: Coeficiente de Kanasawa
  El efecto de la variación de la densidad
superficial de masa
En
 El efecto producido por el líquido en el cual se
inmunosensores encuentra el analito
piezoeléctricos se
tienen en cuenta Se utiliza la ecuación de Martin:
los dos efectos

➢ El primer término describe el efecto de la

densidad superficial de masa y es igual a
Sauerbrey.
➢ El segundo término representa el efecto del
líquido en contacto con el cristal.
En cuanto a la detección de las propiedades viscoelásticas de un fluido se
parte del supuesto de que se trata de un líquido Newtoniano.

Para comprobar la validez de esta condición es importante medir la

Resistencia.

La resistencia serie en el circuito eléctrico equivalente del cristal, circuito de

Butterworth Van Dyke representa el amortiguamiento que provoca el
líquido en las vibraciones del cristal.

La Ecuación relaciona la variación que sufre dicha resistencia con las

propiedades del líquido (densidad y viscosidad).

Donde: Lq= es la inductancia el cristal en el circuito equivalente

 QCM- Inmunosensores de ruptura de la unión

Inmunosensores basados en métodos de ruptura de la unión (bond-rupture) entre un

anticuerpo y un antígeno

En cualquier análisis siempre se producen algunos enlaces no específicos de otras

moléculas distintas a las objetivo.

La vibración del resonador QCM (sensor) agita las uniones entre las partículas fijadas a
su superficie, de tal forma que se produzca la ruptura de esas uniones.

Las uniones no específicas se rompen con vibraciones de menor amplitud

que las uniones específicas, y eso permite discriminar los falsos positivos, pues la masa
adicional causada por esos enlaces erróneos se separa de la masa de interés, cuyos
enlaces no se romperán hasta que no se apliquen mayores amplitudes.
 QCM- Monolíticos multicanal

❖ Consisten en múltiples microbalanzas sobre un único sustrato de

cuarzo.

❖ Supera una de las limitaciones del QCM, que es la dependencia con la

temperatura.

❖ En aplicaciones donde las condiciones medioambientales sufrían

grandes variaciones era preciso utilizar al menos dos QCM, uno de ellos
como referencia.

❖ En los sensores monolíticos multicanal uno se utiliza como referencia y

los demás pueden ser recubiertos con diferentes capas sensoras.
 Otras aplicaciones: Sensores de Presión
 Si un lado del cristal
piezoeléctrico está expuesto a
una cierta presión, el cristal se
puede comprimir (con presión
positiva) o estirarse (con
presión negativa).

 Esta compresión o estiramiento

(F por área) debe generar un
voltaje positivo o negativo, que
puede usarse para sensar
presión.
Aplicaciones - Acelerómetro

Si se une una masa a un lado de un

cristal piezoeléctrico.

Cuando el acelerómetro se acelera

o desacelera, la fuerza F=m.a que
se aplica al cristal, genera un
voltaje.

Con la masa conocida

m, se puede determinar
la aceleración a.
 Bibliografía de Referencia para esta clase
Libros

1. Jeong-Yeol Yoon- Introduction to Biosensors. 2013

2. Jirı Janata. Principles of Chemical Sensors .2º Ed. Springer. 2009

Artículos

1. Ferizzola. Oscilador para biosensores basado en microbalanza de cristal de cuarzo

(QCM). Rev. Fac. Ing. Univ. Antioquia N.° 61 pp. 114-122. 2011
2. Hernández. Fabricación de biosensores piezoeléctricos para la lectura de
interacciones antígeno-anticuerpo. Revista Mexicana de Física E 58 ,67–74. 2012

Webs

1. https://unicrom.com/osciladores-de-cristal/
2. http://smdelectronicayalgomas.blogspot.com/2011/08/como-funcionan-los-piezoelectricos.html
3. https://es.wikipedia.org/wiki/Acelerometro
4. http://www.geovirtual2.cl/Mineral/402mincuarzo.htm

Otros recursos

1. https://www.youtube.com/watch?v=NuTvTqh2a1k