UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA

FACULTAD DE AGRONOMIA

I. PROBLEMÁTICA:

El Perú exporta granada desde el 2004 incrementando sus ingresos de 406 mil dólares
anuales a 53 millones de dólares en el primer trimestre del presente año, con un
incremento del 163% en relación al 2017; según, AGRODATAPERU. Las regiones
más destacadas que comprende esta producción son Ica, La Libertad y Arequipa. En
esta última ah tomando gran importancia por las condiciones climatológicas que
favorecen una producción temprana, antecediéndose a la zona norte del país, en
consecuencia; favorece al agricultor porque puede valorizar su producción a un buen
precio de 2.22 a 2.70 dólares por kilo. Esto conlleva aun acelerado crecimiento de
áreas agrícolas destinadas a la producción de granada en Arequipa.

En el transcurso de la etapa fenológica del cultivo de granado Punica granatum cv

“wonderful” presenta problemas, como; plagas, enfermedades y deficiencias
nutricionales, los cuales son un reto para el ingeniero agrónomo. Un problema
principal en Arequipa sobre todo en las irrigaciones y zonas áridas es el nematodo del
nódulo radicular (Meloidogyne spp). El cual ataca en las etapas de brotamiento,
floración y cuajado, se produce nodulaciones en la raíz reduciendo así la absorción de
nutrientes y agua. Las raíces afectada se necrosan y mueren. El control en general es
a base de nematicidas sintéticos, que por exigencia del mercado exterior de productos
sin residualidad lo hacen menos factibles. En consecuencia el agricultor debe buscar
otras opciones de solución.

Para ello se dan soluciones microbianas, de los que hay escasa información acerca de
la eficacia de productos formulados a base de Purpureocillium lilacinum para
controlar el nematodo del nodulo radicular (Meloidogyne spp) en el cultivo de
granado Punica granatum cv. ‘Wonderful’ en la Irrigación La Joya Antigua.

II. JUSTIFICACIÓN:

Este trabajo le permitiría al agricultor tener información que favorecerá su programa de

control haciéndolo eficiente, destinando de manera adecuada sus esfuerzos para la
producción de granada y así cumplir con uno de los requisitos que exige el mercado
exterior, libre de residuos, para la exportación de granada Punica granatum cv.
‘Wonderful’.

Este comparativo de programas en la Irrigación La Joya Antigua beneficiaria al

agricultor de esta zona para:

- Reducir riesgos de residualidad en la granada.

- Un menor manejo de contaminantes.
- Reducir riesgos de operación al momento de control.
- Recuperación de las propiedades biológicas del suelo.
- Producción sustentable y amigable con el ecosistema.
- Aminorar riegos de resistencia.
- Establecimiento de organismos biológicos y resultados a largo plazo.
- Reducción de costos de producción.
- Probables certificaciones de sanidad a futuro.

1
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA
FACULTAD DE AGRONOMIA

- Fácil aplicación.

III. HIPÓTESIS:

Alguno de los tres programas a base de Purpureocillium lilacinum para el control del
nematodo del nodulo radicular (Meloidogyne spp) es efectivo en el cultivo de granado
Punica granatum cv. ‘Wonderful’ en la Irrigación La Joya Antigua.

OBJETIVOS:

3.1. OBJETIVO GENERAL:

- Evaluar la efectividad de los tres programas a base de Purpureocillium

lilacinum para el control de Meloidogyne spp en el cultivo de granado Punica
granatum cv. ‘Wonderful’ en la Irrigación La Joya Antigua.

IV. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN

En Ica en granado cv. ‘Wonderful’ se halló que aplicaciones de HUNTER 2 L

Ha−1 , almomento de la floración y fructificación, fueron efectivas para el control de
juveniles II y huevos de Meloidogyne incógnita. En Arequipa, también en granado
reporta que HUNTER aplicado por sistema de goteo, reduce la población de
nematodos a diferencia de TRICOX, Paecelomyces lilacinus y Biofit (Meneses 2013).

Se aplicó DiTera en granado, nematicida biológico (Myrothecium verrucaria), vía

sistema de goteo, en Ica; hallándose que la dosis de 10 kg . Ha−1 es la más efectiva
para el control de Meloidogyne incógnita (Cayao 2013).

En Ica se realizó comparativo de aplicaciones en granado cv. ‘Wonderful’, de

BLOCKER y extractos vegetales para el control de Meloidogyne spp; hallándose
eficaz a BLOCKER a una dosis de 1L . Ha−1 (Biogenagro s.f).

En Arequipa se realizó la prueba experimental del efecto de microorganismos

eficientes para el control de Meloidogyne incognita en vid, bajo condiciones de
invernadero. Se hizo la comparación entre consorcio de microorganismos eficientes
(mezcla de extractos de ruda y marigold mas bacterias) y 2 productos comerciales,
uno biológico “Urpi” (Paecelomyces lilacinus) y otro químico “Furadan”. Con
aplicaciones de 500 mL por planta de vid vía drench. Obteniéndose como resultado el
mayor control de Meloidogyne incognita con consorcio de microorganismos. Todo
ello en aplicaciones preventivas y curativas (Lizárraga 2015).

V. MATERIALES Y MÉTODOS:

5.1. MATERIALES:
5.1.1. Materiales de Campo:

2
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA
FACULTAD DE AGRONOMIA

- pala pequeña o muestreador; para colectar muestra.

- Guantes.
- Bolsas de polietileno; para el traslado de muestra.
- Etiquetas.
- Cuaderno de apuntes.
- Bolígrafo.
- Pequeña balanza
5.1.2. Material vegetal :
- Campo comercial de granado cv.’Wuonderful’
5.1.3. Materiales de aplicación:
- Mochila para aplicación
- Recipientes
- Guantes
- Mascarilla
- lentes protectores
5.1.4. materiales de medición:
- balanza
- vernier
- refractómetro
- calculadora
- cuaderno de apuntes
- jabas
5.1.5. Insumos :
- insumo A(𝑡1 ):
a) Estracto de plantas: 2,900 mL

Características:

Es un Inoculante de suelo útil en base a compuestos aromaticos naturales extraídos

de plantas biodinamicas, dirigidas para conseguir la fertilidad del suelo, y renovación
de la microfauna.

Le da mayor incremento a la masa radicular. Incentiva la actividad microbiana

manteniendo el equilibrio biológico del suelo y Aumenta la absorción de nutrientes por
parte de la planta

Estos extractos poseen una característica nemastatica, contra nematodos patógenos

de plantas, logrando una alta efectividad para la reducción de nematodos. Es inocuo,
no afecta la salud de las personas, no contamina el medioambiente, no genera efectos
de residualidad, actúa como biofertilizante y ayuda a la reducción de poblaciones de
nematodos.

Dosis recomendada: 10L ℎ𝑎−1 , con 2 aplicaciones de intervalos de 5 días.

b) Paecilomyces lilacinum: 90 mL

Características:

3
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA
FACULTAD DE AGRONOMIA

Nematicida biológico a base de cepa de Paecilomyces lilacinum. La presentación

es un envase 250 mL de 1x1012 conidios con una pureza de 98%, sin problemas de
residualidad.

Modo de acción: Ataca a los huevos destruyéndolos y en las hembras causa

deformaciones, destrucción de ovarios y reducción de la eclosión de huevos, bajo
condiciones de acidez; produce metabolitos tóxicos que alteran el sistema nervioso de
los nematodos, reduciendo los niveles de población.

- Insumo B (𝑡2 ):
a) Bacillus subtilis sp., Paecilomyces lilacinum, Pochonia sp., Trichoderma
sp: 108 g
b) Activador liquido: 216 mL

Presentación comercial en una caja (Kit) que contiene:

- Activador líquido: 1 frasco de 1L.

- Extracto en polvo: 2 bolsas hidrosolubles de 250 gr. Cada uno

Composición:

Extracto de microorganismos nativos benéficos (metabolitos, enzimas y demás

componentes celulares de Bacillus subtilis sp., Paecilomyces lilacinum, Pochonia
sp., Trichoderma sp, levaduras y otros microorganismos), que por Métodos
Biotecnológicos, han sido incorporados en un sustrato inerte (Extracto en Polvo), el
mismo que se combina con el compuesto orgánico (Activador Líquido), para
contrarrestar el ataque e infestación de nematodos perjudiciales a los cultivos.

Modo de acción: Forma una barrera bioquímica activa parta reducir y controlar
poblaciones de nematodos fitófagos, le prestá condiciones antagónicas que impiden la
instalación del nematodo. Crea condiciones favorables para el aumento de la
microflora y la microfauna, que van a desplazar y regular, por el fenómeno de
exclusión competitiva, a las poblaciones de nematodos nocivos, lográndose el
desarrollo de una raíz sana y funcional

Se aplica en sistemas de riego tecnificado, inyectándolo en el tercer cuarto del tiempo

de riego. En drench a cuello de planta, mediante pulverización con boquilla
semiabierta. En inmersiones de semillas o plántulas. También se aplica de forma
localizada en la zona de crecimiento de la raíz, con envase o depósito, la cantidad
requerida por planta.

- Insumo C 𝑡3 :
Características:

Es un nematicida biológico de acción preventiva y control de nematodos, combina el

modo de acción para uso agrícola.

Consta de dos frascos en una caja (Kit) cada uno de 1 L a una concentración de
8𝑥1011(unidades formadoras de colonias) por litro

4
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA
FACULTAD DE AGRONOMIA

Frasco 1: (hongos) Paecilomyces lilacinus, Hirsutella rhossiliensis,Arthrobotrys

oligospora, Acremonium butyri. 216 mL

Frasco 2: (bacterias): Bacillus chitinosporus, Bacillus firmus.. 216 mL

Modo de acción:

Combina el modo de acción de 6 microorganismos, 4 hongos y 2 bacterias:

Paecilomyces lilacinus parasita todos los estadios de los nematodos. El micelio

crece alrededor del huevo de nematodo penetrándolo y usándolo como alimento.

Hirsutella rhossiliensis produce conidias que penetran al contacto, germina y

penetra la cutícula del nematodo.

Arthrobotrys oligospora hongo atrapador de nematodos.

Acremonium butyri produce una enzima polisacárida -hidrolizada que tiene

cualidades de ovicida.

Bacillus chitinosporus produce enzimas quitinaza que degrada huevos de

nematodos. Bacillus firmus bacteria de alta motilidad que produce fitohormonas y
solubiliza fosfato (degrada la cutícula).

10.2. MÉTODOS:

10.2.1. DELIMITACIÓN DE ÁREA EXPERIMENTAL.

Se delimitará el campo comercial de la Irrigación La Joya Antigua de granado

‘Wonderful’ de tres años de edad con un distanciamiento de plantas de 4x2 m,
considerándo 48 plantas, las cuales se trazarán tres bloques de cuatro tratamientos.

10.2.2. CARACTERÍSTICAS DE LA EVALUACIÓN POR UNIDAD EXPERIMENTAL:

Se considerará 1 fila de 4 plantas por cada unidad experimental. Las evaluaciones se

harán en 2 plantas dejando 2 plantas a cada costado (inicio y final de cada fila de cada
unidad experimental) como efecto de borde.

10.2.3 MUESTREO DE SUELO:

De cada fila central se tendrá 1000 cm3 de suelo por unidad experimental.

Para la colecta se eliminarán los primeros 10 cm superficiales del suelo para sacar
muestra de los 25 a 30 cm de suelo, se homogenizará el suelo de cada unidad
experimental de tal manera que se obtiene los 1000 cm3.

10.2.4. ANALISIS DE SUELO: para el análisis de la muestra de suelo se enviará a la

clínica de diagnosis de la universidad Agraria La Molina, la cual usará el método de
extracción de nematodos llamada “método de la bandeja de Baermann”

 Método de la bandeja de Baermann:

5
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA
FACULTAD DE AGRONOMIA

Paso 1: Se separarán las raíces de las muestras y colocarán aparte en otro plato.
Etiquetar.

Se utilizará un tamiz de malla gruesa para eliminar las piedras y residuos vegetales del
suelo y se desharán los grumos o terrones de suelo. En un recipiente de plástico se
mezclará muy bien la muestra de suelo y se tomará una medida de suelo de 100 ml

Paso 2: Se Colocará papel absorbente sobre un tamiz/cedazo de plástico (colocado

sobre un plato de plástico) donde la base del tamiz quede completamente cubierta por
el papel. Etiquetar

Paso 3). Se Pondrá la medida de suelo sobre el papel colocado sobre el tamiz. Es
importante que el suelo quede sobre el papel (las salpicaduras de suelo da lugar a
extracciones sucias difíciles de contar).

Paso 4). Se añadirá agua a las bandejas de extracción despacio y con cuidado (entre
el borde de la malla y el lateral de la bandeja) y no al papel o suelo. Se añadira un
volumen determinado de agua a cada bandeja para humedecer el suelo o las raíces
pero sin cubrirlo asegurándose de que haya suficiente agua como para que no se
seque la muestra. Se dejará las bandejas de extracción en reposo (preferentemente
en la oscuridad) por un periodo de tiempo determinado (48 horas si es posible).

Paso 6). Los nematodos en el suelo o en el tejido vegetal se moverán a través del
suelo o tejido vegetal y pasarán al agua colocada en la bandeja/placa y allí se
quedarán. Después del periodo de extracción, se levantará el tamiz que contiene el
suelo y se dejará que el agua escurra sobre la bandeja de extracción.

Paso 7). Se pondrá el tamiz aparte y retirará el tejido vegetal/suelo a la basura. Se

verterá el agua de la bandeja/plato en un vaso previamente etiquetado con la ayuda de
un frasco lavador para lavar la bandeja o plato. Se dejará que las muestras
sedimenten para contar los nematodos que se extraerán, se concentrará el volumen
de la suspensión vertiendo el agua cuidadosamente el exceso de agua (teniendo
cuidado de no perder los nematodos depositados en el sedimento). Se lavarán los
nematodos retenidos en este tamiz y recogerlos en un vaso para su posterior conteo.

Estos datos serán recopilados para hacer la relación de población inicial y final así se
obtendrá la fluctuación poblacional de juveniles II del nematodo del nódulo de raíz
Meloidogyne spp. Después de las aplicaciones de los tratamientos.

Formula: 𝒑𝒐𝒃𝒍𝒂𝒄𝒊𝒐𝒏 𝒊𝒏𝒊𝒄𝒊𝒂𝒍 − 𝑝𝑜𝑏𝑙𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑑𝑒𝑠𝑝𝑢𝑒𝑠 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑎𝑝𝑙𝑖𝑐𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 =

poblacion final

 conteo de nodulaciones por raíz

Se realiza un conteo de las nodulaciones de los 5 g de raíz muestreada.

Se lava las muestras de raíces, picar y pesar 10 gramos, posteriormente colocarlo en

licuadora con hipoclorito de sodio y tamizar a 60 Mesh. 100 Mesh y 500 Mesh se
colecta 50 mL y se lleva a centrifuga.

6
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA
FACULTAD DE AGRONOMIA

10.2.5. RENDIMIENTO: Para obtener el rendimiento de estos tratamientos se

pesaran los frutos exportables por árbol de cada unidad experimental y posteriormente
los datos serán expresados a hectáreas.

10.2.6. DIAMETRO DE FRUTO: De los frutos que serán pesados se sacará una
muestra de 10 frutos exportables por cada unidad experimental y se procederá a medir
el diámetro con la ayuda de un vernier.

10.2.7. GRADOS BRIX: Con ayuda de un refractómetro se extraerá el jugo de una

muestra de dos frutos por unidad experimental para evaluar el contenido de grados
brix del fruto.

10.2.8. DISEÑO ESTADÍSTICO.

En el presente trabajo se utilizará el diseño de bloques completos al azar (DBCA) con

cuatro tratamientos y tres repeticiones. Se realizará la prueba estadística de TUKEY
con 0.05 de significancia.

10.2.6. CUADRO DE TRATAMIENTOS: En el siguiente cuadro 1 se presenta los

tratamientos por campaña.

CUADRO Nª 1: TRATAMIENTOS en estudio

DOSIS POR
N.COMERCIAL
CAMPAÑA ha−1
TRATAMIENTOS

Sin aplicación Sin aplicación

𝒕𝟎
EXNEM: 2,900 mL
𝒕𝟏
LILANOVA: 90 mL

BLOCKER: 108 g
𝒕𝟐
ACTIVADOR 216 mL
CustomBio NC
𝒕𝟑 (hongos)
216 mL
CustomBio NC
216 mL
(bacterias)

En el cuadro 2, se presenta el programa de aplicaciones por tratamiento. Se harán

aplicaciones al día 1 y a los 30, 45, 60, 90, 120 ,150, 180 y 210 días después de la
primera aplicación (DDA).

CUADRO Nº2: APLICACIÓN DE LOS PRODUCTOS POR CAMPAÑA

producto Aplicaciones

7
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA
FACULTAD DE AGRONOMIA

1ra 6ta 7ma

2da (5 3ra (30 4ta (60 5ta (90 8va (180 9na (210
(día (120 (150 TOTAL
DDA) DDA) DDA) DDA) DDA) DDA)
1) DDA) DDA)

1450 2900
1450 ml
EXNEM ml mL

LILANOVA 30mL 10mL 10mL 10mL 10mL 10mL 10mL 90 mL

36 g 36 g 36 g 108 g
BLOCKER 72
72 mL 72 mL 216 mL
mL
72
72 mL 72 mL 216 mL
mL
CustomBio
NC 72
72 mL 72 mL 216 mL
mL

10.2.8. CROQUIS DEL ÁREA EXPERIMENTAL Y DISTRIBUCIÓN DE

TRATAMIENTOS
El siguiente croquis tiene un distanciamiento entre plantas de 4x2m

8
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA
FACULTAD DE AGRONOMIA

VI. VARIABLES DE EVALUACIÓN

Se llevará a cabo evaluaciones periódica antes de cada aplicación de nematicidas

biológicos a base de Purpureocillium lilacinum para el control de nematodo
modulador, y así observar una curva de fluctuación poblacional.

La colección de muestra es como se explicó anteriormente en la parte de metodología.

Para la evaluación de estos variables ser tomara una muestra inicial sin aplicación
alguna de cada unidad experimental por bloque, a fin de tener datos inicial con los
cuales se harán comparativos significativos

6.1. JUVENILES II.

Se contará el número de juveniles II en el suelo por unidad experimental.

6.2. NODULACIONES EN LA RAÍZ.

Una vez obtenida las raíces se realizara en conteo de nódulos en los 5 g de raíz

6.3. RENDIMIENTO.

Se pesarán una muestra de 10 frutos exportables por árbol de cada unidad

experimental para llevar estos datos a rendimiento por Ha.

6.4. DIÁMETRO DE FRUTO.

Una vez pesados los 10 frutos exportables por árbol se procederá a la medición del
diámetro de los mismos.

6.5. GRADOS BRIX

Con ayuda de un refractómetro se extraerá el jugo de una muestra de dos frutos por
unidad experimental para evaluar conocer el contenido de sacarosa promedio por
tratamiento.

VII. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

ACTIVIDADES JUNIO JULIO AGOSTO SETIEMBRE NOVIEMBRE DISCIEMBRE ENERO

Elaboración
del X
Proyecto
Aprobación
X
del proyecto
Inicio del
X
proyecto
trabajo de X X
X X X X
campo
recopilación X X X X X X

9
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE AREQUIPA
FACULTAD DE AGRONOMIA

de datos
comparativo X X
X X X X
de resultados
redacción de X
tesis

VIII. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA.

- Cayao K, 2013, Portafolio Bayer para el cultivo de granado en el fundo ATHOS-

ICA. Consultado: 22/10/2017
Disponible:http://www.lamolina.edu.pe/postgrado/pmdas/eventos/granado/PR
ESENTACIONES/BAYER.pdf

- Meneses J, 2013, Control del nematodo del nudo (Meloidogyne incognita) en

el cultivo de granado en el fundo ATHOS-ICA, Universidad Nacional Agraria La
Molina, Perú, Consultado: 25/10/2017
Disponible:http://www.lamolina.edu.pe/postgrado/pmdas/eventos/granado/pre
sentaciones/gruposilvestre.pdf

- Lizárraga C, 2015. Determinación del efecto de microorganismos eficientes

para el control de Meloidogyne incognita (kofoid & white 1919) chitwood 1949
en plantas de vid en condiciones de invernadero, tesis para optar el título
profesional de BIOLOGO, facultad de ciencias biológicas- UNAS, Arequipa -
Perú, Consultado: 22/10/2017 Disponible:
http://repositorio.unsa.edu.pe/bitstream/handle/UNSA/473/M-
21639.pdf?sequence=1

- Biogenagros.f, Pruebas experimentales en el fundo San Luis-Santiago-ICA de

nematodos fitófagos en vid, paprika, alcachofa y granada, setiembre 2012,
Consultado: 23/10/2017
Disponible:http://www.biogenagro.com/media/uploads/productoficha/folleto_bl
ocker.pdf

10