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UNIVERSIDAD NACIONAL SAN CRISTÓBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE CIENCIA BIOLÓGICAS


ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA

TEMA: ASPECTO MORFO-FISIOLÓGICO Y


GENÉTICOS DE Acidithiobacillus sp.
DOCENTE: Blgo. CHUCHÓN MARTÍNEZ Saúl A.

INTEGRANTES:
ÍNDICE

1. INTRODUCCIÓN: ........................................................................................ 3

2. RESUMEN:.................................................................................................. 4

3. MARCO TEÓRICO: ..................................................................................... 5

3.1. Antecedentes: ..................................................................................... 5

3.2. Generalidades: .................................................................................... 5

3.2.1. Biolixiviación bacteriana por Acidithiobacillus sp. ................... 7

3.3. Descripción morfo-fisiológica y genética de las dos principales


bacterias lixiviantes: ................................................................................... 10

3.3.1. Acidithiobacillus ferroxidans:.................................................... 10

3.3.2. Acidithiobacillus thioxidans: ..................................................... 19

4. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA: ............................................................. 23


1. INTRODUCCIÓN:

Diversas actividades como la minería o la producción industrial han generado


residuos de diversa índole provocando que se produzcan efectos negativos en
el medio ambiente, como son la contaminación del suelo y por ende la
contaminación del agua, por elementos encontrados en los residuos de la
minería.
Desde hace algunas décadas, fue demostrado que entre los procesos
implicados en la oxidación de minerales sulfurosos, existen reacciones
biológicas que involucran la actividad de microorganismos. En particular se ha
reconocido a bacterias de la especie Acidithiobaillus Ferrooxidans, por su
habilidad para acelerar la disolución oxidativa de minerales sulfurosos
presentes en materiales residuales de minas, lo que incrementa la generación
de acidez producto de la oxidación de algunos minerales sulfurosos. Este
hallazgo ha sido importante para aminorar los efectos del impacto ambiental
controlando la actividad de estos microorganismos, llegando a considerarlo
como una alternativa de solución a problemas que incluyen al impacto
ambiental.
2. RESUMEN:
3. MARCO TEÓRICO:
3.1. Antecedentes:
Los estudios sobre genómica comparativa en microorganismos biolixiviantes
del género Acidithiobacillus se iniciaron con Valdéz, quienes realizaron la
comparación de especies estrechamente relacionadas como Acidithiobacillus
ferrooxidans, Acidithiobacillus thiooxidans y Acidithiobacillus caldus. Ellos
identificaron conjuntos de genes que podrían ser responsables de las
diferencias en la oxidación del hierro y azufre en estos organismos. También
sugirieron que el nitrógeno fijado puede sólo puede ser suministrado por
Acidithiobacillus ferrooxidans, lo que sugiere que es el principal contribuyente
de nitrógeno en un consorcio de las tres bacterias como las que pueden
encontrarse en un cúmulo de biolixiviación. Adicionalmente, el genoma de la
cepa tipo Acidithiobacillus ferrooxidans no codifica flagelos mientras que los
otros dos Acidithiobacillus sí poseen estas capacidades (Valdéz et al. 2008).
3.2. Generalidades:

Un considerable interés se ha mostrado en Acidithiobacillus sp. Debido a su


uso en el procesamiento de minerales industriales y su fisiología inusual. La
principal contribución de estas bacterias en la extracción de metales es su
capacidad para atacar minerales azufrados y convertir los sulfuros insolubles
en iones tales como cobre, plomo, zinc, níquel y sulfatos. Los tres metales
recuperados en mayores cantidades mediante reacción bacteriana directa o
indirecta son cobre, uranio y oro.

Existen numerosas aplicaciones sobre biolixiviación, principalmente en


biorremediación y en industria minera. Dicha disolución favorece la
recuperación del metal y por tanto simplifica los procesos de pirometalurgia,
los cuales también son procesos eficientes de lixiviación, pero no muy
amigables para el ambiente. La caracterización de algunas bacterias en
biominería ha permitido conocer el sustrato que utilizan para crecer. El
Acidithiobacillus ferrooxidans, Acidithiobacillus ferrivorans y Acidithiobacillus
ferridurans utilizan el hierro ferroso (Fe2+) como donador de electrones,
Acidithiobacillus thiooxidans y Acidithiobacillus caldus utilizan solo el azufre
elemental. Además, Acidithiobacillus ferrivorans y Acidithiobacillus
ferrooxidans también utilizan el CuS como sustrato.

Figura 1. Caracteres taxonómicos de especies de Acidithiobacillus sp.


Fuente Hallberg et al. (2010).

Los procesos de biolixiviación industrial no se llevan a cabo en condiciones


de esterilidad, y como resultado el Acidithiobacillus sp. Rara vez o nunca crece
como un cultivo puro. La mayoría de las operaciones comerciales de
biolixiviación se llevan a cabo con un consorcio de bacterias acidófilas,
quimiolitotróficas que pueden incluir Acidithiobacillus ferrooxidans,
Acidithiobacillus thiooxidans, Leptospirillum ferrooxidans y bacterias
heterótrofas acidófilas que pertenecen al género Acidiphilium. Aunque
Acidithiobacillus ferrooxidans se considera el miembro más importante del
consorcio, los cultivos mixtos de bacterias son a menudo más eficientes en la
descomposición de mineral que Acidithiobacillus ferrooxidans sola. Las
bacterias mencionadas son mesófilas, y como resultado, cuando el control es
posible la biooxidación industrial de los minerales se lleva a cabo a
temperaturas por debajo de 45°C. Sin embargo, para una aplicación efectiva
de estas tecnologías en minas de ambientes fríos, el cual es el ambiente de
la minería de gran altitud en el Perú, son necesarias cepas adaptadas al frío
para este tipo de procesos, con la finalidad de optimizar las tasas de lixiviación
y mejorar la viabilidad de las operaciones de lixiviación a baja temperatura. Se
reporta una nueva especie de este género como Acidithiobacillus ferrivorans,
que comparte características con Acidithiobacillus ferrooxidans, pero tiene la
cualidad de crecer a bajas temperaturas (4oC).
3.2.1. Biolixiviación bacteriana por Acidithiobacillus sp.
a) Fundamentos de biolixiviación.
La biolixiviación bacteriana puede llevarse a cabo de manera directa (a
través del contacto directo con el mineral) o indirecta (sin contacto con el
mineral, tan solo acidificando el medio).
 LIXIVIACIÓN DIRECTA:
Las bacterias ferroxidantes también pueden lixiviar sulfuros metálicos
directamente, sin la participación de sulfato férrico producido
biológicamente. El proceso se describe en la siguiente reacción, donde M
representa un metal bivalente: (Paños, Nora Hilda – 1991).Oxidación
directa del sulfuro:
MS + 2 O2 --------------------------- MSO4 + So
 Oxidación del azufre residual:
2So + 3 O2 + 2H2O --------------------- 2 H2 SO4
Dado que el hierro siempre está presente en ambientes de lixiviación
natural, es posible que tanto la lixiviación indirecta como la directa, ocurran
de manera simultánea.
 2 FeS + H2O -------------------------- Fe2(SO4)3 + H2SO4
 CuFeS + 8.5 O2 + H2SO4 ---------- 2CuSO4+ Fe2(SO4)3 + H2O
 LIXIVIACIÓN INDIRECTA:

Este tipo de lixiviación se realiza con Fe2(SO4)3 en ausencia de oxígeno


o de bacterias, es responsable de la disolución o lixiviación de varios
minerales sulfurados de importancia económica. Dentro de este
mecanismo, son importantes dos reacciones: (Paños, Nora Hilda –
1991).

 F e S 2+ ½O2+ H2O ----------------FeSO4+ H2SO4


 C u F e S 2+ 2Fe2(SO4)3---------------------CuSO4+5FeSO4+ 2S0
 Cu2S + 2Fe2(SO4)3-------------------- 2CuSO4 + 4FeSO4 + S0
La bacteria Acidithiobacillus ferrooxidans es capaz de obtener energía por
oxidación de hierro ferroso según la reacción:

Se
relaciona con la reacción de lixiviación del sulfuro, mediada por la acción
oxidativa del ión férrico. La bacteria actúa generando el férrico consumido
en la lixiviación.

Fe+2 + ½ O2 + 2H+ ----------------------- 2Fe+3 + H2O

2Fe+3 + MS --------------------------- M+2 + Fe+2+ So

Acidithiobacillus ferrivorans puede oxidar un mineral a temperaturas


cercanas a 5°C con mayor rendimiento a lo que puede Acidithiobacillus
ferrooxidans a la misma temperatura.
Además, Acidithiobacillus ferrivorans tiene un crecimiento óptimo a 25°C;
estas dos características la catalogan como bacteria psicrotolerante.
Por otro lado, a pesar de que Acidithiobacillus ferrivorans tolera bajas
temperaturas, puede realizar la oxidación de los mismos minerales (pirita y
sulfuros) que Acidithiobacillus ferrooxidans.
La capacidad oxidante a bajas temperaturas de Acidithiobacillus
ferrivorans la convierte en la mejor candidata cuando se requiere realizar
procesos de biolixiviación de escala industrial en zonas donde la
temperatura normal está por debajo de 10°C, como las minas ubicadas en
gran altitud en los Andes del Perú. (Paños, Nora Hilda – 1991).
Mecanismos moleculares de Acidithiobacillus ferrooxidans para la
biolixiviación.
El mecanismo de biolixiviación, independientemente de que se lleve a cabo
de manera directa o indirecta, se basa en la toma de electrones desde el Fe 2+
que son llevados hacia el interior de la bacteria. El mecanismo molecular para
que la bacteria transporte el electrón hacia su interior aún no es claro,
especialmente para la especie Acidithiobacillus ferrivorans.
Los mecanismos mejor estudiados hasta el momento se han realizado para la
bacteria Acidithiobacillus ferrooxidans. Se describe que los electrones pueden
ser extraídos por la proteína Citocromo C (Cyc2), que se encuentra embebida
en la membrana externa, hacia la proteína rusticianina y luego es interiorizada;
pero los últimos estudios han revelado que el transportador inicial de los
electrones es el pili Tipo IV, el cual serviría como un nanocable por donde los
electrones se transportan hasta al Cyc2. (Paños, Nora Hilda – 1991).

b) Transporte de electrones desde el Cyc2.


Un modelo de la oxidación de Fe2+ en Acidithiobacillus ferrooxidans basado
en evidencia bioquímica, genética molecular, bioenergética, bioinformática y
genómica funcional, donde se puede explicar que los electrones extraídos
de la oxidación de Fe2+ por la Cyc2, embebida en la membrana externa, se
pasan a la proteína periplásmica rusticianina. Desde la rusticianina, los
electrones pueden tener una vía de descarga Down Hill para reducir el O2 a
agua, para esto, los electrones tienen que pasar a través del citocromo C4
(Cyc1) y el complejo citocromo oxidasa tipo aa3 o un camino distinto uphill
al complejo NADH a través del citocromo CycA1, el complejo bc1 y quinonas
asociadas a la membrana, está vía estaría destinada a la formación de
biomasa.
La energía para empujar electrones uphill en contra de la gradiente sería
termodinámicamente desfavorable y se postula que viene de la afluencia de
protones generado por la fuerza motriz de protones a través de la membrana
interna resultante de la diferencia en la concentración de protones dentro de
la célula (pH 6.5) y fuera de la célula (pH 2.0). Esta vía uphill es similar en
muchos aspectos a las vías tomadas por los electrones y protones en la
fosforilación oxidativa mitocondrial y de procariotas, sólo que en sentido
inverso. La figura 2 muestra que la afluencia de protones a través del
complejo ATP sintetasa (ATPasa) que conduce a la biosíntesis de ATP.
Estos protones y también aquellos que entran en la célula para conducir
electrones uphill se postulan que son consumidos, al menos en parte, por la
reducción de complejo bc1 complejo NADH Dentro de la célula pH=6.5 Fuera
de la célula pH=2.0 Oxidasa terminal aa3 Ubiquinona ox/red ATPasa 8 O2
al agua, utilizando electrones derivados de la oxidación de Fe2+ a través de
la vía Down Hill (Bonnefoy, et al., 2012).

Figura 2. Modelo oxidativo de hierro ferroso en At. ferrooxidans. Un perfil rédox


se ha colocado debajo del modelo para facilitar la comparación de los potenciales
rédox de algunas de las reacciones. R, rusticianina, OM, membrana externa, IM,
membrana interna. Valores de Eo para la pareja Fe(III)/Fe(II) y O2/H2O a pH 2.0.
Fuente Quatrini et al. (2009).

3.3. Descripción morfo-fisiológica y genética de las dos principales


bacterias lixiviantes:
3.3.1. Acidithiobacillus ferroxidans:
Figura 3. Acidithiobacillus ferrooxidans microscópico de contraste
Fuente:https://www.google.com/url?sa=i&source=images&cd=&cad=rja&u
act=8&ved=0ahUKEwja5Lym7.

a) Aspecto Morfo-fisiología:
Acidithiobacillus ferroxidans anteriormente conocido como Thiobacillus
ferroxidans, es un bacilo Gram negativo, de 0.3 – 0.5 um de diámetro y de
1.0 – 1.7 um de longitud, no forman esporas, poseen movimiento gracias a
un flagelo polar, así mismo tiene una fisiología bien adaptada al crecimiento
en un ambiente minero inorgánico y fija dióxido de carbono atmosférico por
lo que es autótrofa (Kelly y Harrison, 1989).

Estas bacterias son QUIMIOLITOAUTOTRÓFICAS, los cuales utilizan la


oxidación de compuestos inorgánicos para generar todos los componentes
de la célula. Esta capacidad metabólica es la que se aprovecha para
solubilizar el cobre.
La energía la obtiene por la oxidación del ion ferroso a ion férrico o
compuestos de azufre reducido generando ácido sulfúrico.
La bacteria es acidófila con un pH óptimo dentro del rango 1.5 a 2.5. Crece
mejor en un ambiente aeróbico con oxígeno como aceptor de electrones
(Corbet y Ingledew, 1987).
Es ubícuo en el medio ambiente, puede ser fácilmente aislado a partir de
muestras de suelo recogidas de yacimientos de minerales de piríta o de los
sitios de drenaje ácido de minas, que están frecuentemente asociados con
los residuos de carbón o de vertederos de minas.
Además de su fisiología única, tiene otras características que lo hacen
adecuado para su uso en operaciones de biominería. Una de ellas es su
resistencia inherente a altas concentraciones de iones metálicos y otros. Se
ha reportado que la bacteria es capaz de crecer en medios que contienen
Zn+2, Ni+2, Co+2, Cu+2, y Fe+2.
Al microscopio, el Acidithiobacillus ferroxidans muestra un alto grado de
polimorfismo: células grandes en forma de varilla con los extremos
redondeados (1,6-1,7 um de largo por 0.3-0.4 um de ancho), o bien células
esféricas, ovoides o alargadas (0.6-0.7 u de largo por 0.3-0.4 u de ancho).

b) Fuente de carbono:

El Acidithiobacillus ferroxidans fija CO2 a través de un ciclo de Calvin.


La reacción global del ciclo de Calvin se puede representar de la siguiente
forma:

La operación del ciclo requiere ATP y del complejo reductor CO 2- NADH


que son sintetizados a través de las reacciones de oxidación y constituyen
las moléculas de acoplamiento en las reacciones anabólicas.

El Acidithiobacillus ferroxidans posee una cadena responsable del flujo de


alrededor del 10% de la cantidad total de electrones. Considerando los
potenciales de quinona, citocromos y ferroxidoxina, ellos están
involucrados en este proceso.
Figura 4. Representación esquemática del flujo reverso de electrones
en Acidithiobacillus ferroxidans. Fuente Paños, Nora Hilda - 1991.

c) Metabolismo energético

Los procesos bioenergéticas ocurren en la membrana citoplasmática que


contiene los citocromos, los cuales constituyen los componentes más
importantes de la cadena de transferencia de electrones.

Esta cadena de transporte de electrones actúa como mediadora entre los


componentes de la reacción global de oxidación de hierro ferroso, de la
siguiente forma:

Figura 5. Muestra el esquema de la transferencia de electrones y síntesis


de ATP durante la oxidación de Fe2+. Esta transferencia conduce a la
generación de un potencial electroquímico que da lugar a la síntesis del ATP
requerido para la fijación de CO2 y otras funciones del metabolismo
intermediario. (Paños, Nora Hilda – 1991).

Figura 6. Representación esquemática de fosforilación oxidativa en


Acidithiobacillus ferroxidans a partir de hierro ferroso. Fuente Paños, Nora
Hilda - 1991.

d) Fijación de nitrógeno

Aunque Acidithiobacillus ferroxidans es muy eficiente en la utilización de


nitrógeno amoniacal, la escasez de esta forma de nitrógeno en los
minerales puede limitar seriamente la eficiencia de los procesos
biohidrometalúrgicos.

La capacidad de fijar nitrógeno atmosférico es importante para cualquier


organismo que haya evolucionado en ambientes carentes de otras fuentes
de nitrógeno. La incorporación de N2 en el material celular que el
Acidithiobacillus ferroxidans, el cual es capaz de fijar nitrógeno atmosférico.
Aunque las condiciones fisiológicas para la fijación de nitrógeno son
relativamente variables, la enzima nitrogenasa que está exclusivamente
conservada, por ello es muy sensible al oxígeno. Como Acidithiobacillus
ferroxidans es un aerobio obligado, capaz de vivir en condiciones extremas.
La presencia de secuencias de DNA homólogas a los genes nifHDK de en
las cinco cepas de Acidithiobacillus ferroxidans, sugiere que la capacidad
de fijar nitrógeno puede ser bastante general en cepas de esta especie.
Un carácter muy distintivo en la fisiología de Acidithiobacillus ferroxidans es
que posee un sistema nitrogenasa siendo un aerobio obligado de vida libre.
Las proteínas nif son lábiles al oxígeno y el sistema responsable de la
fijación de nitrógeno funciona solamente en condiciones de anaerobiosis
extrema. El Acidithiobacillus ferroxidans es capaz de fijar nitrógeno
atmosférico usando hierro ferroso como fuente de energía.
El entendimiento detallado de cómo el Acidithiobacillus ferroxidans
resuelve esta aparente contradicción fisiológica y el conocimiento de las
condiciones en que esta bacteria fija nitrógeno eficientemente,
representarán un significativo aporte a la tecnología biominera. (Paños,
Nora Hilda – 1991).

e) Desarrollo de sistemas genéticos en Acidithiobacillus ferroxidans

El desarrollo de procedimientos para el mejoramiento genético del


Acidithiobacillus ferroxidans y la mejor comprensión de los procesos que
controlan la expresión génica en organismos autótrofos acidofílicos,
constituyen importantes áreas de investigación. En este sentido, son
importantes los beneficios potenciales que puede generar el uso de la
tecnología del DNA recombinante y de la manipulación genética de cepas
de Acidithiobacillus ferroxidans.
Hay varios pasos importantes para el desarrollo de sistemas genéticos en
una bacteria como ésta:

 Se deben identificar características útiles que puedan servir como


marcadores para la identificación y selección de cepas recipientes
transformados.
 Se deben identificar y caracterizar moléculas de DNA vectores que
puedan replicar en Acidithiobacillus ferroxidans y que puedan llevar
insertos de DNA.
 Se debe aislar y purificar las secuencias de DNA que codifiquen para
las características fenotípicas deseadas.
 Realizar la construcción de las moléculas de DNA vector.
 Desarrollar un método para transferir vectores a las cepas receptoras
de DNA.
No se conocen los mecanismos de control de la expresión génica en
bacterias autotróficas. Como Acidithiobacillus ferroxidans tiene una
fisiología muy diferente a la de E. coli o a la de cualquier otro heterótrofo
que haya sido genéticamente estudiado, es importante establecer si
algunas regiones genéticas de control se expresan o son equivalentes a las
de bacterias heterotróficas.
El conjunto de genes hasta ahora caracterizados y disponibles para la
manipulación genética de Acidithiobacillus ferroxidans, proviene en su
totalidad de bacterias heterotróficas cuyas relaciones genéticas con
Acidithiobacillus ferroxidans son inciertas. (Rivera, 2011)
f) Marcadores de selección
Se ha investigado la identificación de marcadores potenciales de selección
para estudios genéticos, que puedan ser utilizados en un medio inorgánico
con sulfato ferroso como fuente de energía a pH 1,8.
Si bien Acidithiobacillus ferroxidans es altamente resistente a elevadas
concentraciones de varios iones metálicos como el Cu2+, C02+, Mn2+, Ni2+ y
Zn2+, es sensible a aniones del As y el Te, y extremadamente sensible a
Hg2+, Hg+ y Ag+
La resistencia a iones metálicos es un marcador particularmente atractivo
para estudios genéticos en Acidithiobacillus ferroxidans porque, además de
ser una herramienta útil de laboratorio para seleccionar posibles
transformantes, conferirían a la bacteria características industrialmente
útiles. En efecto, muchos minerales que por su composición sería
susceptibles de bio-oxidación que contienen, inhibidores metálicos que,
aunque en bajas concentraciones, resultan inhibidores del crecimiento
bacteriano.
Dado que los genes de resistencia a estos metales se han identificado en
otras bacterias, dichos genes podían servir como marcadores genéticos
para Acidithiobacillus ferroxidans.
La resistencia a antibióticos se ha usado ampliamente como marcadores
de selección en bacterias heterotróficas. De allí que se ha ensayado la
sensibilidad de cepas de Acidithiobacillus ferroxidans a un amplio espectro
de antibióticos. Todas las cepas resultaron sensibles a rifampicina,
cloranfenicol, cefaloridina y ampicilina. (Segura, 1998).
g) Plásmidos de Acidithiobacillus ferroxidans
Se han aislado y caracterizado plásmidos de varias cepas de
Acidithiobacillus ferroxidans. En uno de estos estudios, tres de seis cepas
aisladas de distintas fuentes contenían plásmidos que variaban entre 4,5 y
27,5 Kb. Por mapeo de restricción se identificaron sitios de restricción
únicos para clonado.
En otro trabajo, se aislaron nueve cepas de una mina de uranio en Canadá.
Cada una contenía entre uno y cuatro plásmidos, y el tamaño de los
plásmidos variaba entre 12,2 a 43x10 Da. Trataron de correlacionar la
presencia de plásmidos de un tamaño particular con un incremento en la
resistencia a uranio se detectaron plásmidos de aproximadamente
13+0,5x10g Da en cuatro cepas que tenían las mayores resistencias a
U022+. No obstante, los plásmidos no se caracterizaron por análisis de
restricción y no se estableció la relación entre ellos. En una de las cepas,
la desaparición de estos plásmidos se correlacionó con la desaparición de
la resistencia a uranio, pero tal evidencia circunstancial no es conclusiva
para establecer una relación causal. Hasta el momento, no ha podido
asignarse un determinado fenotipo a un plásmido particular, y por ello,
estos plásmidos son considerados como crípticos. Por otro lado, la cura de
plásmidos de Acidithiobacillus ferroxidans por varias técnicas, no ha dado
resultado. (Paños, Nora Hilda – 1991).

h) Clonado y expresión de orígenes de replicación de plásmidos de


Acidithiobacillus ferroxidans
Varios plásmidos provenientes de cepas de Acidithiobacillus ferroxidans
han sido transferidos a E. coli, sin que ningún fenotipo particular haya
podido ser asignado a los productos de transformación en la bacteria.
i) Transferencia de vectores a Acidithiobacillus ferroxidans
Un paso crítico en el desarrollo de un sistema genético para
Acidithiobacillus ferroxidans es la transferencia de vectores a cepas
receptoras. Los esfuerzos para transferir plásmidos de Acidithiobacillus
ferroxidans por transformación con células tratadas y no tratadas con
calcio, han sido infructuosos. Para otras bacterias se han utilizado
procedimientos de transformación y fusión de protoplastos para la
transferencia de plásmidos. Así mismo, se ha investigado la producción y
regeneración de esferoplastos en dos cepas de Acidithiobacillus
ferroxidans.

Para la transferencia de ADN entre diferentes especies bacterianas, un


requerimiento importante es contar con un medio apropiado para llevar a
cabo la conjugación. Como el Acidithiobacillus ferroxidans es un autótrofo
acidofílico que tiene requerimientos muy diferentes a los de E. coli, que es
una bacteria heterotrófica que crece a pH neutro, no ha sido posible la
conjugación en forma directa entre ambas especies. Para resolver este
problema se ha propuesto transferir ADN de E. coli a Acidithiobacillus
ferroxidans en dos etapas, usando como intermediarios especies de
thiobacilos que pueden crecer tanto a pH neutro o ácido, como en presencia
de sustratos orgánicos o autotróficamente. Estas especies son el T.
novellus, T. intermedius o T. neopolitanus. (Batraglia et. al., 1998; Ossa,
2004; Ossa y Márquez, 2005)
En la primera etapa, la conjugación se llevaría a cabo entre E. coli y una de
las especies anteriores de thiobacilos, a pH neutro y en presencia de
sustratos orgánicos, mientras que en la segunda etapa se podría producir
la conjugación entre la cepa receptora de la etapa anterior y
Acidithiobacillus ferroxidans a bajo pH y en ausencia de sustratos
orgánicos.
Todos los trabajos que al momento se han realizado en un esfuerzo por
transformar Acidithiobacillus ferroxidans por una variedad de técnicas,
concluyen en que las falencias que impiden la transferencia y expresión de
ADN a Acidithiobacillus ferroxidans pueden deberse a algunos de los
siguientes elementos:
1. La carencia de expresión de genes de resistencia provenientes de
bacterias heterotróficas en un autótrofo acidofílico ya que nada se
sabe de la equivalencia o no de expresión en ambos.
2. La falta de un medio de plaqueo adecuado para Acidithiobacillus
ferroxidans que permita con seguridad seleccionar posibles
transformantes. Los métodos hasta ahora diseñados son lentos,
inciertos y de resultados no repetitivos.
3. Fallas en los métodos de transferencia de ADN a Acidithiobacillus
ferroxidans.

3.3.2. Acidithiobacillus thioxidans:

Figura 7. Acidithiobacillus thioxidans microscópico de contraste. Fuente


https://www.google.com/url.com%2FAcidithiobacillus-thiooxidans.

a) Aspecto morfo-fisiológico:

Acidithiobacilllus thiooxidans es una bacteria acidófila, aerobia, Gram


negativa, con una temperatura de crecimiento y morfología semejante al
Acidithiobacilllus ferrooxidans.

Su forma es la de varillas cortas, con una longitud no superior al micrón y


que poseen usualmente un flagelo polar que le confiere una movilidad
superior, en general, a la de Acidithiobacilllus ferrooxidans.
La energía para sus procesos metabólicos la obtiene a partir de la oxidación
del azufre, y en algunos casos puede llegar a oxidar otros compuestos
reducidos del azufre: algunos sulfuros metálicos, tiosulfato, etc.

Las células de Acidithiobacilllus thiooxidans difieren de las de


Acidithiobacilllus ferrooxidans en su bajo contenido de guanina-citosina
(GC) (el contenido de GC es 58 % para Acidithiobacilllus ferrooxidans y 52
% para Acidithiobacilllus thiooxidans) y por su incapacidad para oxidar al
hierro (II). Tampoco es capaz de oxidar concentrados de pirita (FeS2) y
calcopirita (CuFeS2). (Barret, J., Hughes, M. N., Karavaiko, G. I. and
Spencer, G. A. ,1993).

A continuación, se expone un resumen con las características generales


de estas dos bacterias:

Características A. ferrooxidans A. thiooxidans


Forma Bacilos 0,3-0,5xl,0-1.8 Bacilos 0,3x1,0-1.2 um
um
Coloración Negativo Negativo
Gram
pH óptimo 1,5-2,3 2,0 - 3,5
Rango de pH 1,2-6 0,5-6
Fuente de CO2 CO2
carbono
Fuente de NH4 NH4
nitrógeno
Aceptores O2, Fe +3 O2
electrónicos
Figura 8. Característica general de las dos principales bacterias lixiviantes.
Fuente Norris, P. R., 1990.

b) Crecimiento de Acidithiobacillus thiooxidans sobre azufre elemental


Acidithiobacilllus thiooxidans es una bacteria acidófila,
QUIMIOAUTOTRÓFICA que utiliza el azufre elemental o compuestos
reducidos del azufre como sustratos y que puede crecer a pH tan bajos como
0,5. La habilidad de estos microorganismos de catalizar la oxidación de
compuestos reducidos del azufre, es aplicada en la industria en procesos de
biolixiviación, incluyendo la recuperación de metales preciosos a partir de
minerales, y en la desulfurización de carbón. El mecanismo de oxidación de
sulfuros inorgánicos ha sido estudiado previamente. (Ehrlich, H. E. ,1990).

Aunque las cinéticas de crecimiento de Acidithiobacilllus thiooxidans sobre


sulfuros inorgánicos y especialmente sobre azufre elemental ha sido
pobremente analizada y modelada. Un número importante de trabajos han
indicado que la oxidación microbiana del azufre por Acidithiobacilllus
thiooxidans requiere contacto directo entre la bacteria y el sustrato. (Porro, S.,
Ramirez, S., Reche, C., Curutchet, G., Alonso, S. and Donati, E. ,1997).

c) Biolixiviación con Acidithiobacillus thiooxidans:

La recuperación de ciertos metales por vía biohidrometalúrgica se ha


convertido prácticamente en el único proceso rentable especialmente cuando
se trata de minerales de los cuales se recuperan metales de bajo valor en el
mercado (Cu, Zn, entre otros). (Cunitchet, G., Donad, E. y Tedesco P. ,1992).

En la actualidad, la biolixiviación se aplica a nivel industrial en diferentes


países del mundo, para la recuperación de cobre, níquel y uranio, así como
para incrementar las recuperaciones de oro y plata. Los principales
microorganismos involucrados en estas recuperaciones son Acidithiobacilllus
ferrooxidans y Acidithiobacilllus thiooxidans. Las ecuaciones que describen
los procesos más importantes en la interacción de estas bacterias con los
minerales sulfurados son las siguientes:

MS(s) + 2 O2(g) —bacterias— M(ac) + S (s) (1.1)

S(s) + 3/2 O2(g) + H20(1)—bacterias —SO4 (ac) + 2 H (ac) (1.2)


En realidad, el primer proceso no puede ser catalizado por Acidithiobacilllus
thiooxidans si el sulfuro es muy poco soluble. Por otro lado, debido a que
normalmente en los minerales sulfurados está presente el hierro, existe la
posibilidad de un ataque adicional sobre los sulfuros, en el cual tiene un lugar
preponderante Acidithiobacilllus ferrooxidans.

Este microorganismo, según se ha visto, cataliza la oxidación de hierro (II)


generando un oxidante en el medio, el ion hierro (III), que puede atacar a los
sulfuros facilitando la disolución:

Debido a la posibilidad de más de un tipo de ataque sobre los sulfuros y,


especialmente porque este último mecanismo, aparece como potencialmente
muy eficaz (dado su carácter cíclico), Acidithiobacilllus ferrooxidans ha sido el
microorganismo más utilizado en los estudios sobre biolixiviación. Sin
embargo, en un trabajo reciente se comprobó que, en ciertas condiciones (en
particular si hay hierro presente) Acidithiobacilllus thiooxidans permite una
mayor recuperación de cobre que Acidithiobacilllus ferrooxidans. (Donati, E.
Curutchet, G., Pogliani, C. y Tedesco, P. ,1996).
4. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA:

 BARRET, J., HUGHES, M. N., KARAVAIKO, G. I. AND SPENCER, G. A. (1993).


Metal Extraction by Bacterial Oxidation of Mineral, Ellis Hoorwood, Chichester.
 BONNEFOY V., HOLMES D. (2012). Genomic insights into microbial iron
oxidation and iron uptake strategies in extremely acidic environments.
Environmental Microbiology. pp 1597–1611.
 CORBET, C., INGLEDEW W. (1987). Is Fe3+'2+ cycling and intermediate in
sulphur oxidation by Fe2+-grown Thiobacillus ferrooxidans. FEMS Microbiology.
pp 1-6.
 CUNITCHET, G., DONAD, E. Y TEDESCO P. (1992). “Recuperación de cobre
de varios minerales argendnos mediante el uso de la biolixiviación”. II Jomadas
Argenünas de Tratamiento de minerales, La Plata, 139-141.
 DONATI E., CUNITCHET G. POGLIANI C. Y TEDESCO P. (1996). "Bioleaching
of covellite using puré and mixed cultures of Thiobacillus ferrooxidans and
Thiobacillus thiooxidans". Process Biochemistry, 31 (2)129.
 SEGURA Dolores, (1998), AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE
BACTERIAS FEROOXIDANTES Y SULFOOXIDANTES DEL ÁREA DE
MINERA DE RIOTINTO. Universidad de Sevilla.
http://fondosdigitales.us.es/media/thesis/1079/E_TD_219-introduccion.pdf
 RIVERA, R. E. (2011). ESTUDIO DE BIOLIXIVIACION DE UN MINERAL DE
SULFUROS DE COBRE DE BAJA LEY CON BACTERIAS TIO Y FERRO-
OXIDANTES EN CONDICIONES TERMOFILAS. Revista de la Facultad de
Ingeniería, Universidad de Atacama.
http://www.revistaingenieria.uda.cl/Publicaciones/260009.pdf
 Ehrlich, H. E. 1990. Geomicrobiology, 2nd Ed., Marcel Dekker, Inc.(ed), New
York, 449-513
 HALLBERG K.B., GONZÁLEZ-TORIL E., JOHNSON D.B. (2010).
Acidithiobacillus ferrivorans sp. facultatively anaerobic, psychrotolerant, iron-
and sulfur-oxidizing acidophiles isolated from metal mine-impacted
environments. Extremophiles. pp 9–19.
 KELLY, D., Y HARRISON A. (1989). Genus Thiobacillus Beijerinck. pp 1842-
1858.
 Norris, P. R. 1990. “Acidophilic Bacteria and Their Activity in Mineral Sulfide
Oxidation”. In; Microbial Mineral Recovery. Ehrlich H. L and Brierley C. L. (ed.),
McGraw-Hill, New York, 3-27
 PAÑOS, NORA HILDA. (1991). Fisiología y desarrollo de sistemas genéticos en
Thiobacillus ferrooxidans y cepas relacionadas para aplicación en procesos
biometalúrgicos. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de
Buenos Aires. Acceso 7 de noviembre de 2019.

 PORRO, S., RAMIREZ, S., RECHE, C., CURUTCHET, G., ALONSO, S. AND
DONATI, E. 1997. “Bacterial attachment; its role in bioleaching processes”.
Process Biochemistiy, 32, 573-578.
 VALDÉS, J., PEDROSO I, QUATRINI R, HOLMES D. (2008). Comparative
genome analysis of Acidithiobacillus ferrooxidans, A. thiooxidans and A. caldus:
Insights into their metabolism and ecophysiology, Hydrometallurgy. pp 180-184.
 URL DE REFERENCIA:
file:///C:/Users/ASUS/Downloads/19f56ec7228404776f14a6c2b586ece117df.pd
f
 URL DE REFERENCIA:
file:///C:/Users/ASUS/Downloads/Estudio_RomanLeon_Betsabe.pdf
 URL DE REFERENCIA:
http://cybertesis.unmsm.edu.pe/bitstream/handle/cybertesis/6087/Eca_aa.pdf?s
equence=1&isAllowed=y
 URL DE REFERENCIA:
https://www.google.com/url?sa=i&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=0
ahUKEwja5Lym7.
 URL DE REFERENCIA:
https://www.academia.edu/5226843/LA_BIOLIXIVIACION
 URL DE REFERENCIA:
bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis.n2404-Panos.pdf

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