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BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
Berardo Escalante Zumaeta

EPG-UNC
Cajamarca, octubre 2017
Introducción
• Ambiente amenazado
– Población mundial y sus demandas
• Acumulación de residuos y promoción del reciclaje, daño ambiental por
sobre-consumo, generación de residuos y mal uso de la tierra, sigue en
aumento.
• Para atender las demandas:
– Expansión de industrias, alimento, cuidado de la salud, vehículos; etc.:
Desarrollos desfavorables para el ambiente, sobretodo sino se aplica un
adecuado manejo de contaminantes.
• Remedio: Aplicación de las técnicas de la Biotecnología Ambiental:
– Organismos vivos para tratar residuos peligrosos y controlar contaminación
– Naturaleza: Hongos, bacterias y otros degradan compuestos orgánicos. Su
potencial para la limpieza ambiental aún no termina de ser comprendido.
Introducción
• Biotecnología:
– Evaluar el bienestar del ecosistema,
– Transformar contaminantes en sustancias benignas,
– Generar materiales biodegradables a partir de recursos renovables
– Desarrollar procesos de fabricación y disposición de residuos ambientalmente seguros.
• Integra ciencias naturales e ingeniería para el uso de organismos, células, partes de ellos y
análogos moleculares en la producción de bienes y servicios.
• Progresos
– Producción de drogas, vitaminas, esteroides, interferón;
– Obtención de productos de fermentación usados como alimento o bebida, la generación de energía a
partir de recursos renovables y basura;
– Ingeniería genética aplicada a plantas, animales y humanos.
• Las actuales preocupaciones ambientales fuerzan la orientación de la biotecnología
– Control de la contaminación (descontaminación del aire, suelo y agua),
– Prevención de la polución y minimización de residuos,
– Producción más amigable de productos químicos
– Biomonitoreo.
• Disciplina versátil impactada por tecnologías basadas en la aplicación de procesos biológicos
en la manufactura, agricultura, procesamiento de alimentos, medicina, protección ambiental y
conservación de recursos (Fig. 1).
Energía a partir de recursos
Decontaminación de renovables, residuos agrícolas
componentes
ambientales (agua, aire,
suelo).
Producción de comp..
químicos. BIOTECNO-
AGRICUL-
LOGIA
Biosensores AMBIENTAL
TURA Ingeniería genética
Prevención de aplicada a plantas y
contaminación y animales
minimización de residuos
BIOTEC-
NOLOGÍA TECNOLOGIA
GENÉTICA
TECNOLOGIA
DE
ALIMENTOS
Productos de
MEDICINA
fermentación (vino, Ingeniería genética aplicada a
cerveza, queso, humanos
yogurt, levaduras,
etc.
Producción de
antibióticos, vitaminas,
esteroides, insulina,
interferón
Figura 1. Aplicaciones de la Biotecnología en las actividades antrópicas (Industria, agricultura,

medicina, salud, ambiente)
Introducción
• Uso de la biotecnología para el tratamiento de los problemas de contaminación
ambiental no es una idea nueva:
– Los microorganismos se han usado para remover la materia orgánica y los compuestos
químicos tóxicos de las descargas domésticas e industriales.
– Las comunidades han dependido por más de un siglo, de poblaciones complejas de
microorganismos de ocurrencia natural para el tratamiento de aguas residuales.
• Cada organismo (animales, plantas, bacterias, etc.) ingiere nutrientes para vivir
y producir subproductos (desperdicios).
– Bacterias prosperan en componentes químicos de los productos de desecho.
– Microorganismos se alimentan de materiales que resultan ser tóxicos para otros.
• Por tanto: investigación en Biotecnología Ambiental es vital para desarrollar soluciones efectivas
que mitiguen, prevengan y reviertan los daños ambientales, con la ayuda de estas formas de vida.
• La creciente preocupación por la salud pública y el deterioro de la calidad
ambiental ha acelerado el desarrollo de dispositivos de análisis para la
detección de compuestos peligrosos en el aire, agua y suelo.
Introducción
• ADN recombinante: Posibilidades para prevenir contaminación y
biorremediación.
• A la fecha, se están utilizando mOGMs en el tratamiento de
residuos y control de la contaminación (materiales de difícil
degradación).
• Procedimientos de limpieza biológica del ambiente se basan en
el hecho que muchos compuestos químicos orgánicos son
susceptibles de ataques enzimáticos por parte de los
organismos vivos.
– Más claro ejemplo: Uso de enzimas como catalizadores químicos
sustitutos.
• Industrias del cuero, textil y pulpa de papel: Significativa reducción o
eliminación de subproductos químicos agresivos. 1 a 2 g de hemicelulasa
sustituyen a 10-15 kg de cloro para tratar 1 tonelada de pulpa, reduciendo
significativamente el efluente orgánico clorado.
1. BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL
• Término Biotecnología, involucra la aplicación de las ciencias
biológicas y sus interacciones con las tecnologías diseñadas y
utilizadas por el ser humano (Karl Rekey en 1991).
• Hoy, se define:
– Uso de organismos para la obtención de bienes y servicios.
– Cualquier aplicación tecnológica que utiliza sistemas biológicos,
organismos vivos o sus derivados para obtener o modificar
productos de uso específico.
• Tradicionalmente, los microorganismos han sido utilizados para
producir bebidas y alimentos fermentados:
– El ser humano ha usado procesos biotecnológicos (fabricación de
bebidas y pan) y ha seleccionado las razas silvestres de plantas y
animales AC.
• Jugo de uva /vino, leche /yogur, o fermentación
soluciones de malta y lúpulo / cerveza: Dieron origen
a la biotecnología, hace miles de años. Sin embargo:
– Revolución biotecnológica (biotecnología moderna) se
caracteriza por una manipulación genética de
organismos usando técnicas microbiológicas,
bioquímicas y del ADN recombinante. Por tanto, la
Biotecnología:
• Deriva de los conocimientos biológicos del siglo XX.
• Repercute en todos los campos de la Antroposfera:
– Producción de energía, alimentación, farmacia, medicina, química
industrial, minería, urbanismo, gestión ambiental, y bioconservación.
• El empleo de procesos biológicos (naturales), no es una
garantía de inocuidad.
• Biotecnología Ambiental:
– Aplicación de la Biotecnología al estudio del ambiente
natural.
– También implica el aprovechamiento y explotación de los
procesos biológicos con fines comerciales.
– Desarrollo, uso y regulación de sistemas biológicos para:
• Remediación de los ambientes contaminados (suelo, aire, agua) y,
• Procesos ambientalmente “amigables” (tecnologías verdes de
manufactura y desarrollo sustentable).
– Uso óptimo de la naturaleza en la forma de plantas, animales,
bacterias, hongos y algas, para producir energía renovable,
alimento y nutrientes en un ciclo sinérgico e integrado, donde
los residuos de cada proceso se convierten en materia prima
para otros procesos.
• Es aplicada en:
– Resolución (remedio) de problemas ambientales naturales, agrícolas y
antrópicos y en la conservación de la calidad ambiental.
• Cobra especial relevancia en los procesos de producción y en el
tratamiento de la contaminación por deficiente gestión en el manejo de
productos peligrosos o de las acciones intencionadas (actos bélicos,
sabotajes) o fortuitas (accidentes) relacionadas con los mismos.
• Objetivo principal: Adopción de un proceso productivo que haga un uso
óptimo de los RRNN, a través del reciclaje de la biomasa, recuperación
de la energía y minimización de la generación de residuos.
• Rol resolutivo y preventivo de polución ambiental a través:
– Biotratamiento de residuos sólidos, líquidos y gaseosos,
– Biorremediación de ambientes contaminados y
– Biomonitoreo de ambientes y procesos de tratamiento.
• Ventajas del tratamiento biotecnológico de residuos:
– Biodegradación o detoxificación de un amplio espectro de sustancias peligrosas, a través
de microorganismos nativos;
– Disponibilidad de un gran número de métodos para una completa destrucción de residuos
peligrosos y
– Diversidad de condiciones adecuadas para la biodegradación,
• Tasa de degradación o detoxificación de residuos:
– Técnica y económicamente viable,
– Permite tratar considerables volúmenes de residuos
– Los microorganismos nativos que se emplean tienen alta efectividad en la degradación.
• Sin embrago, tipo de biotratamiento debe basarse en sus características fisiológicas :
– Algunos provocan la fermentación anaeróbica,
– Otros muestran respiración anaeróbica (anóxicos),
– Otros son microaerofílicos y
– Otros respiran aeróbicamente.
• El tratamiento biotecnológico de residuos es mejorado:
– Optimizando los factores ambientales,
– Mejorando la disponibilidad de contaminantes y nutrientes
– Utilizando strains selectos.
• Desde los años 60: Ocho mil vertidos de crudo y derivados:
• Por accidentes de extracción/transporte
• Acciones de guerra, que suman 15 Mtm.
Tabla 1.1. Petróleo vertido en el mar, accidentalmente o por sabotajes.

Suceso Año Localización Cantidad (x 103Tm)
Guerra mundial 1940s Costa oriental USA 417
Torrey Canyon 1967 Normadía 120
Urquiola 1976 Galicia 110
Amoco Cadiz 1978 Bretaña 230
Exxon Valdez 1989 Alaska 48
Mar Egeo 1991 Galicia 80
Guerra del Golfo 1991 Golfo Pérsico 840
Erika 1999 Bretaña 30
Prestige 2002 Galicia 77
• Además: Guerra, desarrollo, mala gestión o, simplemente, mala suerte.
Tabla 1.2. Catástrofes ambientales antrópicas

Año Localización Catástrofe
1960s Vietnam Empleo de 60 millones de litros de defoliadores
1976 Seveso Escape de TCDD
1997 Malasia Incendios intencionados de 800 000 ha de selva
1984 Bhopal Filtración de 40 Tm de gases tóxicos
1986 Chernóbil Escape de radiactivo afectando gravemente (más de
5 curios) a 2,5 millones de habitantes
1998 Aznalcóllar Derrame de 4,5 hm3 de lodos con metales pesados
• Aumento de población: > consumo de energía, alimentos y materiales =
aumento de residuos urbanos e industriales (>contaminación)
• Producción mundial de residuos peligrosos = 35 MTm. Año-1 (industria química
y siderúrgica).
• La capacidad de contaminación de un país, podría indicarse mediante la
relación gasto de energía/superficie.
Tabla 1.3. Índice de la capacidad de contaminación

País Energía usada/Superficie (1971)
Hong Kong 2,50
Bélgica 0.56
USA 0.10
España 0.05
URSS 0.01
Argentina 0.005
Mongolia 0.0003
• Contaminantes (óxidos de carbono, nitrógeno y azufre, fosfatos, metales
pesados, petróleo, plaguicidas y elementos radiactivos): Efectos variados en los
sub sistemas terrestres (local y globalmente; a corto y largo plazo).
Tabla 1.4. Contaminantes químicos más corrientes.
Sector Inorgánicos Orgánicos
Aire Agua Suelo Aire Agua Suelo
Agricultura NOx NO3- NO3- CH4 Plaguicidas Plaguicidas
Ciudades O3, Cl2 PO4H2- (SiO)x, EP PAH, VOC, Hollín, PAH, Hollín, PAH, PCDD, PCB
PCB, PCDD, PCDF detergentes,
aceites
Industria COx, EP, H+ EP, ER PAH, VOC, CFC ÁH, VOC PAH, VOC
SO2, NOx
Transporte CO, EP PAH, PAN, Hollín Combustibles PAN
Trat. COx PCDD, PCDF, CH4 PCDF
residuos
EP= Elementos pesados; ER= Elementos radiactivos; PAH= Hidrocarburos aromáticos policíclicos; VOC= Compuestos orgánicos volátiles;
PCDD, PCDF y PCB= Dibenzodioxinas/furanos y Bifenilos poli.clorados; CFC= Compuestos fluorocarbonados; PAN= Nitrato de piroxiacetilo.
• Disminución de la biodiversidad
• Enfermedades
• Eutrofización
• Pérdida de la calidad de vida
BIOSFERA
LITOSFERA
ATMÓSFERA
• Radiactividad
HIDRÓSFERA
• Residuos sólidos
• Erosión
• Polvo, Neblumo
• Lluvia ácida
• Vertidos residuales
• Efecto invernadero
• Escapes
• Debilitación de la capa de ozono
• Ruido • Fusión de hielos
Figura 1.1. Efectos de la contaminación en los subsistemas terrestres

Muchos contaminantes son compuestos xenobióticos: Extraños desde un punto de
vita metabólico, debido fundamentalmente a su corta historia de existencia.
Tabla 1.5. Cronología de las sustancias xenobióticas.

Fecha Acontecimiento
1929 Introducción de los PCB
1938 Introducción del DDT
1940-50 1° generación expuesta postnatalmente
1950-70 1° generación expuesta prenatalmente
1970-90 1° generación expuesta prenatalmente que alcanza la edad reproductiva
• Las sustancias xenobióticas tienen efectos a niveles celular,
orgánico y ecológico:
• Niveles celular y orgánico:
– El metabolismo intenta procesar la sustancia xenobiótica usando
las enzimas disponibles.
• Estas enzimas no han evolucionado para dicho menester.
• Se producen biotransformaciones (oxidaciones, reducciones, hidrólisis) y
conjugaciones que tienden a solubilizar y desactivar las moléculas extrañas
con el objeto de excretarlas (animales) o inmovilizarlas (plantas): Concepto
de Hígado Verde
– Destoxificación,
– Bioactivación del compuesto xenobiótico o
– Sobreproducción de radicales libres del oxígeno (consecuencias desastrosas para el
organismo afectado): Daños moleculares en los antioxidantes naturales
• Algunos compuestos xenobióticos actúan como interruptores hormonales
de los procesos del crecimiento y desarrollo.
• Nivel ecológico: La contaminación conduce a una
regresión (simplificación de las redes tróficas). Ello
implica:
– Aumento de la velocidad de renovación (producción
primaria/biomasa total).
– Aumento de la productividad (biomasa/tiempo) y eficacia
(respiración biomasa total).
– Favorecimiento de los estrategas de la r (especies de
crecimiento rápido).
– Disminución de la biodiversidad, más a consecuencia de la
intensificación del dinamismo trófico que a la reducción del
número de especies residentes a las nuevas condiciones.
– Biomagnificación (elevación de la concentración a medida
que pasa de un nivel a otro).
• Gestión sostenible el medio ambiente = Desarrollo de
nuevas tecnologías :. Biotecnología contribuye al
mantener la biodiversidad mediante el desarrollo de:
– Herramientas para analizar la diversidad, lo que permite
hacer un seguimiento de aparición/desaparición de especies;
– Procesos para conservar los genomas en bancos o
colecciones de organismos vivos o en forma de ADN; y,
– Técnicas de clonación: Útiles para recuperar especies en
peligro de extinción.
– Los procesos de recombinación mediante técnicas de Ing°
Genética incrementan la biodiversidad en la misma medida
que lo hacen los procesos naturales de recombinación
1. LOS MICROORGANISMOS Y LA
• El efecto (-) de contaminantes presentes en toda muestra ambiental es
evaluado usando dispositivos analíticos (organismos vivos o células):
– Después de su exposición, la respuesta biológica se traduce en información sobre la
toxicidad, genotoxicidad, estrogenicidad; etc.
• Esta característica distingue a los métodos biotecnológicos de los empleados por la química
analítica, los cuales:
– Sólo proveen información acerca de la concentración absoluta del compuesto químico,
– No tienen adecuada interpretación de su toxicidad en la biota, en el contexto de la biodisponibilidad,
– Solo proveen información de su toxicidad potencial más no de la actual toxicidad,
– Insensibles para evidenciar la toxicidad combinada de diferentes compuestos (efectos aditivos, sinérgicos o
antagónicos).
– Además, los métodos biotecnológicos detectan:

• Niveles de contaminantes muy por debajo de los límites de los métodos analíticos
• Compuestos que no figuran en la base de datos de los métodos analíticos.
• Sin embargo, para obtener información relevante sobre un determinado riesgo
de contaminación, es inevitable suplementar los datos proporcionados por los
métodos químicos con los resultados de los métodos biotecnológicos.
• Contaminación = Desequilibrio entre entrada (producción) y salida
(descomposición) de los ecosistemas, como consecuencia de una perturbación
del transporte (horizontal) de materia, que no ha sido asimilada por la
evolución:. Es “una obstrucción del retorno”.
– La estrategia para corregirla es la promoción del reciclaje.
– Un papel destacado en él juegan los descomponedores (microorganismos , especialmente
bacterias y hongos).
– Los descomponedores:
• Transforman la materia orgánica en minerales, los cuales son reinyectados en el ecosistema.
• Disponen de equipos enzimáticos desarrollados mediante mecanismos evolutivos
(mutación/selección).
– La frecuencia de mutación es de 10-7 gen-1 x generación-1, lo que significa que un gen
común a todas las bacterias muta 2,5 veces x min-1. Por tanto:
• Las bacterias tienen un potencial biológico impresionante. “estamos en la edad de las bacterias…
Son las triunfadoras en el relato de la vida.
• Ocupan la más amplia gama de ambientes y constituciones bioquímicas que cualquier otro
microorganismo.
• Son adaptables, indestructibles y variadísimas”. Un gramo de suelo de bosque puede contener 4-5
x 103 especies de bacterias.
• La biomasa bacteriana (0,7 – 1,1 x 1015 kg) representa la mitad de la biomasa terrestre.
– Pese a ser del orden de 10-8 % de la masa planetaria (5,97 x 1024 kg), su influencia sobre la
tierra es equiparable a la ejercida por la tectónica, la meteorización y otros procesos
geodinámicos.
Tabla 1.6. Estimación del número de bacterias.

Hábitat N° de células % del total
Subsuelo marino 3,6 x 1030 66
Subsuelo continental 1,4 x 1030 26
Suelo 2,6 x 1029 4,8
Agua marina 1,4 x 1030 2,2
Agua continental 2,3 x 1026 4,3 x 10-3
Organismos eucariotas 5,6 x 1024 1,7 x 10-4
Hielo 4,0 x 1024 7,4 x 10-5
• Las bacterias (Eubacteria y Archaea) cubren todo el espectro metabólico (fermentación

/putrefacción, fotosíntesis anoxigénica y oxigénica y respiración aerobia y anaerobia).
• Esta versatilidad bioquímica les da protagonismo en los ciclos biogeoquímicos, pues la
mayoría de transformaciones químicas necesarias para cerrarlos son de su exclusiva
competencia.
• En el ciclo del
carbono:
– La metilotrofia,
metanogénesis,
homoacetonogé
nesis y algunos
tipos de fijación
de CO2, son
exclusivamente
bacterianos.
• En el ciclo del
nitrógeno:
– Algunos tipos de
respiración anaerobia,
anamox (oxidación
anaeróbica del
amonio) y la mayoría
de la fijación del
dinitrógeno también
son típicamente
bacterianos.
• Otro tanto ocurre en el
ciclo del azufre.
• El potencial
bacteriano natural
se puede
incrementar con
las técnicas de
ingeniería
genética:
– Diseño ad hoc y
construcción de
estirpes capaces
de realizar tareas
concretas.
1. PRINCIPAL BENEFICIO DE LA
BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL:
• Ayuda a mantener un ambiente
seguro y limpio
• Ayuda a evitar el uso de
contaminantes y residuos
peligrosos que afectan a los
RRNN y al ambiente.
• Su aplicación facilita:
– Conversión de residuos en
productos re-usables,
– Detección y prevención de la
emisión de contaminantes,
– Remediación de ambientes
contaminados.
• De este modo, la Biotecnología
Ambiental hace una notoria
contribución al desarrollo
sustentable.
CONTAMINACIÓN QUÍMICA Y BIOLÓGICA
2. CONTAMINACIÓN QUÍMICA Y
BIOLÓGICA
• Época romana: Muerte de saturnismo
(ingestión Pb). Sin embargo, los problemas de
contaminación surgen con la Revolución
Industrial:
– Generación gradual residuos inorgánicos (Pb, Hg),
– Siglo XX comenzó a generarse gran cantidad de
productos orgánicos sintéticos.
• Al principio, las políticas gubernamentales ajenas a esta
problemática, pues se confiaba en la capacidad del medio
ambiente para asimilarlos, o simplemente se desconocían
sus efectos.
BIOLÓGICA
• Con el desarrollo de la Química, Epidemiología y
Toxicología se empezó a comprender sus efectos:
– DDT (diclorodifeniltricloroetano): En 1962 se hizo pública su
presencia en calamares, pingüinos (infertilidad) y tejidos
grasos del hombre (aumento del cáncer).
– Mercurio: El mercurio inorgánico es metilado en los
sedimentos, ingerido por crustáceos, luego llega al humano.
El metilmercurio produce parálisis y pérdidas sensoriales.
– PCB (policlorobifenilos): Usado como insecticida en los años
60 y 70, en las industrias de los refrigerantes, plásticos y en
la producción del papel sin carbono. En el ser humano,
aumenta los abortos y defectos de nacimiento.
• A partir de los años 60se empezó a tener conciencia
colectiva del problema de los contaminantes.
BIOLÓGICA
• Residuos
– Residuo sólido: Objeto inmóvil, sin uso conocido y permanentemente descartado (EPA). Sin
embargo, también existen residuos líquidos altamente tóxicos y además, residuos líquidos
que son almacenados y posteriormente exportados que se convierten en residuos sólidos.
– Residuos tóxicos: Sólidos, lodos, líquidos, o gases envasados que no son radiactivos o
infecciosos y que debido a su actividad química tóxica, explosiva o corrosiva son fuente de
peligro para la salud o medio ambiente, de modo individual o en contacto con otros
residuos.
• Para que un residuo sea considerado como peligroso o tóxico, debe tener
alguna de las siguientes características:
– Corrosión. Residuos altamente ácidos o alcalinos.
– Inflamabilidad. Residuos de fácil combustión que ofrecen riesgo de incendio.
– Reactividad. Residuos dañinos por reacciones súbitas (explosivos).
– Toxicidad. Residuos capaces de desprender concentraciones importantes de sustancias
específicas en el agua.
BIOLÓGICA
• Generación de residuos tóxicos: Actividades industriales, agrícolas, comerciales
o domésticas.
– Residuos industriales:
• Origen muy diverso
• Comprenden:
– Materias primas ya agotadas,
– Material procesado sin uso alguno,
– Material procedente de lodos procesados (tratamientos de aguas residuales, recuperación de otros residuos
tóxicos, etc.)
– Productos químicos comerciales.
– Residuos generados en pequeñas cantidades:
• En este grupo se encuentran:
– Servicios de limpieza en seco,
– Mantenimiento de automóviles,
– Laboratorios fotográficos y
– Laboratorios de análisis.
– Residuos tóxicos generados en el ámbito doméstico:
• Comprende a productos relacionados con:
– Pinturas,
– Productos de limpieza,
– Plaguicidas y
– Compuestos químicos utilizados por un automóvil.
BIOLÓGICA
Clasificaciones
• Según la EPA:
– Residuos de procedencia específica (“K”): generados en procesos concretos d ciertas
actividades industriales (Industrias de plaguicidas, del hierro y acero, tratamiento de
aguas residuales con pentaclorofenol, anilinas, etc.)
– Residuos de procedencia inespecífica (“F”): Generados en la fabricación de compuestos
de uso habitual que posteriormente sufren otras modificaciones (disolventes halogenados
en procesos de desangrado y electroplastía, hidrocarburos alifáticos clorados en limpieza
de reactores).
– Residuos relacionados con productos químicos concretos de índole comercial (“P” y “U”):
estos residuos son considerados tóxicos cuando son descartados en su forma pura, o
bien, son eliminados en contenedores y vertidos.
• Clasificación general:
– Según su forma o fase de distribución (sólidos, liquidos, etc.).
– Residuos orgánicos o inorgánicos.
– Según su categoría química (Disolventes, metales, etc.).
– Según los componentes peligrosos que afecten a su tratamiento.
BIOLÓGICA
Los compuestos orgánicos se pueden clasificar en dos grandes grupos:
• Biogénicos o naturales: Sintetizados por los seres vivos. Son biodegradables.
• Xenobióticos:
– Sintetizados por el hombre.
– Proceden de actividades industriales y tienen estructuras diferentes a los naturales.
– Su toxicidad radica en su gran persistencia en el medio ambiente.
– La mayoría son cancerígenos y,
– Pueden actuar como interferidores hormonales.: Alteran el funcionamiento de los sistemas hormonal y
nervioso de varias maneras:
• Emulando la acción hormonal. E.g.: los compuestos xenoestrógenos (nonil fenoles) emulan la acción del
estradiol.
• Estimulan la síntesis de receptores hormonales y potencian la acción de las hormonas naturales y
sintéticas.
• Bloquean la acción hormonal: Las dioxinas presentan un efecto antiestrogénico, mientras que el DDE
(producto de la descomposición del DDT) y la vincocilina (un fungicida) son antiandrogénicos al competir
con la testosterona.
• Favorecen la degradación de hormonas: Las dioxinas y las policlobifenilos provocan la dismunición de
hormonas masculinas, así como de la insulina, tiroxina y progesterona.
• Favorecen la eliminación de las enzimas que degradan a las hormonas.
• Destruyen directamente a las hormonas.
BIOLÓGICA
Efectos de los interferidores hormonales:
• Reproducción: Los embriones son sensibles a las hormonas.
– Hijos e hijas de madres que toman dietilestilbestrol (DES) tienen problemas de fertilidad.
– Los policlorobifenilos:
• Disminuyen [progesterona ] al favorecer su destrucción en el hígado;
• Están relacionados con la disminución de movilidad y número de espermatozoides.
• Sistema inmune: Delfines muertos por infecciones tienen concentraciones de
policlorobifenilos dos a tres veces superiores.
• Carcinogénesis: Algunos xenobióticos son cancerígenos,
– Los xeno-estrógenos (DDT, policlorobifenilos, dioxinas y atracina, entre otros) promueven la
aparición de tumores.
– En ratas, los estrógenos inducen cáncer de próstata.
– En el periodo 1973 – 1991, la incidencia de cáncer de próstata, en hombres norte
americanos, ha aumentado en 126%.
• Comportamiento: Los embriones resultan especialmente sensibles.
– Monos expuestos a policlorobifenilos disminuyen su capacidad de aprender y sus
embriones, muestran efectos negativos en su coordinación motora
BIOLÓGICA
Tipos de compuestos xenobióticos:
• Organoclorados recalcitrantes: Las dioxinas se producen principalmente en:
– Blanqueo del papel con cloro,
– Producción e incineración de PVC y
– Síntesis de algunos compuestos organoclorados (fenoxiacéticos clorados).
• Los policlorobifenilos:
– Se empezaron a comercializar en 1929 y
– Se usaron en transformadores eléctricos, cosméticos, barnices, tintas y retardantes del fuego.
– La producción se prohibió en muchos países pero el problema persiste en lo acumulado en
transformadores.
• Plaguicidas:
– Herbicidas: Compuestos fenoxiacéticos clorados y la atrazina.
– Insecticidas: El DDT se comenzó a producir en 1938 y se usó a gran escala en todo el mundo. Se dejó de usar en
los países desarrollados en 1972 pero se continúa produciendo en USA (para su exportación) y en los países en
vías de desarrollo.
– Fungicidas: El pentaclorofenol se usa para preservar fibras textiles y madera.
• Alquifenoles: Se usan como detergentes, surfactantes portadores de plaguicidas, ingredientes de
cosméticos, ingredientes activos de espermicidas (nonil-9), antioxidantes y estabilizadores de plásticos
(PVC y poliestireno), ingredientes de pinturas de látex y emulsificantes de grasas y lubricantes.
BIOLÓGICA
Tipos de compuestos xenobióticos:
• Bisfenol A: Es el monómero para la síntesis de resinas epoxi o plásticos de
policarbonato. El monómero puede estar presente por una polimerización
incompleta o porque se rompa el polímero al calentar. También se emplea
en los empastes dentales.
• Ftalatos: Se emplean en la fabricación de plásticos para aumentar su

flexibilidad y en la fabricación de pinturas, tintas y adhesivos. Su
producción es del orden de 4 millones de Tm/año. Algunos de ellos actúan
como interferidores hormonales:
– Dietilhexil ftalato (DEHP): Constituye el 90% del total. Se emplea como
aditivo del PVC usado en prendas de lluvia, botas de jebe, juguetes para
niños, tapones de cerveza, guantes de goma, bolsas de sangre; etc.
– Butilbenzil ftalato (BBP): empleado como plastificante en productos como
cuero sintétito, baldosas, repelentes; etc.
– Dietil ftalato (DEP): Usado como plastificante de películas de acetato de
celulosa, cepillos dentales y juguetes.
BIOLÓGICA
Resistencia a antibióticos
• Primera plaga (peste bubónica): Año 1300. Afectó a 1/3 población Europea.
• Gran avance: Descubrimiento de penicilina (años 50 del siglo pasado). Hoy, se usan otros antibióticos básicos:
Estreptomicina, gentamicina y cloranfenicol. Sin embargo, las enfermedades son c/vez más difíciles o
imposibles de tratar, y causan la muerte:
– Estudio en USA entre los años 1980 y 1992: … más del 58% de las muertes causadas por
enfermedades infecciosas se debe al problema de la resistencia a antibióticos.
• Cada vez que se consume antibióticos, éste destruye a la mayoría de bacterias, pero algunas sobreviven
adquiriendo genes de resistencia de otras bacterias y se reproducen muy rápidamente creando una estirpe
resistente a la droga (Tabla 3.1).
Tabla 3.1. Microorganismos resistentes a antibióticos
Microorganismo Resistencia Enfermedad

Staphylococcus aureus Vancomicina Infecciones de la piel y heridas
Enterococcus Antibióticos básicos Infecciones del tracto urinario y válvulas del
corazón
Streptococcus pneumoniae Penicilinas Neumonía, meningitis, infecciones del oído
Neisseria gonorrea Antibióticos básicos Gonorrea
Salmonella y Escherichia coli Antibióticos básicos Intoxicaciones alimenticias
BIOLÓGICA
• Mayoría de enfermedades infecciosas: Causadas por
virus.
• Los antibióticos son efectivos en infecciones
bacterianas:
– Mayor problema de resistencia a antibióticos radica en
el uso de los mismos para tratar animales y cultivos que
posteriormente son de consumo humano.
• 40% de los 25 millones de kg de antibióticos producidos en USA
se han empleado en tratamiento a pacientes y el resto en
granjas y cultivos.
– 20% se usan para tratar animales enfermos y el resto para prevenir
enfermedades, promover el crecimiento y evitar enfermedades de las
cosechas
– Se han detectado bacterias de los géneros Salmonella, Enterococcus
y E. coli que se han trasmitido de animales a personas.
BIOLÓGICA
• Los mecanismos por los cuales una bacteria se hace resistente a un antibiótico
son desconocidos en detalle, aunque se describen varios procesos.
• La mayoría de microorganismos (Streptomyces) productores de antibióticos
tienen genes de resistencia a éstos los cuales pueden ser transferidos de
diferentes maneras:
– Transformación:
• En determinadas condiciones, una célula se puede hacer competente (receptiva para la
adquisición de ADN exógeno).
• La gonorrea se ha hecho resistente a la penicilina por este mecanismo.
– Transfección: Caso particular de transferencia del ADN procedente de virus.
– Conjugación:
• Requiere el contacto físico entre dos microorganismos.
• Además se necesita en el organismo donador la presencia de:
– Genes tra, encargados de la formación de los pelos sexuales (“pillis”) por donde se transmite el ADN y de
producir cambios en la pared celular; y
– Genes mob, que suelen encontrarse en el ADN a transferir y son requeridos para la movilización del mismo.
• En este proceso se suele intercambiar ADN plásmido.
• La enfermedad causada por Shigella diarrea se trasmite a través de la transferencia por
conjugación de un plásmido pequeño.
BIOLÓGICA
• Existen genes de resistencia a antibióticos que presentan
en sus extremos unas secuencias que codifican
integrasas (enzimas con capacidad para separar los
genes de resistencia del resto del genoma y convertirlos
en material genético funcional y, por lo tanto, transferible
y replicable en el nuevo microorganismo).
• Por otro lado, hay que considerar la capacidad que
presenta un microorganismo para mutar de forma
espontánea.
– Cuando una bacteria está sometida a una presión selectiva:
Presencia en el medio de agentes tóxicos (antibióticos,
insecticidas, pesticidas, agentes virales; etc.).
3. BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL: CAMPOS DE APLICACIÓN
CAMPOS DE APLICACIÓN
• Logro de beneficios económicos, sociales y ambientales: Traducido en el desarrollo de
una sociedad cada día más sostenible (Reporte Brundtland de 1987, Agenda 21 de la
Cumbre de la Tierra de Río de Janeiro de 1992, Reporte de la Cumbre Mundial de
desarrollo Sostenible de Johanesburgo del 2002).
• Llave para una protección y administración ambiental sostenible.
• La necesidad de productos químicos alternativos, materias primas para combustibles y
productos comerciales se ha incrementado significativamente en respuesta a un elevado
precio del petróleo, a políticas de reducción de la dependencia del petróleo internacional
y emisiones de CO2 y otros gases con efecto invernadero.
• Cuatro sub campos de aplicación:
– Biotecnología verde: Más antiguo uso de la biotecnología. Se relaciona con plantas y crecimiento.
– Biotecnología roja: Obtención de compuestos químicos de uso médico o a la defensa del cuerpo
frente a enfermedades;
– Biotecnología blanca: Uso de organismos biológicos para producir o manipular productos de
beneficio industrial;
– Biotecnología azul: Uso acuático de tecnologías biológicas.
• Estos cuatro sub campos de acción caen en tres categorías:
1. Suministros industriales (bioquímicos, enzimas y reactivos para la
industria y procesamiento de alimentos)
2. Energía (combustibles a partir de recursos renovables)
3. Ambiente (diagnóstico de contaminación, productos para la
prevención de contaminación, bioremediación)
• Estas categorías son asistidas por varias disciplinas para la producción
comercial de productos biotecnológicos y prestación de servicios.
• En reconocimiento a su valor estratégico, diversos países han
integrado, formulado y implementado planes biotecnológicos para la
creación de industrias, nuevas fuentes de trabajo y el progreso social.
– A través de la implementación de una legislación para la protección ambiental y puesta en
vigencia de estándares industriales, la Biotecnología Ambiental ha ganado importancia y
fortaleza a partir de la década de los 80.
• Biotecnología Ambiental se relaciona con la aplicación de la biotecnología a la protección ambiental:
– Medio para hacer frente a las desastrosas consecuencias de una rápida industrialización,
urbanización y otras expresiones del desarrollo.
– No es nueva como tecnología, pues algunas de sus áreas de interés son ejemplos de “viejas”
prácticas familiares (compostaje y al tratamiento de residuos).
• La Biotecnología Ambiental ha surgido de la Ingeniería Química. Posteriormente otras disciplinas han
contribuido a su desarrollo (Bioquímica, ingeniería ambiental, microbiología ambiental, biología
molecular, ecología).
• El desarrollo de actividades humanas (industria, transporte, agricultura, construcción), el aumento del
nivel de vida y el consumismo han incrementado tel desecho de material descartable o no-
biodegradable, la contaminación del aire (con CO2, NOx, SO2, gases de efecto invernadero y material
particulado), agua (con contaminantes químicos y bioquímicos, nutrientes, lixiviados, aceites) y suelo
(debido a la liberación de residuos peligrosos, pesticidas).
– Algunos de estos contaminantes pueden ser degradados o removidos a través de microbios, plantas y animales,
bajo condiciones que integren factores bióticos y abióticos para la generación de productos no agresivos al
ambiente a través de la mineralización, transformación o inmovilización.
AIRE
NOx, SO2, CO2C Contaminantes
particulados
Otros gases invernadero
INDUSTRIA
Industria
TRANSPORTE
Transporte DOMÉSTICA
Doméstica
Residuos peligrosos Contaminantes químicos

y biológicos
AGRICULTURA
Agricultura
Derrames de aceite
Fugas de desechos
domésticos
Contaminantes orgánicos
Derrames
persistentes
de aceite
Eutrofización por
Aumento de la actividad del suelo fuentes de N y P
debido a la dispersión masiva
SUELO AGUA
Figura 4.1. Contaminación ambiental por actividades antrópicas (Adaptado de EIBE 2000).
• Actualmente se dispone de tecnologías avanzadas para el tratamiento de los residuos y degradación
de contaminantes con organismos vivos, o para el desarrollo de productos y procesos que generen
energía, liberen menos residuos y preserven a los recursos naturales no renovables:
– El tratamiento mejorado de residuos sólidos y aguas residuales,
– Biorremediación: Limpieza de la contaminación y fitorremediación,
– Aseguramiento de la salud del ambiente a través del biomonitoreo,
– Producción limpia: Elaboración de productos con menos contaminación o menos materia prima,
– Energía a partir de la biomasa,
– Ingeniería genética para la protección y control ambiental.
• Desafortunadamente:
– Algunos contaminantes ambientales además de tóxicos pueden ser acumulados en el ambiente.
– El tratamiento de algunos contaminantes con métodos convencionales (degradación química, incineración,
rellenos sanitarios), puede producir residuos nocivos que determinan una situación más compleja que la inicial.
Factores abióticos (°T,

pH, potencial redox)
Minerales
Mineralización
Microbios
Combustibles fósiles Plantas Transformación

Animales
Xenobióticos Inmovilización
Factores bióticos (Toxicidad,

especificidad, actividad)
Figura 4.2. Fuentes de contaminantes ambientales y factores que influencian su remoción del medio ambiente (Adaptado
de Chen et al 2005).
• Cuatro puntos clave para una intervención biotecnológica ambiental:
– Detectar (usando biosensores y biomonitoreo),
– Prevenir en el proceso de elaboración (sustitución de procesos tradicionales, etapas simples del proceso y
productos con el uso de modernas tecnologías biológicas y génicas en diferentes industrias de alimentos,
farmacéuticas y textiles, así como en la obtención de productos de diagnóstico y textiles),
– Control y remediación,
– Emisión de contaminantes al medio ambiente (a través de la degradación de sustancias nocivas durante el
tratamiento del agua/agua residual, descontaminación del suelo, tratamiento y manejo den residuos sólidos).
• Otras áreas importantes en las que la tecnología ambiental puede contribuir a la reducción de la
contaminación son:
– lProducción de biomoléculas (proteínas, grasas, carbohidratos, lípidos, vitaminas, aminoácidos),
– Mejora del rendimiento de los productos vegetales originales.
– Los propios procesos de producción pueden ayudar, no sólo a reducir los residuos y minimizar la contaminación
dentro de las llamadas tecnologías limpias basadas en cuestiones biológicas involucradas en la reutilización o
reciclaje de los flujos de residuos, sino también a generar fuentes de energía o producir nuevos productos
viables.
Biotecnología ambiental
Prevención de
Proceso de manufactura contaminación / Control de contaminación
Producción limpia
Manejo de residuos
Figura 4.3. Puntos clave de intervención de la Biotecnología ambiental.

• Principal aplicación:
– Biodegradación de la materia orgánica de las aguas residuales municipales
– Biodegradación/detoxificación de sustancias peligrosas presentes en las aguas residuales industriales.
• Aprox. 2/3 de las sustancias peligrosas de un suelo y lodo contaminado con:
– Petróleo,
– Residuos azufrados,
– Residuos de pinturas,
– Solventes orgánicos halogenados,
– Solventes orgánicos no halogenados,
– Desechos galvánicos,
– Lodos de sal,
– Residuos que contienen pesticidas,
– Explosivos, a
– Aguas residuales de la industria química y emisiones de gas,
pueden ser tratados a través de diferentes métodos biotecnológicos.
• Las sustancias orgánicas, sintetizadas en la industria química son de difícil biodegradación.
• Las sustancias que no son de origen natural y que son parcial o lentamente biodegradadas se
denominan xenobióticos:
– La biodegradabilidad de los xenobióticos puede ser caracterizada mediante pruebas de biodegradabilidad como:
• Tasa de formación de CO2 (tasa de mineralización),
• Tasa de consumo de oxígeno (prueba respirométrica),
• Radio de DBO: COD (oxígeno usado por la oxidación biológica o química) y
• Espectro de biodegradación de productos intermedios.
• Otras aplicaciones de la Biotecnología Ambiental:
– Prevención de la contaminación y restauración de la calidad del agua en los reservorios, lagos y ríos, área
costera, acuíferos y agua subterránea
– Tratamiento de agua potable.
• Las áreas de la biotecnología ambiental también incluyen:

– Pruebas de toxicidad y patogenicidad,
– Biosensores y biochips para monitorear la calidad del ambiente,
– Prevención de la producción de residuos peligrosos,
– Desarrollo de materiales biodegradables para sostenibilidad del ambiente,
– Producción de combustibles a partir biomasa y residuos orgánicos, y
– Reducción de la toxicidad a través de la bio inmovilización de sustancia peligrosas.
• Por tanto, la biotecnología puede considerarse como fuerza impulsora de la protección ambiental
integrada mediante la biorremediación ambiental, la minimización de residuos, el bio monitoreo
ambiental y el bio mantenimiento.
Comparación del tratamiento
biotecnológico y otros métodos
• La contaminación del agua, suelo y aire puede ser prevenida/removida por métodos
físicos, químicos, físico-químicos y/o biotecnológicos:.
• Las ventajas del tratamiento biotecnológico :
– Biodegradación o detoxificación de un amplio espectro de sustancias peligrosas con
microorganismos nativos
– Disponibilidad de diversidad de métodos biotecnológicos para una completa
destrucción de residuos peligrosos.
– Diferentes condiciones que resultan adecuadas para los diferentes métodos
biotecnológicos.
• Desventajas de los métodos biotecnológicos :
– Deben añadirse nutrientes y aceptores de electrones
– Deben mantenerse condiciones óptimas para la actividad microbiana.
– Efectos inesperados o negativos de la aplicación de microorganismos: Emisión de
olores o gases tóxicos durante el biotratamiento,
– Presencia o liberación de microorganismos patogénicos, toxigénicos u oportunistas
– Problemas inesperados en el manejo del sistema biotecnológico debido a la
complejidad y alta sensibilidad de los procesos biológicos.
Consideraciones para la aplicación de la
biotecnología en el tratamiento de residuos
1. La tasa de biodegradabilidad o detoxificación de sustancias residuales, es técnica y
económicamente razonable.
2. Tratamiento de grandes volúmenes de residuos.
3. Se prefiere una baja concentración de contaminantes en el agua o residuos.
4. Disponibilidad de microorganismos nativos para la degradación de sustancias peligrosas.
5. Mayor aceptación pública.
• La eficiencia de la aplicación biotecnológica depende de su diseño, optimización del
proceso y minimización de costos.
– Conforme se pasa de un tratamiento de laboratorio a otro de campo, se reportan
muchas fallas debido a la inestabilidad y diversidad, tanto de las propiedades
microbianas como de las condiciones en el sistema de tratamiento.
• En ciertos casos, la combinación de tratamientos biotecnológicos y químicos pueden ser
más eficientes que uno de ellos.
• Un esquema de pretratamiento eficiente, usado antes del tratamiento biotecnológico,
incluye la homogenización en agua de las partículas sólidas o residuos no disueltos, la
oxidación química de los hidrocarbonos en H2O2, ozono o reactivo de Fenton, oxidación
fotoquímica y lavado preliminar de residuos con surfactantes.
Tratamiento aeróbico de residuos
• Los microorganismos aeróbicos requieren oxígeno como aceptor final de los electrones donados por
las sustancias orgánicas e inorgánicas.
• La transferencia de electrones del donante al aceptor es la fuente de la energía biológica disponible.
• Los microorganismos aeróbicos son exitosamente usados para tratar:
– Xenobióticos:
• Hidrocarbonos alifáticos y sus derivados,
• Compuestos alifáticos clorinados (metil-, etil, metileno y etileno cloruros),
• Hidrocarbonos aromáticos y sus derivados (benzeno, tolueno, ftalato, etilbenzeno, xileno y
fenol),
– Hidrocarbonos aromáticos policíclicos,
– Compuestos aromáticos halogenados (clorofenoles, bifenilos policlorinados, dioxinas y sus
derivados, DDt y sus derivados),
– Colorantes AZO,
– Compuestos con grupos nitro (residuos contaminados con explosivos y herbicidas) y
– Residuos organofosfatados.
sólidos: COMPOSTAJE
• Tratamiento aeróbico más simple de residuos sólidos.
• Ventajas:
– Convierte materia orgánica biológicamente inestable en un producto más
estable semejante al humus (acondicionador del suelo o fertilizante
orgánico).
– Previene olores de residuos en descomposición,
– Destrucción de patógenos y parásitos (especialmente en el compostaje
termofílico)
– Retención de nutrientes en los productos finales.
Sistemas de compostaje
• Sistema en hileras :
– La mezcla de residuos orgánicos con agentes de carga (viruta,
hojas, corteza, cascarilla de arroz, etc.):
• Crea una matriz estructuralmente rígida,
• Disminuye la transferencia de calor de la matriz al ambiente,
• Incrementa la temperatura de tratamiento y la tasa de transferencia de oxígeno.
– La mezcla de materia se acumula hasta 1 a 2 m de alto (hileras).
• Las hileras son periódicamente volteadas por medios mecánicos para oxigenar
a la materia orgánica.
• Los microorganismos aeróbicos y parcialmente anaeróbicos, presentes en los
residuos o agregados con un poco de compost antes preparado, crecen en la
materia orgánica.
• Debido a la bio-oxidación y liberación de energía, se eleva la temperatura en la
hilera. Esto es acompañado por cambios sucesivos en la comunidad
microbiana, desde los menos termo-resistentes hasta los más termofílicos.
– Este proceso de compostaje toma de 30 a 60 días.
• Sistema de pilas estáticas:
– Biotratamiento intensivo debido a que la pila de residuos orgánicos
y los agentes de carga son intensivamente aireados utilizando
ventiladores y difusores de aire.
– La pila es usualmente cubierta con compost para remover los
olores y mantener una alta temperatura interna.
– Este sistema típicamente toma 21 días, después de lo cual el
compost es curado por otros 30 días, secado y tamizado para
reciclar el material de carga.
• compostaje en vaso
– Biotransformación más intensiva de residuos orgánicos.
– Se elabora en contenedores parcial o totalmente cerrados dentro
de los cuales se controla el contenido de °H, °T y O2:
• Requiere poco espacio y algunos días de tratamiento, pero tiene
mayores costos que los anteriores.
Tratamientos para intensificar el
compostaje de residuos sólidos
1. Desintegración mecánica y separación o
tamizaje a fin de mejorar la biodisponibilidad
de sustancias.
2. Tratamiento térmico.
3. Lavado de residuos con agua o solución de
surfactantes para disminuir las sustancias
tóxicas en los residuos.
4. Pre-tratamiento químico con H2O2, O3 o
reactivo de Fenton para oxidar y romper los
anillos aromáticos de los hidrocarbonos.
Biorremediación de suelos
• Utilizada en o sobre los sitios de deposición
post-accidental de desechos.
• Las principales opciones de campo son:
1. Biorremediación in situ:
• Tratamiento in situ de un lugar
contaminado
• Es usada cuando la contaminación es
débil, el tiempo de tratamiento no es
limitante y no hay contaminación del
agua subterránea.
1. Biorremediación sobre el sitio:
• Tratamiento de un líquido percolante o gas eliminado utilizando
reactores instalados en la superficie del lugar contaminado.
• Reactores utilizados:
– Bioreactores de tanque de agitación de biomasa en suspensión,
– Biorreactores de flujo continuo,
– Contactores de disco rotativo,
– Reactores de biopelícula fija en lecho montado (biofiltro),
– Reactores de lecho fluidizado,
– Tanques de aireación difundida, b
– Biorreactores de puente aéreo,
– Biorreactores de chorro,
– Biorreactores de membrana y
– Reactores de lecho ascendente.
• Es usada cuando el nivel de contaminación es alto y hay contaminación
secundaria del agua subterránea
1. Biorremediación ex situ:
• Tratamiento del suelo o agua contaminada removida de
un lugar contaminado.
• Es usada cuando:
– Los niveles de contaminación son tan altos que
disminuyen la tasa de biodegradación debido a la
toxicidad de las sustancias o a la reducida tasa de
masas.
– Las condiciones in situ o sobre el sitio (pH, salinidad,
textura densa o alta permeabilidad del suelo, alta
toxicidad de la sustancia, distancia segura del lugar
público) no favorecen la biodegradación.
• Prevención de la dispersión de la sustancia peligrosa del lugar del
accidente hacia el ambiente :
– Creando una barrera física en la vía de migración, con microorganismos
capaces de biotransformar las sustancias peligrosas interceptadas. e.g.
barreras viscosas de polisacárido (limo) en el subsuelo contaminado.
– Creando barreras biogeoquímicas para inmovilizar metales pesados en el
suelo después de los accidentes de contaminación.
• Estas barreras pueden comprender gradientes de concentración de H2S, H2, o Fe+2
creadas por:
– Bacterias anaeróbicas reductoras de sulfatos (en ausencia de oxígeno y presencia de
sulfatos y materia orgánica),
– Bacterias fermentadoras (después de la adición de materia orgánica y en ausencia de
oxígeno), o
– Bacterias reductoras de fierro (en presencia de Fe(III) y materia orgánica), respectivamente.
• Otras bacterias pueden formar una barrera geoquímica para la migración de metales
pesados en el límite de zonas aeróbicas y anaeróbicas. Por ejemplo, las bacterias que
oxidan fierro, oxidan Fe2+ y sus quelatos con ácidos húmicos en su barrera y producen
hidróxidos de fierro que disminuyen la penetración de amonio, fosfato, ácidos
orgánicos, cianidas, fenoles, metales pesados y radionucleidos a través de su
barrera.
líquidos
• Las aguas residuales pueden ser tratadas con los reactores citados en
remediación de suelos
• Los residuos secundarios incluyen aire contaminado y sedimentos
producidos en el bioreactor.
• El agua residual con bajas concentraciones de sustancias peligrosas
puede ser tratada con:
– Carbón activado granular (CAG),
– Reactores de lecho fluidizado
– Co-metabolismo.
• El CAG u otros adsorbentes aseguran la sorción de sustancias
peligrosas hidrofóbicas en su superficie.
– Las biopelículas microbianas también se pueden concentrar en la
superficie de estas partículas y pueden biodegradar sustancias peligrosas
con elevadas tasas comparadas a situaciones cuando tanto el sustrato
como la biomasa microbiana son suspendidos en el agua residual.
líquidos
• Co-metabolismo:
– Biodegradación simultánea de sustancias orgánicas peligrosas (las cuales
no son usadas como fuente de energía) y sustratos estereoquímicamente
similares, los cuales sirven como fuentes de carbono y energía para las
células microbianas.
– La bio-oxidación de sustancias peligrosas es realizada por enzimas
microbianas debido a la similaridad estereoquímica entre la sustancia
peligrosa y el sustrato.
• Mejor aplicación del co-metabolismo es la degradación/detoxificación
de clorometanos, cloroetanos, clorometileno y cloroetileno por sistemas
enzimáticos de bacterias para la oxidación de metano o amoníaco
como fuente principal de energía.
– En la práctica, la biorremediación es lograda añadiendo metano o amonio,
oxígeno (aire) y biomasa de bacterias metanotróficas o nitrificantes al suelo
y agua subterránea contaminada por sustancias clorinadas tóxicas.
líquidos
Pre-tratamientos para intensificar la biorremediación de líquidos
residuales:
1. Desintegración mecánica/suspensión de partículas y
sustancias hidrofóbicas para mejorar la superficie de reacción
en la suspensión e incrementar la tasa de biodegradación.
2. Eliminación de aguas residuales o concentración de sustancias
peligrosas por sedimentación, centrifugación, filtración,
flotación, adsorción, extracción, intercambio iónico,
evaporación, destilación, congelado y separación.
3. Oxidación preliminar con H2O2, ozono, reactivo de Fenton para
producir radicales activos de oxígeno; foto-oxidación preliminar
con UV y oxidación electroquímica de sustancias peligrosas.
gaseosos
Incluye bio-remoción de:
• Solventes orgánicos biodegradables,
• Olores y gases tóxicos: Sulfuro de hidrógeno y otros gases que contienen azufre,
• Aire de ventilación en la industria y agricultura.
• Xenobióticos gaseosos:
– Cloroformo, Tricloroetileno, 1,2-dibromoetano,
– 1,2-dibromo-3-cloropropano, Tetracloruro de carbono, Xilenos,
– Dibromocloropropano, Tolueno, Metano,
– Cloruro de metileno, 1,1-dicloroeteno,
– Bis(2-cloroetil) éter, 1,2-dicloroetano, Cloro, 1,1-tricloroetano,
– Etilbenzeno, 1,1,2,2-tetracloroetano, Bromo,
– Metilmercurio, Triclorofluoroetano, 1,1-dicloroetano,
– 1,1,2-tricloroetano, Amonio, Tricloroetano,
– 1,2-dicloroetano, Disulfuro de carbono, Cloroetano,
– p-xileno, Sulfuro de hidrógeno, Clorometano,
– 2-butanona, Bromoformo, Acroleína,
– Bromodicloroetano, Dióxido de nitrógeno, Ozono,
– Formaldehído, Clorodibromoetano, Etil éter
– 1,2-dicloropropano.
gaseosos
• El aire de ventilación industrial conteniendo formaldehído, amonio, y otras
sustancias de bajo peso molecular también pueden ser efectivamente tratados
en un biofiltro o biodepurador.
• Biofiltros embalados con soportes cubiertos con biopelículas de
microorganismos degradantes.
– Las biopelículas pueden ser sustratos porosos baratos (turba, viruta, compost) o portadores
artificiales regulares como anillos de plástico o metal, cilindros porosos y redes de fibra.
– Los contenidos de los biodepuradores deben ser agitados para asegurar una alta transferencia
de masa entre el gas y la suspensión microbiana.
– El líquido que ha interactuado con el gas contaminado es colectado en la base del biofiltro y
reciclado en su parte superior para asegurar un adecuado contacto del gas contaminado y el
líquido y una óptima humedad del biofiltro.
• Biodepuradores contienen suspensiones de microorganismos biodegradadores
• Adición contínua de nutrientes y agua fresca al biodepurador o biofiltro: Usar
agua fresca para reemplazar el agua evaporada del bioreactor.
– Si la tasa de transferencia de masa es más alta que la tasa de biodegradación, los
contaminantes absorbidos deben ser degradados en un bioreactor suspendido adicional o
biofiltro conectado en serie con el biodepurador o biofiltro absorbente.
Tratamiento anaeróbico de residuos
• Microorganismos:
– Anaeróbicos (viven sin oxígeno),
– Anaeróbicos facultativos (viven en condiciones anaeróbicas o aeróbicas),
– Microaerofílicos (prefieren vivir bajo en concentraciones bajas de oxígeno disuelto) y
– Aeróbicos obligados (viven en presencia de oxígeno).
• Algunos microorganismos anaeróbicos, denominados anaeróbicos tolerantes,
tienen mecanismos que los protegen de la exposición al oxígeno.
• Otros llamados anaeróbicos obligados, no tienen estos mecanismos y pueden
morir después de varios segundos de exposición a condiciones aeróbicas.
– Los anaeróbicos obligados producen energía de:
(a) fermentación (destrucción de sustancias orgánicas sin un aceptor externo de electrones);
(b) respiración anaeróbica utilizando receptores de electrones como CO2, NO3-, NO2-, Fe3+, SO42-;
(c) fotosíntesis anoxigénica (H2S S) u oxigénica (H2O O2).
• Ventaja:
– No hay que suministrar oxígeno al sistema de tratamiento: Útil en el caso de remediación
de un suelo arcilloso o residuos orgánicos de alta resistencia.
• Desventaja:
– Más lento que el aeróbico
– Puede haber producciones significativas de productos orgánicos disueltos.
• Secuencia de procesos respiratorios de acuerdo con el aumento
de la eficiencia energética de la biodegradación (por mol de
electrones transferidos):
– Fermentación Respiración de CO2 (fermentación metanogénica)
Reducción disimilativa del sulfato Reducción disimilativa del
hierro (respiración del hierro) Respiración del nitrato
(denitrificación) Respiración aeróbica.
• Los anaerobios facultativos pueden producir energía de estas
reacciones o de la oxidación aeróbica de la materia orgánica y
pueden ser útiles cuando se integran con los microorganismos
aeróbicos y anaeróbicos en agregados microbianos.
• La respiración anaeróbica es más efectiva en términos de
producción de energía por mol de electrones transportados, que
la fermentación.
• La respiración anaeróbica puede ser realizada por diferengtes grupos de procariotas con los
siguientes aceptores de electrones: NO3-, NO2-, Fe3+, SO42- y CO2.
– Si la concentración de uno de estos aceptores en el residuo peligroso, es suficiente para la respiración
anaeróbica y la oxidación de contaminantes, la actividad de los grupos bacterianos relacionados puede
ser usada para el tratamiento.
• Los procariotas respiradores de CO2 (metanógenos) son usados para la degradación
metanogénica de los residuos orgánicos peligrosos.
• Las bacterias reductoras de sulfatos pueden ser usadas para la degradación anaeróbica de la
materia orgánica o para la precipitación/inmovilización de metales pesados de los residuos
peligrosos que contienen sulfatos.
• Las bacterias reductoras de hierro pueden producir iones disueltos de Fe2+ a partir de
minerales insolubles de Fe(III).
– La degradación anaeróbica de la materia orgánica y detoxificación de residuos peligrosos puede ser
significativamente mejorada como resultado de la precipitación de compuestos orgánicos tóxicos,
ácidos, fenoles o cianidas, por efecto del Fe(II).
• Las bacterias respiradoras de nitrato pueden ser usadas en la denitrificación, i.e. reducción del
nitrato a N2 gaseoso.
– El nitrato puede adicionarse a los residuos peligrosos para iniciar la biodegradación de diferentes tipos
de sustancias orgánicas, por ejemplo, hidrocarbonos aromáticos policíclicos.
– Los nitro-grupos de sustancias peligrosas pueden ser reducidas, a amidas, de una manera similar.
• Las bacterias de fermentación anaeróbica (Clostridium) cumplen dos
funciones en la biodegradación de compuestos orgánicos peligrosos:
(a) Hidrolizan diferentes polímeros naturales,
(b) Fermentan monómeros con la producción de alcoholes, ácidos orgánicos
y CO2).
• Muchas sustancias peligrosas (solventes clorinados, ftalatos, fenoles,
etilenglicol y polietilen glicoles), pueden ser degradados por los
microorganismos anaeróbicos.
• Las bacterias fermentadoras cumplen la declorinación anaeróbica
reductiva y por lo tanto, mejoran aún más la biodegradación de
xenobióticos.
• Diferentes sistemas biotecnológicos se usan en el tratamiento
anaeróbico del agua residual:
– Biotratamiento a través de microorganismos suspendidos,
– Biofiltración anaeróbica y
– Biotratamiento en reactores anaerobios de lodos de flujo ascendente
• Los residuos orgánicos e inorgánicos pueden ser lentamente
transformados por los microorganismos anaeróbicos en
vertederos.
– La materia orgánica es hidrolizada por bacterias y hongos.
– Los aminoácidos son degradados usando la amonificación con la
formación de aminas orgánicas tóxicas y amonio.
– Los aminoácidos, nucleótidos y carbohidratos son fermentados o
anaeróbicamente oxidados con la formación de ácidos orgánicos,
CO2 y CH4.
– Los xenobióticos y metales pesados pueden ser reducidos y
subsecuentemente disueltos o inmovilizados.
• Estos procesos pueden resultar en la formación de lixiviados
tóxicos de vertedero, los cuales pueden ser detoxificados a
través de un tratamiento biotecnológico aeróbico para oxidar los
compuestos orgánicos tóxicos e inmovilizar los metales pesados
disueltos.
• Un tratamiento combinado anaeróbico/aeróbico puede ser más efectico que
cualquiera de ellos por separado:
– Uso de lagunas de estabilización aireadas, lagunas aireadas y no aireadas y sistemas de
humedales naturales y artificiales.
• El tratamiento aeróbico ocurre en la parte superior de estos sistemas y el tratamiento anaeróbico
ocurre en la base del mismo.
• La típica carga orgánica es de 0.01 kg DBO/m3 día
• El tiempo de retención varía de unos días a 100 días.
– Una forma más intensiva de biodegradación puede lograrse combinando reactores
aeróbicos y anaeróbicos con condiciones controladas o integrando zonas aeróbicas y
anaeróbicas dentro de un solo reactor.
• La combinación o alteración de los tratamientos aeróbicos y anaeróbicos es útil
bajo las siguientes condiciones:
1. Biodegradación de hidrocarbonos aromáticos clorinados incluyendo declorinación y
escisión aeróbica del anillo.
2. Remoción secuencial del nitrógeno incluyendo nitrificación aeróbica y denitrificación
anaeróbica.
3. Reducción del sulfato o Fe(III) con la producción de H2S o Fe(II) los cuales son activos
reactivos para la precipitación de metales pesados, ácidos orgánicos y nutrientes.
Tratamiento de residuos
conteniendo metales pesados
• Los residuos sólidos y líquidos que contienen metales pesados pueden ser
exitosamente reducidos u oxidados por enzimas específicas de los
microorganismos.
– El metabolismo microbiano genera H, O2, H2O2 los cuales, conjuntamente con metabolitos
intermedios (ácidos orgánicos de la fermentación u ácidos inorgánicos como el nítrico y
sulfúrico de la oxidación aeróbica), pueden ser utilizados en la oxidación/reducción,
procesos que son acompañados por la solubilización o precipitación de los metales.
• La producción microbiana de fosfato, H2S y CO2, estimula la precipitación de

fosfatos no disueltos, carbonatos y sulfuros de metales pesados como el
arsénico, cadmio, cromo, cobre, plomo, mercurio y níquel
• La producción de H2S, por las bacterias reductoras de sulfatos, es útil para
remover metales pesados y radionucleidos de las aguas de drenaje minero
conteniendo sulfatos, residuos líquidos de estaciones nucleares, drenajes de
lagunas de las plantas metalúrgicas, viruta o aserrín.
• Los ácidos orgánicos producidos durante la fermentación anaeróbica de la
celulosa, pueden ser usados como una fuente de carbono reducido para la
reducción de sulfatos y posterior precipitación de metales.
Tratamiento de residuos
conteniendo metales pesados
• La superficie de las células microbianas están recubiertas de grupos carboxílicos y fosfatos
negativamente cargados y aminoácidos positivamente cargados:
– Dependiendo del pH, puede haber una significativa adsorción de metales pesados a la superficie
microbiana.
• Por ejemplo, la biosorción por parte de los residuos de fermentación de los hongos es usada para acumular uranio y
otros radionucleidos de los flujos de residuos.
• Los minerales conteniendo metales (e.g. sulfuros), pueden ser oxidados y los metales,
solubilizados. Este enfoque es utilizado para la biolixiviación de metales pesados de los lodos
de depuradora antes de su depósito en vertederos o biotransformación.
• Algunos metales como el As y Hg pueden ser volatilizados por metilación debido a la actividad
de microorganismos anaeróbicos.
– El As puede ser metilado por la Archaea metanogénica y hongos, transformándose en compuestos
tóxicos y volátiles como la dimetilarsina y trimetilarsina o puede ser convertido por las algas, en tóxicos
no volátiles como los ácidos metanoarsónico y demetilarsínico.
– Los organoestánidos hidrofóbicos son tóxicos para los organismos, sin embargo muchos
microorganismos son resistentes y pueden degradar la parte orgánicas de estas moléculas.
Mejoramiento del tratamiento
biotecnológico de residuos
• Varios factores clave son críticos para una
exitosa aplicación de la biotecnología al
tratamiento de residuos peligrosos:
– Factores ambientales: debe optimizarse el pH,
temperatura, concentración de oxígeno disuelto.
– Contaminantes y nutrientes deben estar disponibles
para la acción o asimilación microbiana.
– El contenido y actividad de los microorganismos
esenciales en el residuo a tratar debe ser la
adecuada.
• Mantener°T óptima para el crecimiento microbiano, de 10 a 90°C.
– El calentamiento de los residuos en tratamiento es consecuencia de la oxidación microbiana o
actividades fermentativas. Esto provee una aislamiento térmico del residuo respecto a un
entorno frío. El agente de carga añadido a los residuos sólidos también es un aislante térmico.
• El pH de los biotipos nativos o naturales varía de 1 a 11:
– Los suelos volcánicos y drenajes de mina tienen valores de pH de 1 a 3;
– los extractos de plantas y suelos ácidos tienen pHs de 3 a 5;
– el agua fresca y agua de mar tienen un pH de 7 a 8;
– los suelos alcalinos y lagos, soluciones de amonio y orgánicos podridos tienen pHs de 9 a 11.
• Muchos microbios crecen eficientemente en pHs de 5 a 9 y se llaman
neutrófilos.
• Las especies adaptadas a valores de pH menor a 4, se llaman acidófilos;
• y los que se han adaptado a valores de pH superiores a 9 se llaman alcalífilos.
• El pH del medio de tratamiento debe mantenerse en el valor óptimo, según sea
el tipo de microorganismo.:
– Agregar buffer o regulador de pH con los siguientes propósitos:
1. Controlar la formación de ácidos orgánicos en la fermentación;
2. Prevenir la formación de ácidos inorgánicos en la oxidación aeróbica del amonio, azufre elemental,
sulfuro de hidrógeno o sulfuro de metales;
3. Asimilación del amonio, nitrato o nitrato de amonio lo que conduce a una disminución del pH,
aumento de pH o pH neutro, respectivamente;
4. Buffers como CaCO3 o Fe(OH)3 pueden usarse en gran escala para el tratamiento de residuos;
5. Soluciones de KOH, NaOH, NH4OH, Ca(OH)2, HCl o H2SO4, pueden añadirse para mantener el pH
del líquido en el reactor en agitación.
• Los principales elementos encontrados en las células microbianas son C, H, O, N, S y P. Una

composición aproximada corresponde a la fórmula CH1.8O0.5N0.2.:
– Si el residuo no contiene esta cantidad de elementos, puede ser necesaria una enmienda de nutrientes
con amonio, fosfato y sulfato.
– Otros macronutrientes (K, Mg, Na, Ca y Fe) y micronutrientes (Cr, Co, Cu, Mn, Mo, Ni, Se y Zn), en forma
de sales o quelatos, también son esenciales para el crecimiento microbiano y actividades enzimáticas.
– En algunos casos, también pueden agregarse ciertos factores del crecimiento como vitaminas,
aminoácidos y nucleótidos.
– Estos agregados son importantes cuando se usan microorganismos auxotróficos, los cuales son
comensales o parásitos de plantas y animales pero tienen la habilidad única de degradar xenobióticos.
• Las sustancias pueden estar protegidas del ataque microbiano por barreras físicas o químicas,
Las que deben ser mecánica o químicamente destruidas para formar partículas finas o
suspensiones de residuos a fin de aumentar la superficie de contacto para los
microorganismos y facilitar la biodegradación.
• Aun cuando su costo es elevado, la aplicación de enzimas puede ser justificable en

determinadas situaciones. Los residuos organofosfatados pueden ser tratados con la enzima
parathion hidrogenasa producida y excretada por el strain recombinado Streptomyces lividans.
Las futuras aplicaciones pueden involucrar a la citocromo-P450- oxigenasa dependiente, capaz
de oxidar a diferentes xenobióticos.
• Las bajas concentraciones de oxígeno disuelto (0.01 a 10 mg/L) pueden ser rápidamente
agotadas durante el tratamiento de residuos, proceso que tiene una tasa de consumo que varía
de 10 a 2,000 g O2/L.h.:
– Realizar aplicación contínua de oxígeno al sistema.
– El suministro de aire en los sistemas de tratamiento de residuos líquidos se logra con aireación y
agitación mecánica.
– El burbujeo de aire in situ es una práctica común en biorremediación de aguas subterráneas y suelos
saturados.
– En ciertos casos se usa el peróxido de hidrógeno como una fuente de oxígeno; sin embargo, debido a su
interacción con determinados constituyentes de los acuíferos, el H2O2 se descompone rápidamente.
• El pre tratamiento del agua con O3, H2O2, con TiO2 catalizada UV-fotooxidación
y oxidación electroquímica puede mejora la biodegradación de orgánicos
halogenados, colorantes textiles, efluentes de fábricas de pulpa, aguas
residuales de curtiembre y fábricas de aceite de oliva, aguas residuales
contaminadas con surfactantes y residuos farmacéuticos. También disminuye
la toxicidad de los lixiviados de vertederos municipales.
• Los aceptores disueltos de electrones como NO3-, NO2-, Fe3+, SO42- y HCO3-
pueden insertarse en el sistema de tratamiento, cuando las tasas de
transferencia de oxigeno son bajas.
– El NO3 es usado por muchos microorganismos, sin embargo tiene alto costo y si no se
tiene el cuidado necesario, puede contaminar al ambiente.
– El Fe3+ es “amigable”, disponible en los minerales de arcilla, magnetita, goetita, limonita,
pero sus compuestos son usualmente insolubles y disminuyen la tasa de oxidación en
comparación con aceptores disueltos.
– El sulfato y carbonato son apropiados solo para ambientes anaeróbicos, donde las
oxidaciones anóxicas pueden generar tóxicos mal olientes como el H2S o CH4, un gas con
efecto invernadero.
• La adición de microorganismos para iniciar o
acelerar el proceso de biotratamiento es razonable:
– Si los microorganismos necesarios para el
biotratamiento están ausentes o en bajas
concentraciones en el residuo.
– La tasa de biorremediación de los microorganismos
nativos no es suficiente para alcanzar el objetivo en el
tiempo previsto.
– Si el periodo de aclimatación es muy prolongado.
– Para una mejor dirección del biotratamiento.
– Para prevenir el crecimiento o dispersión en el
tratamiento de strains microbianos no deseados, tales
como los patogénicos u oportunistas.
• Los microorganismos adecuados para el biotratamiento de residuos
pueden ser aislados del medio ambiente natural; sin embargo, su
habilidad para la biodegradación puede ser modificada y amplificada a
través de alteraciones específicas de sus propiedades genéticas.
– Las técnicas de ADN recombinante pueden crear nuevas combinaciones de
genes e incrementar el número de genes deseados en las células.
Comprende las siguientes etapas:
1. El ADN es extraído de las células y cortado en pequeñas secuencias por enzimas
específicas.
2. Las pequeñas secuencias de ADN son introducidas en vectores de ADN.
3. El vector (virus o plásmido) es transferido a la célula objetivo y autorreplicado para
producir múltiples copias de los genes introducidos.
4. Las células objetivo con los nuevos genes adquiridos son seleccionados en base a su
actividad (e.g. producción de enzimas, capacidad de degradación) y estabilidad de
los genes adquiridos.
• La ingeniería genética de strains microbianos puede crear (transferir) la

habilidad para degradar xenobióticos o amplificar esta habilidad a
través de la amplificación de genes relacionados.
Biosensores
• Una importante aplicación de la biotecnología ambiental es el
biomonitoreo de:
– Biodegradabilidad,
– Toxicidad,
– Mutagenicidad,
– Concentración de sustancias peligrosas y
– Monitoreo de la concentración y patogenicidad de los microorganismos en
los residuos y el ambiente.
• Las pruebas de biodegradabilidad se realizan midiendo la producción
de CO2 o CH4, o el consumo de O2.
• Los biosensores pueden utilizar ya sea células bacterianas completas o
enzimas para detectar moléculas específicas de sustancias peligrosas.
• La toxicidad puede ser monitoreada por sensores de células
bacterianas completas cuya bioluminiscencia puede ser inhibida por la
presencia de una sustancia peligrosa.

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BIOTECNOLOGÍA AMBIENTAL

Berardo Escalante Zumaeta

Figura 1. Aplicaciones de la Biotecnología en las actividades antrópicas (Industria, agricultura,

Tabla 1.1. Petróleo vertido en el mar, accidentalmente o por sabotajes.

Tabla 1.2. Catástrofes ambientales antrópicas

Tabla 1.3. Índice de la capacidad de contaminación

Agricultura NOx NO3- NO3- CH4 Plaguicidas Plaguicidas

Figura 1.1. Efectos de la contaminación en los subsistemas terrestres

Tabla 1.5. Cronología de las sustancias xenobióticas.

– Además, los métodos biotecnológicos detectan:

Tabla 1.6. Estimación del número de bacterias.

• Las bacterias (Eubacteria y Archaea) cubren todo el espectro metabólico (fermentación

• Ftalatos: Se emplean en la fabricación de plásticos para aumentar su

Tabla 3.1. Microorganismos resistentes a antibióticos

Microorganismo Resistencia Enfermedad

Otros gases invernadero

Residuos peligrosos Contaminantes químicos

Factores abióticos (°T,

Combustibles fósiles Plantas Transformación

Factores bióticos (Toxicidad,

Figura 4.3. Puntos clave de intervención de la Biotecnología ambiental.

• Las áreas de la biotecnología ambiental también incluyen:

• La producción microbiana de fosfato, H2S y CO2, estimula la precipitación de

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