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REACTIFS BIOLABO AST/TGO

www.biolabo.fr
(IFCC) Monoréactif
FABRICANT :
Réactif pour le dosage quantitatif de l’activité aspartate amino transférase
BIOLABO SA,
(AST) [EC 2.6.1.1] dans le sérum ou le plasma humains
02160, Maizy, France

REF 80025 R1 20 X 10 mL REF 80125 R1 8 x 30 mL


CODE CNQ : SB
REF 80225 R1 10 x 125 mL REF 80325 R1 6 x 200 mL

SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES

|
Tel : (33) 03 23 25 15 50
USAGE IN VITRO
Fax : (33) 03 23 256 256

INTERET CLINIQUE (1) (2) PREPARATION DES REACTIFS


L’AST est répendue dans tous les tissus du corps, mais la plus forte Ajouter sans délai au contenu du flacon la quantité d'eau déminéralisée
activité est mesurée dans le foie, le cœur, les muscles squelettiques et indiquée sur l'étiquette.
dans les érythrocytes. Dans la peau, les reins et le pancréas, on mesure Agiter doucement jusqu'à complète dissolution avant d’utiliser le réactif
une activité plus faible. Bien que l’activité de l’AST et de l’ALT dans le (environ 2 minutes).
sérum soient augmentée dans tous les cas où l’intégrité des cellules
REF 80025 : Utiliser un objet non coupant pour enlever la capsule.
hépatiques est atteinte (hépatite virale, nécrose hépatique, cirrhose),
une augmentation de l’activité AST dans le sérum ou le plasma apparaît
après un infarctus du myocarde dans 97% des cas. Une activité AST STABILITE ET CONSERVATION
élevée (et occasionnellement ALT) peut être rencontrée dans des cas de Stocker à 2-8°C, à l’abri de la lumière.
dystrophie musculaire progressive, embolie pulmonaire, pancréatite
• Avant ouverture :
aïgue…
Le réactif est stable jusqu'à la date de péremption indiquée sur
l’étiquette.
PRINCIPE (4) (5) • Après ouverture :
Méthode développée par Karmen et Al., et optimisée par Henry et Al. Le réactif de travail est stable au moins 60 jours en l’absence de
(conforme aux recommandations de l’IFCC). contamination.
Le schéma réactionnel est le suivant : Ne pas utiliser le réactif s’il est trouble ou si l’absorbance mesurée à
340 nm < 1,000.
AST
L-Aspartate + 2-Oxoglutarate Oxaloacétate + L-Glutamate Ce coffret peut voyager au moins 1 semaine à température ambiante.
MDH
Oxaloacétate + NADH + H+ L-Malate + NAD+ PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (2)
La diminution de l’absorbance due à la conversion du NADH en NAD+, Sérum ou plasma hépariné, non hémolysés.
et proportionnelle à l’activité AST dans le spécimen, est mesurée à
340 nm. L’AST est stable dans le sérum ou le plasma :
L’absence de P5P contribue à une forte amélioration de la stabilité du • 24 heures à température ambiante
réactif reconstitué. • 28 jours à 2-8°C
• au moins un an à –20°C.
L’ajout de pyridoxal phosphate (0,1 mM) permet de porter à 7 jours la
REACTIFS
stabilité à température ambiante.
Flacon R1 REACTIF DE TRAVAIL
INTERFERENCES (3) (6)60
EDTA 5 mmol/L
2-Oxoglutarate 12 mmol/L Hémoglobine : Interférence positive à partir de 150 Omol/L.
L-Aspartate 200 mmol/L Hémolyse : Interférence positive due à l’AST contenue dans les
MDH 495 Ul/L érythrocytes.
LDH 820 Ul/L Turbidité : Pas d’interférence.
NADH < 0,18 mmol/L Bilirubine totale : Interférence négative à partir de 200 mg/L.
Tampon Tris 80 mmol/L La LDH contenue dans le réactif permet, pendant la phase de
pH à 30°C 7,80 + 0.1 préincubation, de réduire le pyruvate endogène qui sinon produirait une
Conservateur interférence positive.
De même, l’oxaloacétate, produit de la réaction, peut être décarboxylé
PRECAUTIONS pour former du pyruvate. Celui ci sera lui aussi consommé par la LDH
présente dans le réactif et n’interfèrera pas avec le dosage.
Les réactifs BIOLABO sont destinés à du personnel qualifié, pour un
usage in vitro. Utiliser des équipements de protection (blouse, gants, Young D.S. a publié une liste des substances interférant avec le dosage.
lunettes).
• Ne pas pipetter avec la bouche. REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment à
1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales.
l’eau et consulter un médecin.
2. Sérums de contrôle normaux et pathologiques.
• Les réactifs contiennent de l’azide de sodium (concentration < 0,1%)
3. Eau déminéralisée pour la reconstitution du réactif.
qui peut réagir avec les métaux tels que le cuivre ou le plomb des
canalisations. Rincer abondamment.
• La fiche de données de sécurité peut être obtenue sur simple
demande.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen comme potentiellement Version : FT 80025 08 04 2005
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
CALIBRATION MODE OPERATOIRE (TECHNIQUE MANUELLE)
La validité des résultats dépend de l’exactitude de la calibration de Ramener les réactifs et spécimens à température ambiante.
l’instrument, du juste décompte du temps, du respect du rapport volume
réactif / volume spécimen et du contrôle de la température. Introduire dans une cuve de lecture de 1 cm de trajet optique :
Il est recommandé d’utiliser le facteur théorique ou d’utiliser un
Réactif 1 mL
multicalibrateur sérique enzymatique raccordé sur une solution ou une
méthode de référence (§ CALCUL). Laisser la température s'équilibrer à 37°C (30°C) puis ajouter :

Spécimen 100 OL
CONTRÔLE DE QUALITE CODE CNQ : SB
• BIOLABO EXATROL-N (valeurs normales) REF 95010. Mélanger. Après 1 minute, lire l'absorbance initiale à 340 nm puis toutes les
minutes pendant 3 minutes.
• BIOLABO EXATROL-P (valeurs pathologiques) REF 95011.
Calculer la moyenne des variations d'absorbance par minute ( Abs/min).
• Tout autre sérum de contrôle titré pour cette méthode.
• Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants : Remarques : Des procédures spécifiques sont disponibles pour les
• Au moins un contrôle par série. analyseurs automatiques. Contacter le service technique BIOLABO.
• Au moins un contrôle par 24 heures.
• Changement de flacon de réactif.
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
CALCUL
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de Le résultat est déterminé d’après la formule suivante :
confiance indiquées, appliquer les actions suivantes :
1. Répéter l’opération en utilisant le même contrôle. Avec facteur théorique :
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, préparer un sérum
de contrôle fraichement reconstitué et répéter le test.
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, vérifier les Ul/L = ( Abs/min) x 1746
paramètres de l’analyse : longueur d’onde, température, volume
spécimen/volume réactif, temps de mesure et facteur de UI/L
EKat/L =
calibration. 60
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre
flacon de réactif et répéter le test. Avec multicalibrateur sérique :
5. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le
service technique BIOLABO ou le revendeur local.
( Abs/min) Dosage
Activité AST = x Concentration du Calibrant
( Abs/min) Calibrant
INTERVALLES DE REFERENCE (1) (2)
UI/L à 30°C à 37°C REFERENCES
(1) TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R. Ashwood,
Nouveau né 25-75 39-117 W.B. Saunders (1999) p. 652-656
rd
Enfant 15-60 23-94 (2) Clinical Guide to Laboratory Test, 3 Ed., N.W. TIETZ (1995) p. 76-79.
th
(3) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4 Ed. (1995)
Adulte 8-20 13-31 p. 3-68 to 3-79
(4) HENRY R. J. et al., Am J clin Path (1960), 34, 381-398
Il est recommandé à chaque laboratoire de définir ses propres valeurs (5) IFCC Method for L-Aspartate aminotransferase. J Clin. Chem. Clin.
Biochem.(1986), 24, p.497-510.
de référence pour la population concernée.
(6) M. MATHIEU et col. SFBC. Comité de Standardisation. Recommandations
pour la mesure de l'activité catalytique de l'Aspartate aminotransférase dans le
sérum à 30°C. Ann. Biol. Clin. 1976. 34. 291-297
PERFORMANCES
Intra-série Taux Taux élevé Inter-série Taux Taux élevé Made in France
N = 30 normal N = 33 normal
Moyenne UI/L 31,6 161,1 Moyenne UI/L 34,4 179,3 Version : FT 80025 08 04 2005
S.D. UI/L 1,22 3,06 S.D.UI/L 0,58 2,62

C.V. % 3,85 1,90 C.V. % 1,69 1,46

Limite de détection : environ 3 UI/L.


Sensibilité pour 17 UI/L : environ 0,010 Abs/min à 340 nm.
Comparaison avec réactif du commerce :
y = 1,0265 x + 0,9906 r = 0,9983

LIMITE DE LINEARITE
La réaction est linéaire jusqu’à 350 UI/L.
Si Abs/min > 0,200, diminuer le volume spécimen ou diluer le
spécimen avec NaCl 9 g/L en tenant compte du facteur de dilution dans
le calcul du résultat. La limite de linéarité dépend du rapport de dilution
spécimen/réactif.

Fabricant Date de péremption IVD Usage »in vitro« Température de conservation REF Référence du produit Consulter la notice LOT Numéro de lot