Universidad Centro Occidental “Lisandro Alvarado”

Decanato de Ciencias de la Salud

Programa de Medicina

BIOQUÍMICA II
4to Semestre 2010 - 2

UNIDAD I:
BASES BIOQUÍMICAS DE LA SEÑALIZACIÓN CELULAR

Dr. Iván Darío Bravo Tobar

Médico Cirujano - UCLA
MSc. Bioquímica - IVIC

Noviembre, 2010
 Actividad G-GTP
Velocidad de intercambio GDP/GTP
Relativa de la Velocidad de hidrólisis de GTP
Proteína G G-GDP

De la ecuación anterior, la Velocidad de intercambio hidrólisis de la G-GTP

depende de la actividad GTP-asa intrínseca de la subunidad α
LA SUBUNIDAD α-GTP ES UN CATALIZADOR LENTO…..GTP-asa LENTA.
G-GTP vida media ≈ 15 segundos
Si el tiempo necesario para transformar una proteína G es mucho menor
que su vida biológica, entonces, un complejo L-R puede transformar
(activar) a más de una G-GDP

L-R G-GDP G-GTP

RESPUESTA
+

La RESPUESTA MÁXIMA se alcanza con la activación de una pequeña

fracción de receptores
 100 %
Respuesta
MÁXIMA
Respuesta Biológica (%)

50 %
Respuesta biológica

25 %

10 %

Concentración Ligando

Ocupación de Receptos
100 %
Ocupación
MÁXIMA
Ocupación de Receptos (%)

50 %
Se alcanza la Respuesta
máxima con sólo el 10% de
25 %
los receptores ocupados
10 %

Concentración Ligando
Si el tiempo necesario para transformar una proteína G es igual o mayor
que su vida biológica, entonces,

L-R G-GDP G-GTP

RESPUESTA
+

La RESPUESTA MÁXIMA se alcanza con la activación de todos los

receptores
Respuesta Biológica (%) 100 %
Respuesta biológica

50 %

25 %

10 %

Concentración L

100 %
Ocupación de Receptos (%)

Ocupación de Receptos

50 %
Se alcanza la Respuesta
máxima sólo con la totalidad
25 %
de los receptores ocupados
10 %

Concentración L
 LA ACTIVIDAD MOLECULAR DE UN
Respuesta Biológica
100 % RECEPTOR DETERMINADO PUEDE
Respuesta Biológica (%)

SER MODIFICADA POR:

-EFECTORES ALOSTÉRICOS
A B C -AGONISTAS DIFERENTES:
50 % DIFERENTE ACTIVIDAD
MOLECULAR
25 %
Potencia: A > B > C
10 %
Eficacia: A = B = C

Concentración L

100 %
Ocupación de Receptos (%)

NOTA: Se asume que en

50 %
estas condiciones los 3
ligandos tienen la misma
25 %
afinidad por el
10 % receptor……….Kd: A = B = C

Concentración L
 LA ACTIVIDAD MOLECULAR DE UN
Respuesta Biológica
100 % RECEPTOR DETERMINADO PUEDE
Respuesta Biológica (%)

C SER MODIFICADA POR:

-EFECTORES ALOSTÉRICOS
B -AGONISTAS DIFERENTES:
50 % DIFERENTE ACTIVIDAD
MOLECULAR
25 %
A Potencia: No comparable
10 %
Eficacia: C > B > A

Concentración L

100 %
Ocupación de Receptos (%)

C: Agonista total
50 % A y B: Agonistas parciales

25 %

10 %

Concentración L
 LA ACTIVIDAD MOLECULAR DE UN
Respuesta Biológica
100 % RECEPTOR DETERMINADO PUEDE
Respuesta Biológica (%)

SER MODIFICADA POR:

-EFECTORES ALOSTÉRICOS
A B C -AGONISTAS DIFERENTES:
50 % DIFERENTE ACTIVIDAD
MOLECULAR
25 %
Potencia: A > B > C
10 %
Eficacia: A = B = C

Concentración L

El mismo receptor activado por diferentes ligandos adquiere diferentes

grados o niveles de actividad molecular: A > B > C
Cada ligando induce un cambio conformacional diferente en el receptor, el
cual modula diferencialmente su actividad.

Cambio Cambio
conformacional 1 conformacional 2

Actividad molecular baja Actividad molecular alta

Si dicho cambio conformacional diferencial inducido por el ligando es capaz

de modular la actividad molecular intrínseca del receptor, entonces también
es capaz de modular otras propiedades del receptor que dependan de
cambios conformacinoales del mismo
 TOXINAS QUE ACTÚAN SOBRE LAS PROTEÍNAS G

V. cholerae

A.- TOXINA COLÉRICA: Cataliza la Ribosilación de la subunidad α de Gs, lo

que produce la inhibición de su actividad GTP-asa.

¿ ACTIVA O INACTIVA LA SEÑALIZACIÓN VÍA

PROTEÍNA Gs ?

LA MANTIENE EN SU ESTADO ACTIVO

 GTP GDP

GDP GTP

Proteína Proteína
Gs Gs
inactiva Activa
Ribosa

P Auto GTP-asa

TOXINA COLÉRICA
 B. pertusis, B. parapertusis

A.- TOXINA PERTUSIS: Cataliza la Ribosilación de la subunidad α, lo que

produce la inhibición del intercambio GDP por GTP.

¿ ACTIVA O INACTIVA LA PROTEÍNA Gi ?

LA MANTIENE EN SU ESTADO INACTIVO

TOXINA PERTUSIS
GTP GDP

GDP GTP

Proteína Ribosa Proteína

Gi Gi
inactiva Activa

P Auto GTP-asa
ELEMENTOS: Receptor, Transductor y Efector
 Efectores
Complejos proteínico enzimáticos o no.
-Enzimáticos: Adenilciclasa, Guanidilciclasa,
fosfolipasas, proteinquinasas.
-No enzimáticos: Canales iónicos.

REGULACIÓN DE LA CONCENTRACÓN INTRACELULAR DE

SEGUNDOS MENSAJEROS (AMPc, GMPc, DAG, IP3, Calcio)

REGULAR LA ACTIIDAD DE LOS COMPONENTES DE

DIFERENTES PROCESOS METABÓLICO

EFECTO BIOLÓGICO
El tiempo necesario para expresar la respuesta biológica final depende
de la naturaleza del complejo proteico activado

Canal iónico:
RESPUESTA RÁPIDA
-Proteína Sustrato es una
enzima involucrada en la
síntesis, almacenamiento,
liberación de una hormona o
neurotransmisor. Quinasa
dependiente de 2º mensajero:
RESPUESTA INTERMEDIA
-Proteína Sustrato funciona
como factor de transcripción:
RESPUESTA LENTA
 EFECTORES ACOPLADOS A POTEÍNAS G

Constituyen un grupo heterogéneo de proteínas con actividad enzimática,

con la capacidad de modular la concentración intracelular de segundos
mensajeros, o sin actividad enzimática tales como canales iónicos con la
capacidad de modular corrientes iónicas trasmembrana específicos.

AMPc
DAG
ADENILCICLASA
IP3
FOSFOLIPASAS (C, D A2,)
Calcio
CANALES IÓNICOS
AA
GMPc
 Adenilciclasa

Glicoproteína integral de membrana

M1 M2

COOH
H2N
C2
C1

Cataliza la producción de AMPc a partir de ATP en presencia de Magnesio

AC Mg+2
ATP +Mg+2 AMPc
De este esquema se deduce que la concentración intracelular de AMPc
depende del balance entre sus síntesis (Adenilciclasa) y su eliminación
(fosfodiesterasa).

Adenilciclasa Fosfodiesterasa
ATP AMPc AMP
 La actividad de la adenilciclasa

Gs Adenilciclasa

Gi Adenilciclasa

Forma activa de la Adenilciclasa

GTP

R
β α Adenilciclasa
γ
LA Subunidad βγ es capaz de modular la función de la Adenilciclasa

GTP

R
Adenilciclasa
β α
I
γ

Adenilciclasa I: Activada por αs, inhibida por el aumento de la

concentración o por acción directa de βγ.

Adenilciclasa II, IV, VII: Activadas por βγ.

 ¿ COMO ACTÚA EL AMPc ?

AMPc es el factor alostérico específico de las enzimas

quinasas, PROTEINAS QUINASAS A (dependientes
AMPc)

Adenilciclasa AMPc PKA Efecto biológico

 Regulación indirecta de la actividad de la adenilciclasa
por proteínas Gq
1.- Fosforilación
PKC DAG Gq

Adenilciclasa AMPc PKA Efecto biológico

2.- Calcio:Calmodulina

Gq IP3 Ca+2

Adenilciclasa
Señalización intracelular mediada por AMPc
 Fosfolipasas

FLC: DAG, IP3

A1
FLD: DAG
FLA2: Ac. Araquidónico
A2

D
C

Enzimas de membrana que hidrolizan enlaces fosfoéster o éster orgánico

presentes en los fosfolípidos.
Fosfolipasa A2
Activada por el dímero βγ
Hidroliza los ácidos grasos en la posición 2 de los fosfolípidos Produce el ácido
Araquidónico

A2
Fosfolipasa A2
Fosfolipasas C: Selectivas para los polifosfoinositoles, tal como el PIP2 (fosfatidil
inositol 4,5 bifosfato).

Activa la Proteína Quinasa

C (PKC)
DAG

FLC

Activa receptores
PIP2 (fosfoinositol 4-5 bi
cisternales de IP3
fosfato) IP3

Incremento de la
concentaión de Calcio
intracelular
 L

R GTP

PIP2 DAG

β
αq Fosfolipasa
C tipo β
γ
La fosfolipasa C tipo β es activada
principalmente por αq, pero βγ también
puede activar isoformas específicas de la FLC

IP3
Proteínas
DAG Proteína Quinasa C
fosforilables

IP3 Receptores para IP3 en el Aumento del Ca+2i

retículo endoplasmático
 Fosfolipasa D

Hidrólisis enlace fosfodiéster de glicerofosfolípidos

Ac. Fosfatídico DAG PKC

Fosfatidilcolina
Colina

GTP

Fosfolipasa
αq D colina
Proteínas quinasas activadas por segundos
mensajeros
RECEPTOR

TRANSDUCTOR

SEGUNDOS
MENSAJEROS

QUINASAS

PROTEÍNAS DIANAS

EFECTO BIOLÓGICO
 Proteínas quinasas

Proteína quinasa

Proteína Proteína

Proteína fosfatasa

Transferasas
Modulan sitios catalíticos y sitios de unión
 Proteínas Quinasas
PKA (AMPc)
Quinasas Activadas por Nucleótidos
Cíclicos PKG (GMPc)

a.-Activadas por DAG, Calcio y

Quinasas Activadas por fosfolípidos (PKC)
Calcio
b.-Activadas por
Calcio/Calmodulina (CaMK)

a.-Integrales de Membrana (Recp.

Tirosinas Quinasas Tirosina Kinasa)

b.-Citosólicas (Tirosina kinasas

solubles)