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REACTIFS BIOLABO CHOLESTEROL

www.biolabo.fr
C H O D - P AP
FABRICANT :
BIOLABO SA,
Liquide Prêt à l’emploi
02160, Maizy, France
Réactif pour le dosage quantitatif du cholestérol total dans le plasma ou le sérum humains

REF LP80106 R1 2 x 100 mL R2 1 x 5 mL

CODE CNQ : E6

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SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES
Tel : (33) 03 23 25 15 50
IVD USAGE IN VITRO
Fax : (33) 03 23 256 256

INTERET CLINIQUE (1) (2) PRECAUTIONS


Le dosage du cholestérol total, associé aux autres dosages de lipides Les réactifs BIOLABO sont destinés à du personnel qualifié, pour un
sériques est utile dans le diagnostic de l’hyperlipoprotéinémie. Il peut usage in vitro.
aussi permettre le diagnostic de maladies hépatiques et thyroïdiennes. • Utiliser des équipements de protection (blouse, gants, lunettes).
Conjointement avec le dosage des taux de triglycérides, cholestérol- • Ne pas pipetter avec la bouche.
HDL et cholestérol-LDL, il permet d’évaluer un niveau de risque cardio- • En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment à
vasculaire. l’eau et consulter un médecin.
Ce dosage est notamment important dans le diagnostic et le suivi de • Les réactifs contiennent de l’azide de sodium (concentration < 0,1%)
maladies telles que l’athérosclérose. L’hypercholestérolémie est aussi qui peut réagir avec les métaux tel que le cuivre ou le plomb des
observée dans certains cas de diabètes. Les causes physiologiques de canalisations. Rincer abondamment.
l’élévation du taux de cholestérol doivent être étudiées avant d’initier • La fiche de données de sécurité peut être obtenue sur simple
une thérapie médicamenteuse. demande.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
PRINCIPE (4) Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
Méthode enzymatique décrite par Allain et al., selon le schéma
réactionnel suivant :
CE PREPARATION DES REACTIFS
Cholestérol estérifié Cholestérol + acides gras libres
Les réactifs sont prêts à l 'emploi.
CO
Cholestérol + O2 Cholesten 4 one 3 + H2O2
POD
STABILITE ET CONSERVATION
2 H2O2 + Phénol + PAP Quinonéimine (rose) + 4 H2O Stocker à 2-8°C à l’abri de la lumière.
• Avant ouverture :
Les réactifs sont stables jusqu'à la date de péremption indiquée sur
REACTIFS l’étiquette.
• Après ouverture :
flacon R1 Le réactif de travail est stable au moins 2 ans.
REACTIF DE TRAVAIL Stabilité de l’étalon (flacon R2) : plusieurs semaines après ouverture
Tampon phosphate 100 mmol/L (transvaser la quantité nécessaire, bien reboucher le flacon et
Chloro-4-phénol 5 mmol/L stocker à 2-8°C).
Sodium Cholate 2,3 mmol/L Ne pas utiliser le réactif s’il est trouble ou si l’absorbance à
Triton x100 1,5 mL/L 500 nm > 0,400.
Conservateur Ce réactif doit être réfrigéré pendant le transport.
Cholestérol oxydase (CO) > 100 UI/L
Cholestérol estérase (CE) > 170 UI/L
Péroxydase (POD) > 1200 UI/L
PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (2)
4 - Amino – antipyrine (PAP) 0,25 mmol/L Sérum ou plasma : (sur EDTA ou héparine).
PEG 6000 167 Cmol/L Ne pas utiliser d’oxalate, fluorure ou citrate. Prélever sur patient à jeun.
Séparer le sérum des cellules dans les 2 heures.
flacon R2 ETALON Le cholestérol est stable :
• 5 à 7 jours à 2-8°C
Cholestérol 2 g/L (5,17 mmol/L) • 3 mois à –20°C
• plusieurs années à – 70°C.
• Eviter les décongélations/recongélations répétées.

Version : FT LP80106 09 12 2005


INTERFERENCES (2) (3) (5) PERFORMANCES (4)
Acide ascorbique : interférence négative à partir de 50 mg/L. Intra-série Inter-série
Taux normal Taux élevé Taux normal Taux élevé
Hémoglobine : interférence positive à partir de 0,33 g/L. N = 30 N = 33
Bilirubine : interférence négative à partir de 86 mg/L. La Moyenne g/L 1,49 2,17 Moyenne g/L 1,25 2,61
réalisation d’un blanc sérum peut amplifier cette
S.D. g/L 0,01 0,02 S.D. g/L 0,01 0,021
interférence.
Lipémie : faible interférence limitée par les surfactants et C.V. % 0,84 0,87 C.V. % 0,83 0,79
l’activité lipase de la cholestérol estérase. Limite de détection : environ 0,01 g/L
Les méthodes enzymatiques ont permis d’accroître la spécificité Sensibilité pour 1 g/L : 0,235 + 0,035
analytique bien que la cholestérol oxydase réagisse également avec
d’autres 3-hydroxycholestérols qui sont en général présents en quantité Comparaison avec un réactif de la concurrence :
insignifiante dans le sérum humain (ex : DHEA, pregnenolone). y = 0,957 x + 0,064 r = 0,9904
Young D.S a publié une liste des substances interférant avec le dosage.
Voir également, N. W. Tietz.
LIMITE DE LINEARITE
La réaction est linéaire jusqu’à 5 g/L (12,9 mmol/L). Au-delà, diluer le
REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES spécimen avec une solution NaCl à 9 g/L et refaire le dosage en tenant
1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales. compte de la dilution dans le calcul du résultat. La limite de linéarité
2. Sérums de contrôle normaux et pathologiques dépend du rapport de dilution spécimen/réactif.

CALIBRATION MODE OPERATOIRE (TECHNIQUE MANUELLE)


• Etalon du coffret (flacon R2) ou BIOLABO-Multicalibrator REF 95015. Ramener les réactifs et spécimens à température ambiante.
• Ou tout calibrant raccordé sur une méthode ou un matériau de
référence. Mesurer dans des tubes à Blanc Etalon Dosage
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur et essais bien identifiés :
des conditions de conservation du réactif. Réactif 1 mL 1 mL 1 mL
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants :
1. Changement du lot de réactif. Eau déminéralisée 10 CL
2. Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
3. Les valeurs de contrôle obtenues sortent des limites de confiance Etalon 10 CL
indiquées, même après utilisation d’un deuxième flacon de sérum de
Spécimen 10 CL
contrôle fraîchement reconstitué.
Mélanger. Laisser reposer 5 minutes à 37°C ou 10 minutes à température
ambiante. Lire les absorbances à 500 nm (480-520) contre le blanc réactif.
CONTRÔLE DE QUALITE CODE CNQ : E6 La coloration est stable une heure.
• BIOLABO EXATROL-N (valeurs normales) REF 95010.
• BIOLABO EXATROL-P (valeurs pathologiques) REF 95011. Remarque : des procédures spécifiques sont disponibles pour les
• Tout autre sérum de contrôle titré pour cette méthode. analyseurs automatiques. Contacter le service technique
BIOLABO.
• Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants :
• Au moins un contrôle par série. CALCUL
• Au moins un contrôle par 24 heures.
Le résultat est déterminé d’après la formule suivante :
• Changement de flacon de réactif.
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur. Abs (Dosage)
Résultat = x concentration de l’Etalon
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de Abs (Etalon)
confiance indiquées, appliquer les actions suivantes :
1. Répéter le test en utilisant le même contrôle.
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, préparer un sérum REFERENCES
de contrôle fraîchement reconstitué et répéter le test. (1) TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R. Ashwood,
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre W.B. Saunders (1999) p. 809-856.
rd
calibrant ou un calibrant fraîchement reconstitué et répéter le test. (2) Clinical Guide to Laboratory Test, 3 Ed., N.W. TIETZ (1995) p. 130-133.
th
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, calibrer à nouveau (3) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4 Ed. (1995)
p.3-143 à 3-164
en utilisant un autre flacon de réactif et répéter le test. (4) Allain C. C. et al., Clin. Chem. (1974), 20/4, p.470-475
5. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le service (5) Allan C., Deacon et Peter J. G. Dawson, Clin. Chem. (1979) 25/6, p.976-984
technique BIOLABO ou le revendeur local.
Made in France
INTERVALLES DE REFERENCE (2)
Version : FT LP80106 09 12 2005
Chez l’adulte, estimé en terme de risque de maladie cardio-vasculaire :

Cholestérol total g/L [ mmol/L ]


Valeur recommandée <2 [ < 5,18 ]
Risque modéré 2,00-2,39 [ 5,18-6,19 ]
Risque élevé > 2,4 [ > 6,22 ]

Il est recommandé à chaque laboratoire de définir ses propres valeurs


de référence pour la population concernée.

Fabricant Date de péremption IVD Usage « in vitro » Température de conservation REF Référence du produit Consulter la notice LOT Numéro de lot