HEMOSTASE

I. INTRODUCTION
1. Ensemble des mécanismes physiologiques dont
les fonctions:

 Prévenir toute hémorragie spontanée

 Permettre l’arrêt d’un saignement suite à

une rupture vasculaire.
 I. INTRODUCTION
2. In vivo, l’hémostase revêt 2 aspects:

a) l’hémostase continue ou permanente:

 assurant le maintien du sang fluide à l’intérieur des

vaisseaux intacts .

b) l’hémostase correctrice ou réactionnelle:

Permettant l’arrêt d’un saignement lors d’une lésion des
petits vaisseaux
 I. INTRODUCTION
3. Ces phénomènes se déroulent en 3 temps
étroitement intriqués:

 Hémostase primaire: temps vasculo-plaquettaire:

Thrombus blanc

 Coagulation : facteurs plasmatiques:

formation de caillot de fibrine
Thrombus rouge

 Fibrinolyse: Lyse du caillot: dissolution du caillot

 A-HÉMOSTASE PRIMAIRE

1.Facteurs de l’hémostase primaire:

a) Vaisseaux

b) Plaquettes

c) Facteur de Von Willebrand

d) Fibrinogène
 1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
a) vaisseaux:

Sont des simples tubes endothéliaux.

Au niveau des artérioles et des veinules, on peut séparer
schématiquement 3 couches de l’intérieur vers
l’extérieur:

Intima: formé de l’endothélium vasculaire;

non thrombogène

C’est un tissu - synthétique

- métabolique
- sécrétoire
 1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
a) vaisseaux: (suite)

Média: formée par des cellules musculaires lisses.

séparée de - la membrane basale par LEI

- L’adventice par la LEE

Adventice: fibroblastes + adipocytes

 1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
En effet l’endothélium sécrète un certain nombre de substance actives:

 Antithrombine: puissant inhibiteur physiologique de la coagulation

 Thromboplastine tissulaire ou facteur 3 tissulaire:
Capable de déclencher la coagulation plasmatique.
 Facteur de Willebrand: nécessaire au déroulement normal de
l’hémostase primaire
 Activateur tissulaire de plasminogène: rôle princicipal dans la
fibrinolyse
 Prostaglandine I2 ou prostaccycline: facteur antiagregant
et vasodilatateur très actif
 1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
L’endothélium vasculaire capte et dégrade un certain
nombre de substances métaboliques:

Sérotonine, Adrénaline et Angiotensine

Le sous endothélium est:

situé entre: l’endothélium et la média

Formé de collagène et de microfibrilles.

Il est thrombogène

Sa structure fibrillaire lui permet le rôle d’adhésion

plaquettaire
1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE

Sa structure fibrillaire lui permet le rôle d’adhésion

plaquettaire

Il permet d’activer le facteur Hagman

 1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
b) Plaquettes:
PRIMAIRE

Membrane plaquettaire:

- Phospholipide
- GP membranaires: Rôle important
dans l’hémostase:
GP IB, GP IIb-IIIa, GP V
 1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE

GP V: récepteur de la thrombine

GP I : molécule nécessaire à l’adhésion des plaquettes au

stroma sous endothélial.

Cette adhésion se fait par l’intermédiaire du facteur de

Willebrand.
 1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
constituants internes:

a)- Actomyosine
b)- Microtibules et filaments
c)- Système membranaires:
SCO: Système caniculaire ouvert
STD: Système tubulaire dense
 1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
d) les granules:

*les granules denses:

ATP, Adrénaline et sérotonine,
(ADP + Thromboxane A 2)= agent très agrégant

*Les granules alpha:

Facteurs de la coagulation: Fibrinogène, V , VIII
Facteurs spécifiques de la plaquette:
PF3, PF4, TGF B, PDG F, Fact plaquettaire
mitogène
1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
*Les granules lysosomiaux:

Très riche en enzyme:

Hydrolase acide
collagénase
Phosphatase acide
aryl sulfatase
Protéase….
 1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
c) Facteur de Willebrand:
- GP de haut PM sur laquelle se fixe le facteur VIII dans
la circulation.

- IL est synthétisé par la cellule endothéliale, puis libérée

dans la plasma, mai également synthétisé par le
mégacaryocyte.

- Ce facteur permet l’adhésion des plaquettes au sous

endothélium
1.FACTEURS DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
d) Fibrinogène

- Polymère constitué de 3 chaines solubles dans l’eau.

- Synthétisé par le foie.

- Support de la coagulation

- Intervient dans l’agrégation plaquettaire

 2.MÉCANISME DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
a) La vasoconstriction réflexe du vaisseau lésé est
un élément de défense important mais très court,
surtout efficace pour les vaisseaux de petit calibre.

La diminution du calibre peut atteindre 40 % de sa

taille initiale.

Elle constitue le temps vasculaire et facilite

l'adhésion des plaquettes au collagène du sous-
endothélium.
 2.MÉCANISME DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
b) L'adhésion des plaquettes au sous-endothélium
s'effectue par l'intermédiaire du facteur
Willebrand, fixé sur son récepteur membranaire : la
protéine GPIb.

Ce phénomène est très rapide.

• Il provoque l'activation des plaquettes

2.MÉCANISME DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
c) La sécrétion plaquettaire
• Les plaquettes activées changent de forme, se
contractent et, par un mécanisme actif,
expulsent les granules contenant des éléments
ayant une action agrégante : ADP, adrénaline,
noradrénaline.

• Ces éléments vont provoquer l'activation

d'autres plaquettes et l'agrégation plaquettaire.
 2.MÉCANISME DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
d) L'agrégation plaquettaire
correspond à l'accotement des plaquettes entre elles.

• Elle s'effectue en présence de calcium et sous l'influence

des éléments sécrétés par les plaquettes lors de l'étape
précédente.

Les plaquettes s'agrègent entre elles par

l'intermédiaire des molécules de fibrinogène qui se fixent
sur un récepteur de la membrane plaquettaire la
GPIIbllla.
2.MÉCANISME DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE

• Cette étape devient rapidement irréversible sous

l'action de la thrombine, générée par la
coagulation plasmatique, elle-même déclenchée
très rapidement après la lésion du vaisseau.
2.MÉCANISME DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
e) La formation du clou plaquettaire
Les plaquettes agrégées meurent très rapidement, leurs
membranes fusionnent et les cellules sont lysées, libérant
les éléments du cytoplasme.

L'amas formé par ces plaquettes fusionnées est appelé le

clou plaquettaire ou clou hémostatique ou encore thrombus
blanc.

L'hémostase primaire peut être explorée globalement par le

temps de saignement (TS).
 B- COAGULATION
1. Définition:

 Processus qui suit la lésion vasculaire et qui

permet le passage du sang de l’état fluide à
l’état solide.

 Il s’agit d’une transformation de fibrinogène (

protéine soluble) en fibrine insoluble constituant
l’armature d’un caillot.
 1. Définition ( suite )

 2 étapes aboutissent à la formation de fibrine:

 Formation de prothrombinase

 Thrombinoformation

 Fibrinoformation
 1. Définition ( suite )
• La coagulation intervient pour consolider le clou
plaquettaire obtenu à la fin de l'hémostase primaire, ce
dernier étant insuffisant pour assurer une hémostase
complète.

• L'étape finale de la coagulation est la transformation de

fibrinogène en fibrine, sous l'action de la thrombine.

• Cette transformation a lieu après une série de réactions

faisant intervenir de nombreux facteurs, plasmatiques,
mais aussi plaquettaires.
• La coagulation est donc étroitement liée à l'hémostase
primaire.
 1. Définition ( suite )

• On distingue classiquement deux voies permettant

d'aboutir à cette formation de thrombine : la voie
endogène ou intrinsèque et la voie exogène ou
extrinsèque, toutes deux aboutissant à l'activation du
facteur X.

• Une voie commune aboutit ensuite à la formation de

thrombine.

• Les facteurs de la coagulation sont indiqués en chiffres

romains, accompagnés d'un "a" lorsqu'ils sont activés.
 1. LA VOIE EXOGÈNE

- Elle fait intervenir le facteur tissulaire, le facteur VII

et le facteur X.

• Mécanisme

- Le facteur tissulaire (FT) s'associe au facteur VII

pour former un complexe [FT-FVII] qui active
rapidement le facteur X. La voie exogène peut être
explorée globalement par le temps de Quick (TQ) ou taux
de prothrombine (TP).
 2. LA VOIE ENDOGÈNE
Elle fait intervenir de très nombreux facteurs :

LES FACTEURS CONTACTS :

• - facteur XI facteur Rosenthal ou PTA

• - facteur XII facteur Hageman

• - kallicréine (K)= facteur Fletcher provenant de

l'activation de la prékallicréine (PK)

• - kininogène de haut poids moléculaire (KHPM) = facteur

Flaugeac
 2. LA VOIE ENDOGÈNE
Les autres facteurs

- facteur IX = facteur anti hémophilique B

- facteur VIII = facteur anti hémophilique A

- les phospholipides de la membrane plaquettaire,

facteur 3 plaquettaire (F3P)

- le calcium (Ca++).
 2. LA VOIE ENDOGÈNE
• Mécanisme:
• Le facteur XI, activé par le facteur Xlla, vient
activer le facteur IX (qui devient IXa).

• Le facteur IXa se fixe sur les phospholipides de la

membrane plaquettaire, par l'intermédiaire du calcium.

• C'est à ce niveau que le facteur IXa vient ensuite

activer le facteur X,
 2. LA VOIE ENDOGÈNE

• cette activation n'étant rapide qu'en présence de

facteur VIII.

• La voie endogène peut être explorée globalement

par le temps de céphaline kaolin (TCK) ou temps de
céphaline activé (TCA).
 3. VOIE COMMUNE
Formation de thrombine

• Les voies exogène et endogène mènent toutes

deux à l'activation du facteur X.

• Le facteur Xa active le facteur V et va former

un complexe avec le facteur Va, en présence de
calcium et des phospholipides de la membrane
plaquettaire.
 3. VOIE COMMUNE

• Ce complexe, encore appelé

"prothrombinase" active la prothrombine
(facteur II) en thrombine ( facteur IIa).

• Le facteur V est également activé par la

thrombine formée, ce qui amplifie le
phénomène
 3. VOIE COMMUNE
Formation de fibrine:

C'est la thrombine qui va transformer le

fibrinogène en fibrine, qui se polymérise,

 3. VOIE COMMUNE
Stabilisation de la fibrine

• La dernière étape de la coagulation fait

intervenir le facteur XIIIa qui vient stabiliser le
caillot de fibrine en rendant insoluble le polymère
de fibrine.

• L'activation du facteur XIII est accélérée par la

thrombine, ainsi que par la fibrine.
 C. FIBRINOLYSE
• La formation d'un caillot de qualité va permettre
de stopper l'hémorragie et la cicatrisation de la
plaie vasculaire.

• Cette cicatrisation terminée, le caillot, devenu

inutile, va être dissout par un mécanisme faisant
intervenir d'autres facteurs.

• Ce mécanisme est la fibrinolyse.

 C. FIBRINOLYSE
Les facteurs :

- le plasminogène,

- le tPA ( activateur tissulaire du plasminogène),

- PAI-1 (inhibiteur du fact tissulaire de plasminogène)

- les facteurs de la phase contact : surtout le facteur

XIIa,

- l'urokinase.
 C. FIBRINOLYSE
Mécanisme (figure 3):

- Sous l'action des activateurs (tPA, facteur XII,

urokinase), le plasminogène présent entre les mailles du
caillot, est transformé en plasmine.

- Cette plasmine formée va "découper" le caillot de

fibrine en fragments qui seront ensuite éliminés dans la
circulation.

- Ces fragments sont les produits de dégradation de la

fibrine (ou PDF).
 IV. INHIBITEURS

• Les inhibiteurs physiologiques de la coagulation

sont indispensables pour assurer un équilibre des
réactions.

• Ils agissent en contrôlant les phénomènes

d'activation de la coagulation.
 IV. INHIBITEURS
Les inhibiteurs de la coagulation :

• L'antithrombine (AT) inhibe essentiellement le facteur

Xa et la thrombine.

• La protéine C et la protéine S forment un complexe

inhibant les facteurs Va et Vllla.

• La protéine C est activée par la thrombine, après que

celle-ci soit fixée sur son récepteur endothélial : la
thrombomoduline.
Les inhibiteurs de la coagulation

Il existe également des inhibiteurs de la

fibrinolyse, qui sont en fait des anti-
activateurs (anti tPA, anti urokinase...
 V. CONCLUSION

- L'hémostase est assurée par un ensemble de réactions

faisant intervenir de nombreux facteurs.

- Ces mécanismes physiologiques,

hémostase primaire,
coagulation et
fibrinolyse
sont essentiels, permettant d'assurer une prévention du
risque hémorragique, mais également
du risque thromboembolique.
 V. CONCLUSION
• Le rôle des inhibiteurs physiologiques est en effet
très important, réalisant un contrôle permanent de
ces réactions, qui risqueraient d'aboutir à une
exagération des phénomènes de coagulation

• Ainsi un déficit en facteur de la coagulation

entraînera plutôt un risque hémorragique, tandis
qu'un déficit en inhibiteur sera responsable
d'accidents thrombotiques.
EXPLORATION DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
A. Tests globaux:

1.Temps de saignement:

a) méthode de DUKE: 2 à 4 mn
b) méthode d’IVY 3 points: +++ inf à 6 min
c) méthode d’IVY incision: inf à 10 min
 2. Mesure de la fragilité capillaire

• Mesure du nombre de pétéchies au pli du coude

après application d’une pression continue (brassard
de tensiomètre, 100 mm mercure, 5 minutes).

A l’état normal : absence de pétéchies (< 5 min )

EXPLORATION DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE
B) Exploration des plaquettes:

 Numération plaquettaire
 Tests d’études des fonctions plaquettaires
Test d’adhésion plaquettaire
Test d’agrégation plaquettaire
Etude de rétraction du caillot
Durée de vie des plaquettes
Etude des glycoprotéines membranaires
Etude des granules intraplaquttaires
o Granules denses
o Granules alpha
EXPLORATION DE L’HÉMOSTASE
PRIMAIRE

C) Exploration des facteurs plasmatiques:

1. Facteur de Willebrand

2. Fibrinogène
 EXPLORATION DE LA
COAGULATION
I. Le temps de Quick
Ce test explore la voie dite extrinsèque de la coagulation.

1. Définition

• C'est le temps de coagulation d'un plasma citraté

déplaquetté après adjonction de thromboplastine et de
calcium.

• Il est exprimé en seconde (Normale: 12 à 15 s suivant la

thromboplastine), en pourcentage : TP ou taux de
prothrombine
 EXPLORATION DE LA
COAGULATION

I. Le temps de Quick

• Facteur exploré par le TP uniquement:

facteur VII
 EXPLORATION DE LA
COAGULATION
II. Le temps de Céphaline + Activateur (TCA)
1. Définition
• C'est le temps de coagulation d'un plasma citraté
déplaquetté auquel on ajoute un activateur des facteurs
contacts, de la céphaline, substitut du facteur 3
plaquettaire, puis après incubation à 37°c du Ca Cl2
M/40.
• Le T.C.A. normal varie suivant
- les activateurs,
- les céphalines commerciales et
- les appareils utilisés,
 EXPLORATION DE LA
COAGULATION
II. Le temps de Céphaline + Activateur (TCA)

1. Définition

Le temps est de 30 à 40 s en général. La limite de

la zone de normalité, à déterminer par chaque
laboratoire, est située 6 s au dessus du témoin.
 EXPLORATION DE LA
COAGULATION
III. Le temps de thrombine:

• Temps de coagulation d’un plasma citraté en présence de

thrombine.

• Il explore la fibrinoformation, mais ne permet pas

d’évaluer la solidité du caillot

• N’éxplore pas le facteur XIII

• Normal: 18 sec
 EXPLORATION DE LA
FIBRINOLYSE
a) dosage du plasminogéne:
. Synthétisé par l’hépatocyte

• MM = 92 000 .

• Béta -2 globuline thermolabile monocaténaire .

• 1/2 vie de 2 jours.

• Taux plasmatique de 200 mg/ml

• Dosage: pas grand intêret

 EXPLORATION DE LA
FIBRINOLYSE
a) Tests globaux:

1.Temps de lyse des euglobulines: test de Von Kaulla

( Fibrinogéne- plasminogéne- Activateurs de plasmines)

b) Tests analytiques:
1. Dosage de plasminogéne
2. Dosage de TPA
3. Dosage du alpha antiplasmine; PAI-1
 EXPLORATION DE LA
FIBRINOLYSE
c) Tests indirects:

1.Dosage des PDF

2.Dosage des D- Dimères: diagnostic
d’exclusion de la thrombose veineuse
3. Dosage du fibrinogéne