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DETERMINACIÓ N DE
FIBRINOGENO
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PRÁ CTICA 11

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HEMATOLOGIA

AYLIN GUADALUPE AHUATZI VALENCIA

ANDREA MONTIEL LARA

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ESTEFANIA TLAMAXCO PORTILLO

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 DETERMINACIÓN DE FIBRINOGENO

INTRODUCCIÓN

El fibrinógeno es el factor I de la coagulación. Es una glicoproteína fibrosa y adhesiva que está en

el plasma en una cantidad aproximada de 200 a 400 mg/dL y que tiene un importante papel en
todas las fases de la hemostasia. Es una proteína de síntesis hepática con un peso molecular de
340 kDa, su vida media es de 100 horas y tiene cuatro funciones principales: es la proteína
estructural que da origen a la fibrina, participa como puente entre plaquetas para la agregación
plaquetaria a través de la interacción con la GP IIb/IIIa, es un inhibidor de la coagulación porque se
une a la trombina y es un sustrato para la interacción con otras proteínas como el factor XIII y las
proteínas de la fibrinólisis. Representa aproximadamente el 2.0% de las proteínas plasmáticas e
incluso se le encuentra en los gránulos α de las plaquetas. Su síntesis obedece a procesos
inflamatorios, donde la acción de la IL-6 tiene efecto sobre los tres genes que codifican para su
síntesis. La medición del fibrinógeno se debe, por lo general, al estudio de coagulopatías o estados
agudos de hemorragia y debido a que diferentes patologías presentan resultados muy similares en
pruebas de coagulación, es prioritario efectuar un diagnóstico diferencial adecuado, lo que implica
realizar una historia médica sistemática, así como la evaluación física del paciente.

El Fibrinógeno, en presencia de un exceso de trombina, se transforma en Fibrina. El tiempo de

formación del coágulo es inversamente proporcional a la concentración de Fibrinógeno presente
en la muestra de plasma. La determinación de fibrinógeno por el tiempo de coagulación de
trombina, está basada en el método descrito por Clauss. En presencia de altas concentraciones de
trombina, el tiempo necesario para la formación del coágulo en el plasma diluido es inversamente
proporcional a la concentración de fibrinógeno. Las anormalidades del fibrinógeno pueden ser:

1. Ausencia de fibrinógeno: afibrinogenemia

2. Nivel reducido de fibrinógeno, con estructura normal: hipofibrinogenemia

3. Fibrinógeno estructuralmente anormal: disfibrinogenemia.

OBJETIVO

 Que el alumno realice la determinación de fibrinógeno presente en una muestra de plasma

citratado.
 Qué el alumno comprenda los conceptos fibrinólisis en el proceso hemostático.

MATERIAL

 Plasma citratado
 3 tubos de 12 x 75 mm
 Baño Maria
 Cronómetro
 1 pipeta automática (50 uL)
 1 pipeta automática (100-1000 uL)
 1 pipeta automática (20 uL)

REACTIVOS

 Kit para la determinación de fibrinógeno

PROCEDIMIENTO

1. Preparar una dilución 1/10 de la muestra y los Controles en Tampón Imidazol: 50 L muestra +
450 L Tampón Imidazol (R2). La muestra diluida debe ser procesada antes de 1 hora.

2. A 0,2 mL de la dilución añadir 20 µL de Solución Caolín (R3) y atemperar a 37ºC durante 4-6
minutos.

3. Añadir 0,1 mL de reactivo trombina (R1) y cronometrar la formación de coágulos. No atemperar

la trombina (R1).

Nota: La concentración de Fibrinógeno en la muestra se calcula por interpolación de su tiempo de

coagulación en la curva de calibración. La dilución 1/10 del plasma representa el 100% del valor
asignado. Si los tiempos de dilución 1/10 se encuentran fuera de la curva lineal, preparar
diluciones a 1/5 ó 1/20, según sea necesario. Si la muestra se diluye a 1/5 dividir el resultado de la
curva por 2; si la muestra se diluye a 1/20, multiplicar el resultado por 2 para obtener el resultado
final.

OBSERVACIONES

CUESTIONARIO

1. ¿Cómo interacciona el fibrinógeno con las plaquetas y el endotelio vascular?

El fibrinógeno también tiene un importante papel en la hemostasia primaria uniéndose a la

integrina α2bβ3 de las plaquetas activadas a través de residuos localizados en el extremo
carboxiterminal de las cadenas γ. El fi brinógeno se comporta como una proteína de adhesión
uniendo a las plaquetas entre sí (agregación plaquetaria).
Hay dos secuencias RGD (Arg-Gli-Asp) en la molécula del fibrinógeno, una en la hélice enrollada y
otra en la región carboxilo de la cadena Aα, las cuales no son necesarias para la unión a las
plaquetas, pero sí para la retracción del coágulo. Las células endoteliales tienen a las integrinas
αVβ3, α5β1, al ICAM-1 (molécula de adhesión intercelular 1) y la caderina vascular endotelial (VE-
caderina), todas ellas moléculas con capacidad de unirse al fibrinógeno a través de las
mencionadas secuencias RGD de la cadena Aα y otros residuos en el extremo carboxiterminal de la
cadena γ.

2. ¿Cuáles son las proteínas encargadas de la regulación de la fibrinólisis?

La fibrinólisis o degradación de las fibras, es la lisis o remodelación de los componentes de la MEC

(matriz extracelular) que se genera mediante una cascada de eventos proteolíticos. Debido a que
el sistema plasminógeno/plasmina participa en la degradación de la MEC tanto en tejidos “sólidos”
como en el sistema sanguíneo, puede decirse que este sistema participa en la fibrinólisis. Este
sistema también interviene en algunos otros procesos biológicos como la regeneración tisular,
menstruación e implantación embrionaria así como en la invasión tumoral.

El plasminógeno es activado por los PAs (activadores del plasminógeno), entre ellos la serina
proteasa uPA (activador del plasminógeno tipo urocinasa) y tPA (activador del plasminógeno tipo
tisular), los cuales efectúan una proteólisis parcial de la proteína para convertirla en plasmina
activa.

3. ¿Cuáles y cómo se producen los productos de la fibrinólisis?

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Hoppe B. Fibrinogeno y factor XIII en la interaccion de la coagulación, fibrinólisis e inflamación.
Thromb Haemost. 2014; 112:649-658.

Fish RJ, Neerman-Arbez M. Fibrinogeno regulación. Thromb Haemost. 2012; 108:419-426.