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ESTERILIZACION

Leydi D. Carreño Barreto (1093792314), Ángela N. Castellanos


Cote (1005062660), Karime L. Parra Cifuentes (116555750)
Curso Microbiología Veterinaria, Grupo A, Departamento de
Ciencias Agrarias, Universidad de Pamplona

RESUMEN
En el laboratorio de microbiología se realizaron los pasos y se conocieron los requisitos
mínimos para poder esterilizar y operar adecuadamente los implementos de trabajo,
en la práctica se conocieron los métodos de eliminación total de las bacterias que
contaminan las herramientas de laboratorio durante su uso como lo son las cajas de
Petri; asas; probetas etc.
Se emplearon dos métodos de esterilización:
 La esterilización por calor seco produce la destrucción de los microorganismos por
oxidación de los componentes celulares. Este es un proceso menos eficiente que la
esterilización por calor húmedo porque los microorganismos mueren con mayor
rapidez cuando se encuentran en presencia de agua.
 El calor húmedo destruye los microorganismos por coagulación de sus proteínas
celulares; también presenta ventajas como que no es corrosivo para metales y
necesita menor tiempo de esterilización.

ABSTRAC
In the microbiology laboratory were performed the steps and met the minimum
requirements to operate properly sterilized and work tools, in practice the methods met
a total elimination of bacteria that contaminate the laboratory tools for use as are Petri
dishes, handles, cylinders etc.
Two methods of sterilization were used:
• Dry heat sterilization destroys microorganisms by oxidation of cellular components.
This is a less efficient process than humid heat sterilization because microorganisms die
more quickly in the presence of water.
• Moist heat destroys microorganisms by coagulating their cellular proteins; It also has
Palabras clave:
advantages suchEsterilizacion, seco, humedo,
as it is not corrosive temperatura,
to metals presion.
and needs less sterilization time.
1. OBJETIVOS fundamentales en la validez de un resultado
en el laboratorio.
• Aplicar métodos utilizados para la
La esterilización es la eliminación de todos
esterilización de medios de cultivo,
los microorganismos presentes en un objeto
materiales y accesorios empleados en el
o sustancia. Para llevar el proceso de
Laboratorio de Microbiología.
esterilización existen métodos como los
• Enumerar los diferentes métodos que agentes físicos (calor seco, calor húmedo y
existen para realizar procedimientos de radiaciones) y agentes químicos (cloro,
esterilización usados en microbiología. compuestos clorados, aldehídos, óxido de
etileno, compuestos fenólicos, ácidos y
• Preparar el material a Esterilizar y hacer álcalis), generalmente el agente más
uso de la autoclave para ser utilizados en
empleado es el calor, ya sea húmedo o seco;
prácticas futuras.
la efectividad del calor depende del tiempo de
exposición y de la temperatura.
2. INTRODUCCION La desinfección supone la destrucción de los
microorganismos vegetativos que pueden
La esterilización comprende todos los
causar enfermedades o en el contexto de las
procedimientos físicos, mecánicos y
industrias de alimentos, los que pueden
químicos, que se emplean para destruir,
producir alteraciones; la desinfección
inactivar o retener gérmenes en general y
también puede hacerse por métodos físicos y
patógenos en particular.
químicos.
El control de microorganismos mediante
procesos de esterilización, tiene importancia
en el laboratorio, dado que la escogencia del
método a utilizar y del material a procesar
definen la eficacia del proceso de eliminación
3. PROCEDIMIENTO
microbiana y por ende garantizan la no
contaminación de muestras o cultivos hechos
4. RESULTADOS Material de esterilización en el Autoclave:

Material de esterilización en el Horno de - El material se desinfecto por medio de


aire caliente: la autoclave a una temperatura de
121°C por 15 libras de presión
- El material se desinfecto por medio durante 30 minutos. (El material se
del (calor seco) en el horno a una encontraba sucio)
temperatura de 120°C, durante 5 La utilización de este método permitió la
horas estando completamente limpio. destrucción de microrganismos
La utilización de este método y su eficacia formadores de esporas, su proceso es
fue apta para esterilizar los materiales debido mucho más rápido, no deja residuos
a dos factores: el tiempo de exposición y la tóxicos.
temperatura.
Todos los microorganismos son susceptibles,
en distinto grado, a la acción del calor. El
calor provoca desnaturalización de proteínas,
fusión y desorganización de las membranas
y/o procesos oxidantes irreversibles en los 5. ANALISIS DE RESULTADOS
microorganismos y este requiere de mayor
tiempo de esterilización.
6. CONCLUSIONES cual era dejar los materiales libres de
cualquier agente patógeno no deseado para el
- La esterilización debe ser un método seguro,
cultivo de microorganismos.
que permita el rápido procesamiento del
material, garantizando su esterilidad en el
momento de su entrega.
7. ANEXOS
- En la práctica se estudió el envolver
CUESTIONARIO
correctamente el material de vidrio teniendo
en cuenta las pautas requeridas para obtener 1. ¿Qué es esterilización?
una adecuada cubierta y el tiempo requerido
para realizar una esterilización. R: Se denomina esterilización al proceso por
el cual se obtiene un producto libre de
- El objetivo a realizar se cumplió ya que los microrganismos viables. El proceso de
resultados obtenidos fueron los mejores, el esterilización debe ser diseñado, validado y
llevado a cabo para asegurar que es capaz de soporte de la autoclave.
eliminar la carga microbiana del producto a
- Asadera: Son las asas laterales que
un microrganismo más resistente.
permiten agarrar y levantar la autoclave para
su traslado o movimiento.
2. Dibuje una autoclave con sus partes
y describa su función - Tuerca de tapa superior: Es un dispositivo
R: Una autoclave de laboratorio es un que forma parte del mecanismo de
dispositivo que sirve para esterilizar material aseguramiento que tiene el instrumento.
de laboratorio, utilizando vapor de agua a alta - Soporte de contenedor: Se trata de una
presión y temperatura, evitando con las altas base, cuyo material es de aluminio, con la que
presiones que el agua llegue a ebullir a pesar está elaborada el contenedor.
de su alta temperatura. El fundamento de la
autoclave es que coagula las proteínas de los - Grasa sintética: Es el lubricante que
microorganismos debido a la presión y permite engrasar la empaquetadura de la
temperatura, aunque recientemente se ha puerta del equipo esterilizador.
llegado a saber de algunas formas a celulares, - Tornillo asegurador: Es otro de las tuercas
tal como los priones, que pueden soportar las que forman parte del mecanismo de
temperaturas de autoclave. aseguramiento.

PARTES DE UN AUTOCLAVE: - Fijador del tornillo asegurador: Es un


- Válvula de seguridad: Están diseñadas mecanismo que sujeta fijamente y así se evita
para aliviar la presión cuando un fluido supera el movimiento del tornillo asegurador.
un límite preestablecido (presión de tarado).
Su misión es evitar la explosión del sistema - Tapón de sobrepresión: Es una tapa que
protegido o el fallo de un equipo o tubería por permite la liberación de la presión cuando es
un exceso de presión. Existen también las excesiva. La autoclave tiene un canal de
válvulas que alivian la presión de un fluido drenaje por donde se libera vapor.
cuando la temperatura (y, por lo tanto, la
presión) supera un límite establecido por el - Manómetro de vapor: Es el indicador de la
fabricante presión dentro de la cámara. El vapor ingresa
- Manómetro: Instrumento para medir la a la cámara de la autoclave causando la
presión de los fluidos, principalmente de los elevación de la temperatura y la presión
gases, Es la que permite retirar la parte interna.
superior del equipo.
- Válvulas de control, apertura y cierre de
purga: Son las piezas que permiten el control
de la presión dentro de la autoclave.
- Tubo de purga: Es el conducto por donde
se libera el vapor generado por la autoclave
cuando está en funcionamiento.
- Contenedor de aluminio: Es el chasis o el
3. ¿Qué medidas podría tomar usted 6. ¿Qué otros procesos físicos
para verificar la efectividad de la permiten disminuir la carga
esterilización por auto clavado? microbiana?
R: Tener en cuenta que no permite esterilizar R: CALOR: La desinfección por calor recibe
soluciones formen emulsiones con el agua, el nombre de Pasteurización. Este proceso,
además de que es corrosivo en instrumentos por calentamiento de líquidos se emplea
metálicos, que la temperatura sea la adecuada, generalmente a temperaturas por debajo del
al igual que la presión y el tiempo, para su punto de ebullición. Destruye
correcto funcionamiento se debe saber muy microorganismos patógenos (infecciosos); no
incluye esporas. La temperatura alcanzada es
bien las instrucciones de uso.
de 65°C durante 15 minutos. Las condiciones
para obtener óptimos resultados son:
4. ¿Qué es liofilización? - Los elementos deben estar limpios.
R: Es un proceso de deshidratación usad - Inmersión completa de los mismos en agua,
generalmente para conservar un alimento alcanzando la temperatura adecuada, o usar
perecedero o hacer el material más Autoclave de vapor.
conveniente para el transporte. La - Los elementos deben ser secados
posteriormente.
liofilización funciona congelando el material
y luego reduciendo la presión circundante
RADIACIÓN UV: Estas radiaciones poseen
para permitir que el agua congelada en el un bajo poder de penetración, se emplea para
material se sublime directamente desde la fase disminuir la carga microbiana de superficies.
solida a la fase gaseosa, sin pasar por el estado
No se considera un método esterilizante.
líquido. Mecanismo de acción: máximo de absorción
de los ácidos nucleicos es a 265 nm. La luz
5. ¿Qué es sonicacion?
UV provoca dímeros de pirimidina en el DNA
R: La sonicacion es el acto de aplicación de y si no se reparan, la célula muere.
la energía del sonido (generalmente
ultrasonidos) para agitar las partículas de una LIMPIEZA: Reduce la contaminación y
muestra, con diversos fines científicos o evita que se depositen sustancias pirógenas en
los distintos materiales. Este proceso puede
industriales.
ser:
Su mecanismo es una corriente eléctrica que  Manual: Esta expulsa
transmite su energía a un sistema mecánico mecánicamente una alta proporción de
que la convierte en vibración de alta microorganismos presentes en el
intensidad que genera ondas de ultrasonido. material.
Los ultrasonidos generan a su vez,
vibraciones en el material objetivo. Si - El lavado y fregado con agua a temperatura
contiene líquidos, se generan millones de adecuada y detergente permite que no se
burbujas microscópicas, las cuales sufren disemine el polvo que puede trasladarse a
rapidísimos procesos de expansión y colapso superficies críticas.
que pueden transmitir su energía a otros - No se debe usar el agua a más de 45°C,
materiales. Este se llama cavitación y puede porque coagula la albúmina y se hace más
ser incrementado añadiendo al medio difícil la limpieza.
pequeñísimas esferas de vidrio. - No usamos escobas, plumeros ni franelas ya
que crean un riesgo de infección por
diseminación. Carreño B.
- El personal debe proteger su salud utilizando
guantes resistentes, protección ocular y
delantal impermeable y barbijo.

 Mecánica: Existen maquinas


lavadoras especialmente diseñadas
para el lavado de material. El proceso
se realiza a través de una cinta
transportadora, que incluye el lavado
con agua fría, lavado con agua
caliente, enjuague y secado. Estas
máquinas forman chorros de agua y
vapor que trabajan por fricción y
generan turbulencias.
Ultrasónica: Se utiliza energía en forma de
onda ultrasónica 20 KHz. transductor
metálico por 5 minutos u onda ultrasónica de
35 KHz. transductor de cristal por 3 minutos.
Esta limpieza no remueve material
incrustado, pero es suplementaria de la
manual. Esta onda no produce muerte
microbiana. No se utiliza en materiales de
goma, PVC, metal y plástico al mismo
tiempo.

7. ¿Qué otros tipos de rayos a


diferentes longitudes de onda
emplean para esterilización?
R:
- Radiación de las ondas electromagnéticas
- Espectro electromagnético
- Rayos x, rayos gamma y rayos cósmicos
- Rayos ultravioleta
- Radiaciones ionizantes y no ionizantes

FOTOGRAFIAS
Imagen 2: Materiales preparados para
esterilizar y llevarlos posteriormente al
Imagen1: Materiales a preparar para el
horno.
proceso de esterilización.
Fotografía tomada por el estudiante Karime
Fotografía tomada por la estudiante Leydi
Parra Cifuentes.
"ESTERILIZACION POR CALOR
HUMEDO" ( I ).Disponible en :
http://los-
divinos.overblog.es/article-
32790565.html
4. Universidad del desarrollo. (2017,
enero). Equipamiento y operaciones
de laboratorio. Control
biológico de autoclaves.
Disponible en
“https://medicina.udd.cl/files/2017/
03/SOP-12-12.V02-Control-
Biol%C3%B3gico-
deAutoclaves.pdf”

5. Tecnología de los plásticos. (2011,


junio 6). Blog dedicado a los
Imagen 3: Materiales preparados para materiales plásticos, características,
esterilizar y llevarlos posteriormente a la usos, fabricación, procesos de
autoclave. 6. transformación y reciclado.
Fotografía tomada por el estudiante Natalia Politetrafluoruro de etileno.
Castellanos Cote. Disponible en
“https://tecnologiadelosplasticos.blo
gspot.com/2011/06/politetrafluoruro
-deetileno.html”
8. BIBLIOGRAFIA
7. Prácticas de Microbiología.
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https://es.vwr.com/store/product/57 https://fiestadelosmicroorganismos.
1101/indicadores-de-cintas-de- wordpress.com/2016/12/14/practica
-3-utilizacionde-la-autoclave/
esterilizacion
2. VWR PART OF AVANTOR.
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Indicadores de cintas de por el método de liofilización para el
esterilización. Disponible en control microbiológico en
https://es.vwr.com/store/product/57 Laboratorios Liorad. Autores.
1101/indicadores-de-cintas-de- Nancy Burguet Lago, Nelson Sierra
esterilizacion Prado, Lázaro C. Brito Godoy
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9. Laboratorio Químico .Mufla.


Disponible en:
https://www.tplaboratorioquimico.c
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e-instrumentosde-un-laboratorio-
quimico/horno-mufla.html

10. Desnaturalización de Proteínas:


Factores que la Provocan y
Consecuencias. desnaturalización de
las proteínas. Por Mariana Gelambi.
Disponible en:
https://www.lifeder.com/desnaturali
zacion-proteinas/

11. hisopos-operarla-urgencia-
infeccion-
craneo_0__Q14MWt_n.html

12. google imagenes . (30 de septiembre


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http://www.sakiramedical.com/prod
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13. patesdel.com. (1 de octubre de


2019). Obtenido de
https://www.partesdel.com/autoclav
e.html

14. Baamonde, J. M. (01 de julio de


2013). Bioterios. Obtenido de
https://www.bioterios.com/post.php
?s=2013-07-01-mtodos-de-
limpieza-desinfeccin-yesterilizacin

15. Equipos y laboratorio de colombia .


(s.f.). Obtenido de
https://www.equiposylaboratorio.co
m/sitio/contenidos_mo.php?it=1498