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Sara medaoud

sara
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Détermination de Km et V-MAX

La Km valeur pour le pyrogallol d'enzyme


libre est de 2,24 mM, tandis que notre
enzyme immobilisée a montré Km une
valeur de 4,86 mM (figure)

Ces résultats étaient en bon accord avec les rapports précédents pour les enzymes
immobilisées dans les gels d'alginate et ils semblent être le résultat de limitations de
diffusion qui se produisent dans les billes d'alginate.
Modification de HRP avec de l'éthylène diamine

Dissoute (1mg) de Ajoute 200 ul de périodate Laisse la solution à 4 ° C dans


peroxydase dans 2 ml de de sodium 50 mM l'obscurité pendant 6 h, sous
tampon NaHCO3 50 mM, agitation occasionnelle. Après 6 h
pH 8,0

oxydé par duoxydastion


périodate du
a été
HRpmélangé
par le placée la solution pour la Ajoute 10 μL de glycérol à
mélangé (périodate + dialyse contre de l'eau la solution finale et laissés
éthylènediamine) ( C finale distillée. reposer pendant 30 min
50 mM, pH 8,0) pendant 2
h

éliminaion de L'éthylènediamine HRP obtenu a été L'immobilisation de la HRP


addition de NaBH4 dans n'ayant pas réagi par dialyse aminée dans l'alginate
conservé dans un oxydé par le périodate a
NaOH 0,1 M ,C finale contre du tampon phosphate de
congélateur. été effectuée comme
étant de 1 mg / ml, sodium 0,1 M, pH 7,0, et ensuite décrit précédemment pour
contre de l'eau distillée l'immobilisation de la HRP
pendant 60 min à 4 ° C
native dans l'alginate
oxydé par le périodate .