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1-INTRODUCTION :

Assurer la qualité hygiénique et microbiologique d’un produit alimentaire est la


principale tâche de la microbiologie industrielle.

Cependant ; le contrôle microbiologique est effectué durant le processus de production


et il portera sur la matière première utilisée ainsi que le produit fini.

2-BUT DE TP : contrôle microbiologique d’un produit fini (boisson gazeuse).

3-PRINCIPE DE TP : réalisation des dilutions à partir d’une boisson gazeuse « ifri orange
0.33L », puis ensemencement sur plusieurs milieux de culture spécifiques à la recherche de
flores déterminées.

4- MATERIELS ET METHODES :

4.1-MATERIELS :

 Milieux de culture : PCA, GN, VRBL, OGA, Malt à 20% du glucose.


 Echantillon : boisson gazeuse « ifri orange 0.33L ».
- Boites de Pétri.
- Tubes à essai.
- Anse de platine.
- Etuve.
- Pipette pasteure.
- Pipette graduée.
- Etuves ( 37°c et 44°c).
- Balance électronique.
- Spatule.
- Bécher.

4.2- DEROULEMENT DU TP :

a- PREPARATION DE DILUTIONS :

On agite la bouteille et on ouvre le bouchon pour éliminer complètement le


gaz. A l’aide d’une pipette, on prélève 1ml de boisson gazeuse et on l’ajoute à un
volume de 9 ml d’eau physiologique à 0.9 % dans un tube à essai.

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Puis, on prélève 1ml de la dilution de 10-1 et on l’ensemence dans 9ml
d’eau physiologique (c’est la dilution 10-2 ).de la même manière on prépare les
dilutions suivants jusqu’à la dilution 10-6. ( Fig 1)

b- PREPARATION DE GELOSE MALT :

A l’aide d’une balance électronique on pèse 20g de glucose dans un Becher


stérile, puis on complète le volume jusqu’à 100ml par le gélose à l’extrait de Malt.

c- LA RECHERCHE DE LA FTAM :

La FTAM est une microflore complexe, constitue un élément majeur de la


population microbienne.

On prend 0.1 ml à partir d’une dilution de 10-5 et on ensemence deux boites de


pétri en surface de la gélose PCA, puis on fait l’incubation à 37°C/24h. (Fig.2)

d- LA RECHERCHE DES COLIFORMES ( CT ET CTT) :

 Les CT : Sont des bactéries très hétérogènes faisant partie de la famille des
enterobacteriaceae, ils comptent des espèces saprophytes d’environnement, et sont
des habitats spécifiquement intestinal des animaux homéothermes.
 Les CTT : sont spécifiques de tubes digestif de l’homme et des animaux
homéothermes, ils sont capables de fermenter le lactose en produisant des acides et
des gaz.

On ensemence en masse 04 boites de Pétri dont nous avons déjà coulé la


gélose VRBL par 0.25 ml de la dilution 10-3 pour les deux premières boites et par
0.25 ml de la dilution 10-2 pour les deux dernières boites . Puis on fait l’incubation à
37°C/24h et à 44°C/24h. (Fig.3)

e- LA RECHERCHE DES MOISISSURES :

A l’aide d’une pipette pasteur, on prélève 0.1 ml de la dilution 10-5 et on


ensemence deux boites de pétri qui contiennent de la gélose OGA, ensuite on réalise
un étalement en surface puis on fait l’incubation à 37°C/24h. (Fig.4)

f- LA RECHERCHE DE LA FLORE OSMOPHYLE :

C’est l’ensemble des microorganismes qui tolèrent la croissance dans des


concentrations élevés des sucres.

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A l’aide d’une pipette Pasteur, on prélève 0.1 ml de la dilution 10-5 et on
ensemence en surface deux boites de pétri à la gélose au malt .puis on effectue un
étalement sur tout la surface .et enfin on incube les deux boites à 37°C/24h. (Fig.5)

5- RESULTATS :

Culture négative sur toutes les boites incubées.

6- CONCLUSION:

Le produit analysé est parfaitement stérile.

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Incubation 37°c/24h

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