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Correction type du RAPPORT TP PHYSIOLOGIE HUMAINE

SECTION 1 : DESCRIPTION DE L’APPROCHE EXPERIMENTALE – TRACE


CONTRÔLE
1 – Description du dispositif expérimental et objectif du TP

Un segment de l’antre de l’estomac est virtuellement déposé dans une solution de liquide
physiologique. Les contractions/relaxations de l’organe isolé sont mesurées grâce à un transducteur de
force et converties en variations de voltage.

Ce dispositif permettra ainsi :


i/ de mettre en évidence l’activité mécanique spontanée de la paroi de l’estomac
ii/ de mettre en évidence les effets de l’acétylcholine et de l’adrénaline sur cette activité mécanique
iii/ de caractériser, par une approche pharmacologique, les récepteurs relayant les effets de chacune
de ces molécules

2 – Activité spontanée de l’antre de l’estomac.


Effectuer un enregistrement contrôle

Légende : Activité mécanique spontanée de l’antre de l’estomac (condition contrôle)


Vitesse : 1 cm / min
Résolution : 5mV / DIV

Décrivez l’enregistrement obtenu et discutez le résultat.


L’antre de l’estomac, maintenue dans un liquide de survie (solution de Krebs), présente une activité
mécanique rythmique spontanée. Cette activité mécanique est provoquée par les fibres musculaires
lisses de la paroi, qui se contractent et se relâchent de façon régulière (activité de segmentation).

Cette activité mécanique régulière et spontanée, qui persiste en l’absence d’innervation


extrinsèque, suggère l’existence de cellules Pacemaker localisées dans la paroi de l’antre de
l’estomac.

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SECTION 2 : PREPARATION DE L’EXPERIMENTATION VIRTUELLE

Solutions à préparer Volume de solution stock (mL) à


diluer dans un volume final de 10
mL de solutions de Krebs.
Acétylcholine 10-2 M 1,818 mL
Acétylcholine 10-3 M 0,182 mL
Acétylcholine 10-4 M 0,018 mL
Acétylcholine 10-5 M 0,002 mL
Atropine 10-4 M 1,354 mL
Atropine 10-5 M 0,135 mL
Adrénaline 10-2 M 1,801 mL
Adrénaline 10-3 M 0,180 mL
Adrénaline 10-4 M 0,018 mL
Adrénaline 10-5 M 0,002 mL
Phentolamine 10-3 M 0,379 mL
Propanolol 10-3 M 2,958 mL

Utilisez comme exemple la préparation d’une solution d’acétylcholine à la concentration de 10-2M


Solution stock d’acétylcholine à 10 g/L

C (mol/L) = m (g) / M (mol/L) x V (L)


C (Stock) = 10 / 181.7 = 0.055 mol/L

Pour obtenir une solution finale à 10-2 mol/L, il faut diluer la solution stock d’un facteur 5,5. Pour
préparer 10 mL d’une solution finale à 10-2M, il faudra donc :
1.818 mL de la solution stock et 8.182 mL de la solution de Krebs

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CTION 3 : EFFET DE l’ACETYLCHOLINE SUR l’ANTRE DE L’ESTOMAC
DOSE REPONSE
Acétylcholine 10-8M

Légende : Effet de l’acétylcholine (10-8M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac

Résolution utilisée : 5 mV / DIV

Acétylcholine 10-7M

Légende : Effet de l’acétylcholine (10-7M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac

Résolution utilisée : 10 mV /DIV

Acétylcholine 10-6M

Légende : Effet de l’acétylcholine (10-6M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac

Résolution utilisée : 20 mV / DIV

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Acétylcholine 10-5M

Légende : Effet de l’acétylcholine (10-5M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac

Résolution utilisée : 20 mV / DIV

Acétylcholine 10-4M

Légende : Effet de l’acétylcholine (10-4M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac

Résolution utilisée : 20 mV / DIV

Illustration graphique : Dose réponse

Graphique Issu du compte


rendu d’étudiants. 2020

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Commentez et expliquer vos résultats :
L’acétylcholine provoque une déflexion du tracé vers le haut, observable dès la concentration de 10-
8M. L’acétylcholine stimule donc la contraction des fibres musculaires lisses de la paroi de l’antre de
l’estomac.

Nous observons bien un effet-dose : l’amplitude de la déflexion du tracé augmente en fonction de


la dose d’acétylcholine utilisée.

L’effet maximal est obtenu pour une concentration d’acétylcholine de 10-5M. A cette concentration,
les récepteurs cholinergiques présents dans la paroi de l’estomac sont probablement « saturés ».

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Effet de l’Atropine
En vous aidant du panneau « Drugs », décrivez le composé actif, et identifiez quel est l’intérêt de son
utilisation pour ce type d’expérience, en complément de l’application d’acétylcholine.
L’atropine est un composé dérivé des plantes de la famille des Solanacées telles que la Belladone ou
encore le datura.

Il s’agit d’un antagoniste compétitif des récepteurs cholinergiques de type muscarinique.


L’utilisation de cette molécule va ainsi nous permettre de déterminer si les effets de l’acétylcholine
sur l’activité mécanique de l’estomac sont relayés par des récepteurs muscariniques.

Evaluer l’effet d’une application d’atropine à 10-6M

Illustration Issue du compte


rendu d’étudiants. 2020

Légende : Action de l’atropine à 10-6 M sur l’activité mécanique du segment de l’antre de l’estomac
Résolution utilisée : 5 mV / DIV

Décrivez l’effet obtenu, et proposez une expérience alternative pour mettre en évidence l’effet de
l’atropine sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac.
L’ajout d’atropine n’exerce aucun effet sur l’activité mécanique de segmentation de l’antre de
segmentation. L’atropine, comme tout antagoniste, n’exerce aucun effet propre.

Si l’effet de l’acétylcholine sur l’activité mécanique de l’estomac est relayé par des récepteurs
muscariniques, celui-ci devrait donc être bloqué par une pré-incubation de l’organe en présence
d’atropine.

Mise en œuvre de l’expérience alternative.


Décrivez votre protocole expérimental, en n’omettant pas d’indiquer les doses utilisées. Vous
quantifierez l’effet obtenu en utilisant comme contrôle la réponse obtenue après application
d’acétylcholine (10-7M).
Nous allons pré-incuber l’organe à la concentration finale de 10-6M d’atropine pendant deux
minutes (injection de 300µL d’une solution à 10-4M), puis ajouter l’acétylcholine à la concentration
finale de 10-7M (injection de 30 µL d’une solution à 10-4M).
Nous comparerons ce résultat avec celui préalablement obtenu en présence d’acétylcholine seule
(10-7M).

Illustrer le résultat obtenu – Vous pouvez décider d’illustrer avec plusieurs graphiques, pour illustrer
l’expérience alternative que vous proposez. Et surtout, soyez explicite dans vos titres !

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Illustrez le résultat obtenu :

Légende : Les effets de l’acétylcholine (10-7M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac sont totalement bloqués
par une pré-incubation en présence d’atropine (10-6M)

Résolution utilisée : 10 mV / DIV

Commentez brièvement (5 lignes max.) le résultat obtenu :


La pré-incubation en présence d’atropine bloque totalement les effets de l’acétylcholine sur l’activité
mécanique de l’antre de l’estomac. Les effets de l’acétylcholine sont donc bien relayés par des
récepteurs de type muscarinique.

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SECTION 4 : EFFET DE l’ADRENALINE SUR l’ANTRE DE L’ESTOMAC
Effet de l’adrénaline

Dose-réponse
Adrénaline 10-8M

Légende : Effet de l’adrénaline (10-8M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac.

Résolution utilisée : 5 mV / DIV

Adrénaline 10-7M

Légende : Effet de l’adrénaline (10-7M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac.

Résolution utilisée : 10 mV / DIV

Adrénaline 10-6M

Légende : Effet de l’adrénaline (10-6M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac.

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Résolution utilisée : 10 mV / DIV

Adrénaline 10-5M

Légende : Effet de l’adrénaline (10-5M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac.

Résolution utilisée : 10 mV / DIV

Commentez et expliquer vos résultats :


10 lignes maximum
L’adrénaline provoque une déflexion du tracé vers le bas, observable dès la concentration de 10-8M.
L’adrénaline provoque donc une relaxation des fibres musculaires lisses de la paroi de l’antre de
l’estomac.

Nous observons bien un effet-dose : l’amplitude de la déflexion du tracé augmente en fonction de


la dose d’adrénaline utilisée.

L’effet maximal est obtenu pour une concentration d’adrénaline de 10-5M.

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Effets du propanolol et de la phentolamine
- En vous aidant du panneau « Drugs », quelle hypothèse de travail pouvez-vous tester par
l’utilisation de la phentolamine et du propanolol ?
La phentolamine est un antagoniste des récepteurs adrénergiques de type alpha, tandis que le
propanolol est un antagoniste des récepteurs de type beta.

L’utilisation de ces composés va ainsi nous permettre de définir si les effets observés de l’adrénaline
sont relayés par des récepteurs adrénergiques de type alpha ou beta.

Nous procéderons à une pré-incubation de l’antre de l’estomac en présence de l’un ou l’autre des
antagonistes (2 minutes), avant de tester les effets de l’application d’adrénaline.

Effet du Propanolol

Légende : Les effets de l’adrénaline (10-7M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac sont totalement bloqués par
une préincubation en présence de propanolol (10-6M)

Résolution utilisée : 10 mV / DIV

Effet de la Phentolamine

Légende : Les effets de l’adrénaline (10-7M) sur l’activité mécanique de l’antre de l’estomac ne sont pas altérés par une
préincubation en présence de phentolamine (10-6M)

Résolution utilisée : 10 mV / DIV

Décrivez et commenter les résultats obtenus.

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Une préincubation de l’antre de l’estomac en présence de propanolol bloque totalement l’effet de
l’adrénaline ; cet effet de l’adrénaline n’est pas altéré par une préincubation en présence de
phentolamine.
Ces expériences nous permettent donc de conclure que l’effet relaxant de l’adrénaline sur les fibres
musculaires lisses de la paroi de l’estomac est totalement relayé par des récepteurs adrénergiques
de type beta.

SECTION 5 : CONCLUSION GENERALE


Sur la base de l’ensemble des résultats obtenus au cours de ce TP, rédigez une conclusion relative à la
régulation de l’activité mécanique de l’antre de l’estomac par le système nerveux autonome et
l’adrénaline. Pour ce faire, ayez en tête que l’utilisation de noradrénaline aurait conduit aux mêmes
résultats que ceux que vous avez obtenus avec l’adrénaline.
15 lignes maximum

Les cellules musculaires lisses de la paroi de l’estomac sont sous le contrôle :


- de cellules Pacemaker, localisées entre les deux sous-couches de la musculeuse. Ces cellules
Pacemaker contrôlent, indépendamment de l’innervation extrinsèque, les cycles de
contraction/relaxation des fibres musculaires lisses circulaires, et ainsi, la fréquence de l’activité
mécanique.
- des branches ortho- et parasympathiques du système nerveux autonome.

Les traitements à l’acétylcholine réalisés au cours de ce TP miment les effets, in vivo, de la libération
d’acétylcholine par les neurones post-ganglionnaires parasympathiques. Nos expériences illustrent
ainsi les effets globalement stimulants du système parasympathique, via des récepteurs
muscariniques, sur l’activité mécanique de la paroi du tube digestif.

L’adrénaline appliquée dans nos expériences mime les effets, in vivo, de la libération de
noradrénaline par les neurones post-ganglionnaires de la branche orthosympathique. Ce TP illustre
ainsi l’effet inhibiteur du système orthosympathique sur l’activité mécanique du tube digestif, via
des récepteurs beta-adrénergiques.

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