Antibióticos

Pruebas de sensibilidad
Antibióticos según su mecanismo de acción
 Antibiograma
• Podemos dividir los antibiogramas en dos
grupos, sobre la base de su complejidad
técnica.
1. Antibiograma de rutina
2. Antibiograma especial
 Antibiograma de Rutina
Antibiograma por Difusión en agar. Técnica de
kirby Bauer.
• Es el método mas usado.
• Es práctico y sencillo de realizar.
• Permite analizar un gran número de
antibióticos al mismo tiempo.
• Entrega un resultado cualitativo: Sensible o
Resistente.
 Antibiograma por Difusión en agar. Técnica de kirby
Bauer.
• Consiste en enfrentar discos de papel impregnados con
determinada cantidad de antibioticos a un inóculo de
densidad establecida (108 UFC/ml) distribuido sobre una base
de agar Medio Mueller Hinton.
• Luego de una incubacion adecuada, 24 hs a 35 C, se miden los
halos de inhibicion, determinandose, si la bacteria en estudio
es S, I o R.
• Si bien, existen a nivel mundial diversas sociedades científicas,
que se ocupan de la estandarizacion de la metodologia de la
prueba de sensibilidad y de su interpretacion, en nuestro pais
se utiliza las recomendaciones del CLSI de USA.
 Antibiograma por Difusión en agar.
Técnica de kirby Bauer.
• Para lograr resultados exactos y reproducibles deben
seguirse exactamente las recomendaciones establecidas en
cuanto al medio de cultivo, concentracion del ATB en los
discos, condiciones de incubacion y densidad del inóculo.
• Se recomienda utilizar no mas de 6 monodiscos por placa
de 9 cm de diametro y un control de calidad interno con
cepas ATCC.
• El procedimiento de difusión se ha estandarizado para
gérmenes de rápido crecimiento como Enterobacterias, P.
aeruginosa, Acinetobacter spp, estafilococos, enterococos y
fueron modificados para Haemophilus, Neisseria y
Streptococcus spp.
Agar Mueller Hinton
Antibiograma por Difusión en agar. Técnica de kirby Bauer.

1. Preparación de MH.
Medir cationes, pH, mm de espesor.
Realizar control de calidad del medio

Agar Mueller Hinton

2. Preparación del inóculo.

Preparar un Sn 0,5 MF con el
microorganismo a estudiar.
3.Hisopar la placa de MH con la Sn
0,5 MF, en tres direcciones.

4. Colocación de los discos ATB.

Se pueden colocar manual con
pinza o con un dispensador.
 5. Incubar la placa 24 hs a 35 grados C.

6. Interpretación
Medición de halos, establecer si es S, I o R
 Antibiogramas especiales
• Bajo este rubro consideramos a los antibiogramas cuantitativos.
Determinación de CIM y CBM.
• CIM. Concentración inhibitoria mínima, mide la actividad bacteriostática
de las drogas antibacterianas, y esta dada por la mínima concentración,
expresada en ug/ml, capaz de detener el desarrollo visible de un cultivo.
• En cambio, la CBM. Concentración bactericida mínima, mide la actividad
letal de estas drogas, expresada en ug/ml. En una dilución seriada. Solo
será posible evidenciar la CBM mediante subcultivos cuantitativos en
medios solidos de los tubos en los que no se observa crecimiento
bacteriano. La CBM estará dada por la menor concentración de atb que
mata el 99,9% de las bacterias iniciales.
• En los antibióticos bactericidas, los valores de CIM y CBM son iguales o
muy cercanos, en cambio en los Atb bacteriostáticos, ambas
concentraciones están muy alejadas entre si.
• Esta técnica es aplicable a todo tipo de bacterias, aisladas en materiales
clínicos, sea aerobia o anaerobia.
• Las técnicas cuantitativas están estandarizadas por el CLSI.
• Los ensayos individuales se hacen en tubo, dilución en caldo, y los
múltiples mediante dispositivos multiinoculadores, dilución en agar.
CIM y CBM
 Antibiograma - Etest

Consiste en aplicar sobre un medio

de cultivo, MH, donde se encuentra
el microorganismo a ensayar, tiras
de plástico, que llevan incluidas un
gradiente de concentración de un
determinado antibiótico. Luego se
incuba adecuadamente y se observa
la formación de un elipse de
inhibición de crecimiento.
 Interpretación de resultados
• Sensible. Un microorganismo ubicado en esta categoría,
implica que la dosis de antibiótico usada habitualmente
será efectiva en el tratamiento del tipo de infección
producida por dicha bacteria. En este caso las
concentraciones séricas y tisulares son superiores a la
concentración inhibitoria mínima.
• Intermedio. Esta categoría incluye aquellas cepas cuyos
valores de CIM se alcanzan usualmente en sangre y en
tejidos en los cuales la respuesta terapéutica es menor que
para las cepas sensibles.
• Resistente. Implica que el antibiótico no debe utilizarse, ya
que sus concentraciones séricas no son suficientes para
inhibir el desarrollo bacteriano.
Antibiograma. Urocultivo