POTENTIEL D’EXTRACTION DE BIOMOLÉCULES À FORTE VALEUR

COMMERCIALE D’UNE PRODUCTION MARICOLE :

L’ÉLEVAGE DU LOUP DE MER.

Blier, P.U. 3 , N.R. Le François 1,2 , G. Fletcher 3 , J.-D Dutil 4 , M. Desjardins 1 , D. Ditlecadet 1 , V. Desrosiers 1 .

# 101104 Durée : 2001-2004

FAITS SAILLANTS
Cette étude a évalué les perspectives d’extraction de biomolécules notamment les protéines
antigels (PAG) et les enzymes digestives (ED) chez le loup de mer, un groupe d’espèces de
poissons marins à fort potentiel pour l’élevage au Québec (Le François et coll. 2002). Le profil
annuel de synthèse des protéines antigel a été caractérisé selon l’espèce, le stade de
développement et le régime thermique. Le loup atlantique est l’espèce qui produit les plus
grandes concentrations de PAG. La température semble être l’agent déterminant dans la
régulation de cette synthèse et les perspectives de modulation de cette synthèse devront être
éventuellement évaluées. Chez le loup atlantique la concentration en PAG augmente avec la taille
et est maximale au cours de l’hiver et ce, même à température fixe ce qui indique un effet de
saisonnalité probablement lié à la photopériode. Le loup tacheté ne produit pas de PAG en
quantité appréciable, mais démontre toutefois une grande résistance aux températures au-dessous
de -1ºC. Au chapitre des enzymes digestives, deux études complémentaires ont été réalisées en
ciblant le loup atlantique. La première a révélé que la température d’acclimatation n’a que très
peu d’effet sur l’activité des enzymes digestives et métaboliques alors que la taille a un effet
significatif. La deuxième étude en cours a pour objectif de caractériser l’enzyme digestive
trypsine en étudiant ces propriétés fonctionnelles (analyse de cinétique). L’extraction de la
trypsine a obtenu une purification de facteur 40, ce qui s’avère très satisfaisant. L’utilisation
d’une technique novatrice dans le procédé d’extraction : l’ultrafiltration a été expérimentée et se
révèle être simple, rapide et abordable. À titre préliminaire, nos résultats de caractérisation
suggèrent que la trypsine de loup de mer démontre des caractéristiques différentes
comparativement à la trypsine bovine et à celles d’autres espèces de poissons marins.

OBJECTIF ET MÉTHODOLOGIE
Le premier objectif de la recherche était de quantifier et de comparer le profil de synthèse annuel
et la capacité de production des protéines antigel chez deux espèces de loup de mer d’intérêt
maricole au Québec, le loup atlantique et le loup tacheté. L’effet de la taille (adulte, 2+ et 1+) et
de la température (température saisonnière, température fixe) a été évalué sur un cycle annuel en
bassins. Le second objectif était d’évaluer l’effet de la température et de la taille sur le niveau
d’activité d’enzymes digestives et métaboliques. Deux températures (0,5 et 13,5ºC) et deux tailles
(1+, 2+) de loup atlantique ont été ciblées pour nos essais (trypsine, lipases, amylase HOAD,
AAT, GDH, PK, LDH, CS et CCO). Le troisième objectif était de procéder à la caractérisation de

3
Département de Biologie et des Sciences de la Santé, Université du Québec à Rimouski, Rimouski, QC G5L 3A1
2Centre Aquacole Marin de Grande-Rivière, Grande-Rivière, QC G0C 1V0
3
Memorial University of Newfoundland, St-John’s, Newfoundland
4
Pêches et Océans Canada, Institut Maurice Lamontagne
l’enzyme digestive trypsine en procédant à l’extraction de cet enzyme du tractus digestif, la
purification (ultracentrifugation) et la cinétique enzymatique en fonction de la température et du
pH.

RÉSULTATS SIGNIFICATIFS POUR L’INDUSTRIE

VOLET PROTÉINES ANTIGEL :

Le loup atlantique produit des PAG tout au cours de l’année et ce, même s’il est maintenu sous
un régime thermique fixe. Les plus hautes concentrations en PAG ont été mesurées au cours du
mois de février et les plus faibles en juin. À régime thermique stable durant tout une année, on
notait une élévation des valeurs d’hystérèse thermique et de concentration en PAG à l’approche
de l’hiver, ce qui confirme un effet de saisonnalité probablement lié à la photopériode.
Comparativement au loup atlantique, le loup tacheté ne produit très peu de PAG malgré une
exposition prolongée aux conditions hivernales (température de l’eau au-dessous de –0,7ºC
atteinte en février). D’autres mécanismes de protection sont soupçonnés chez cette espèce. La
production de PAG augmente avec la taille. On note une forte variabilité interindividuelle au sein
d’une même espèce et d’un même groupe, ce qui suggère un potentiel de sélection génétique pour
ce trait recherché.

Tableau 1. Valeurs moyennes d’hystérèse thermique (H) exprimées en ºC et de concentration en

protéines antigel (PAG) exprimée en mg·ml-1 pour le loup atlantique (Anarhichas lupus) en
fonction de la saison ( été et hiver) et du stade de développement (adulte, 2+ et 1+).

STADE HIVER ÉTÉ

HT/ [PAG] HT/ [PAG]

Adulte 0,83 ± 0,16ºC /17,92 ± 5,97 mg·ml-1 0,34 ± 0,15ºC/3,34 ± 2,93 mg·ml-1
2+ 0,81 ± 0,25ºC /16,80 ± 3,88 mg·ml-1 0,26 ± 0,09ºC/1,75 ± 1,15 mg·ml-1
1+ 0,63 ± 0,20ºC /10,63 ± 0,53 mg·ml-1 0,25 ± 0,06ºC/6,53 ± 0,71 mg·ml-1

VOLET ENZYMES DIGESTIVES :

La taille et non la température a un effet sur le niveau d’activité des enzymes digestives et
métaboliques dans la gamme de températures que nous avons expérimentées (0,5-13,5ºC) chez le
loup atlantique. L’activité de la trypsine, chymotrypsine AAT, GDH, lipase, CS, CCO, PK et
LDH est significativement plus élevée chez les individus 2+ comparativement aux 1+.

Des résultats préliminaires indiquent que la trypsine extraite du tractus digestif du loup atlantique
et purifiée, possède des caractéristiques intéressantes et différentes de la trypsine bovine ou celle
d’autres espèces de poissons. Ces résultats suggèrent que la trypsine du loup atlantique par ses
caractéristiques distinctes, pourra éventuellement trouver ses propres applications biotechnologi-
ques.

2
APPLICATIONS POSSIBLES POUR L’INDUSTRIE
Le loup atlantique (Anarhichas lupus) est une espèce à statut pré-commercial (Norvège : 300
tonnes 2004-2005) orientée vers l’approvisionnement de marché de niche (restauration haut de
gamme) dont le cycle d’élevage est contrôlé et pour laquelle les avenues de diversification
intégrées sont très intéressantes (biomolécules : PAG, ED, cuir)(Le François et coll. 2004). Le
développement de cette activité maricole dans l’Est du Québec est au stade-pilote.

Si l’on considère les protéines antigel comme des biomolécules à fort intérêt commercial dans un
contexte de production maricole, le volume sanguin, les concentrations plasmatiques et la
capacité de contrôle de la synthèse de ces protéines seront déterminants dans l’évaluation de la
rentabilité de cette activité de diversification et de commercialisation (loup atlantique > loquette
d’Amérique >plie rouge). Au chapitre des enzymes digestives, l’absence d’impact significatif de
la température sur le niveau d’activité enzymatique, mais pas de la taille chez le loup atlantique
est une observation intéressante dans un contexte de production maricole. Cette caractéristique
devrait être mieux exploitée dans son application concrète lorsque les résultats complets de la
cinétique de la trypsine seront complétés dans nos laboratoires.

POINT DE CONTACT
Dr Nathalie Le François UQAR/MAPAQ
Tél. : 418-385-2251 (poste 222)
Télécopieur : 418-3853343
Courriel : Nathalie_Le-Francois@uqar.qc.ca

AUTRES TRAVAUX DE L’AUTEURE/RÉFÉRENCES SUR LE MÊME SUJET

Ewart, K.V. & C.L. Hew. 2002. Fish antifreeze proteins (Molecular aspects of fish and marine
biology, V.1) World Scientific Publ. 248 pp.

Le François, N.R., M. Desjardins & P.U. Blier. 2004. . Enhancement of profitability

perspectives of an aquaculture production by the extraction of high commercial value
biomolecules : evaluation of the potential of wolffish cultivation. In: Seafood quality and safety:
Advances in the new millennium (F. Shahidi & B.K. Simpson eds.) Pp: 61-69. Science Tech
Publ. St-John’s NL, Canada, 381 pp.

Le François N.R. & P.U. Blier. 2002. Extraction of high-value biomolecules to diversify
mariculture production of wolffish. AAC spec. Publ. 102-2 : pp. 20-22

Le François, N.R., Lemieux, H. & P.U. Blier. 2002. Biological and technical evaluation of the
potential of marine and anadromous fish species for cold-water mariculture. Aquaculture
Research 33 : 95-108.

PARTENAIRES FINANCIERS
L’équipe de recherche tient à remercier le ministère de l'Agriculture, des Pêcheries et de
l'Alimentation pour son soutien financier, de même que le Réseau Aquaculture Québec (RAQ).