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CAPiTULO 8

Cadena respiratoria terminal

Como se menciono anteriormente, en la cadena respiratoria terminal, la energia necesaria


para la sintesis del ATP por medio de la fosforilacion oxidativa se obtienen de la oxidacion del
NADH2 y FADH2. Antes de entrar en una descripcion de este mecanismo, es necesario discutir
algunos aspectos de la termodinamica de las oxidaciones biologicas.

Dentro de todas las reacciones que se producen en los sistemas vivos, un gran numero de
ellas son procesos de oxidacion 0 de reduccion: La respiracion, oxidaciones anaerobias,
fermetaciones, fotosintesis, reduccion del sulfato 0 del nitrato, denitrificacion, fijacion del
nitrogeno, etcetera.
La definicion mas general de la oxidacion corresponde a la perdida de electrones y la
definicion de reduccion es la ganancia de electrones. Por ejemplo, en la reduccion del fierro:

donde el ion ferrico (Fe3+) es la forma oxidada y el ion ferroso (Fe2+)es la forma reducida. EI
par redox 0 pareja reductor/oxidante es la pareja del componente en sus estados oxidado y
reducido:
Fe3+/ Fe2+

Una mezcla de la forma reducida y de la forma oxidada de una sustancia se denomina


sistema redox. Un sistema redox aislado no evoluciona considerando la reaccion reversible
anterior en la cual es evidente que cuando la forma oxidada toma "z" electrones a la forma
reducida, esta se transforma en la forma reducida y la forma reducida se convierte en oxidada,
sin cambiar la relacion entre las formas reducidas y oxidadas. Para evolucionar un sistema redox,
ya sea hacia una forma reducida 0 hacia una forma oxidada, resulta necesario suministrar 0
eliminar electrones. La primera cosa a realizar es introducir otro par redox y mezclarlo dentro de
la misma solucion. Por ejemplo, la oxidacion de ion ferroso por medio del ion cuprico:

Fe2++ Cu2+ ~ Fe3+ + Cu+


Cuando existen dos 0 mas sistemas redox se tiene una reaccion de oxidorreduccion.
Tabla 8.1 Electronegatividad, en la escala de Pauling, de algunos elementos biologicamente
importantes
Azufre 2.5
Boro 2.0
Cabo 1.0
Carbono 2.5
Cobre 1.9
Fierro 1.8
Fosforo 2.1
Hidrogeno 2.1
Nitrogeno 3.0
OXlgeno 3.5
Potasio 0.8
Sodio 0.9

EI grado de oxidacion se refiere a la diferencia del numero de electrones en la ultima


orbita de un elemento, entre su estado basal 0 fundamental y su estado actual. Por ejemplo,
el fierro para pasar del estado basal Fe al estado ferroso Fe2+ pierde dos electrones. De la
misma manera, el grado de oxidacion del ion ferrico es +3. EIyodo se reduce cuando gana un
electron para producir el ion yoduro (1-) teniendo un grado de oxidacion igual a - 1.
Para poder determinar el grado de oxidacion de un elemento en una estructura molecular
es necesario introducir la nocion de electronegatividad. Cuando dos atomos se encuentran
unidos covalentemente (A:B), el doblete 0 par de electrones, que 105 une, estara mas proximo
a uno de ellos. Se considera que el atomo que tiene el doblete mas cerca es Iigeramente mas
negativo y entonces se dice que es mas electronegativo. Un razonamiento cuantitativo hecho
por el qUlmico Linus Pauling, dio origen a una escala de electronegatividad que lIeva su
nombre (Tabla 8.1).
EI calculo del grado de oxidacion de 105 elementos en una molecula, se efectua
adjudicando convencionalmente al elemento mas electronegativo 105 dos electrones de un
enlace. En el caso de un enlace entre dos atomos con la misma electronegatividad, se Ie
adjudica un electron a cada atomo.
Consideremos por ejemplo al metano, CH4. EI carbon, teniendo una electronegatividad
superior a la del hidrogeno dentro de la escala de valores de Pauling (2.5 contra 2.1), es al
carbono al que se Ie atribuye el par de electrones, 0 sea un total de ocho electrones. EI
carbono es su estado basal posee cuatro electrones en su ultima orbita, de donde su grado de
oxidacion sera 4-8 = -4. Estees el grado de oxidacion mas bajo posible para el carbona, 0 sea
que en el metano, el carbono se encuentra en la forma mas reducida.
Comparemos ahora dos moleculas de estructura similar, el lactato y el piruvato.

OH 0
I /
CH -CH-C
3 "-
0-
Para am bas moleculas, al carbono del grupo metilo (CH3-) se Ie adjudican 105 seis
electrones de 105 enlaces C-H y un solo electron del enlace C-C (el par se reparte con
un electron para cad a ,llomo de carbon), 0 sea un total de siete.
De donde el grado de oxidacion de ese carbono en ambos casas sera de 4-7= -3.
Tambien para ambas moleculas, el carbon del grupo carboxilo (COO-) se queda con un
electron del enlace C-C y no se Ie adjudica ninguno proveniente de 105 enlaces con el oxfgeno,
ya que este es mas electronegativo que el carbono. EI grado de oxidacion del carbono del
grupo carboxilo sera de 4-1 = + 3. Aplicando el mismo razonamiento en el carbo no intermedio,
en el caso del ion lactato, el carbono tiene tres electrones, dos del hidrogeno y uno de cada
carbona, vecino, de donde su grado de oxidacion es O. En el caso del piruvato, este carbono
solo tiene dos electrones de 105 dos enlaces con 105 carbonos vecinos, de donde su grado de
oxidacion es +2. Asf aumenta en dos unidades el grado de oxidacion del segundo carbono
cuando ellactato se transforma en piruvato. Esteproceso es, entonces, un proceso de oxidacion.
Los iones de piruvato y lactato forman un par redox obedeciendo a la siguiente ecuacion:
o 0 OH 0
~ II \ II
CH .J-c-c-o-+ 2W + 2e- ~ CH .J-c-c-o-
I
H

Algunos de 105 acarreadores de electrones que participan en el metabolismo, hacen


intervenir dobles enlaces conjugados. Consideremos la parte de la molecula del NAD 0 del
NADP que interviene en la reaccion de oxidorreduccion, todo el resto de )a molecula esta
representado por R y apliquemos las reglas antes usadas para calcular el grado de oxidacion.
~ 0 H
(-1) II "'" r-;; H 0
II
H" /C~ /C"'" H" /C"'" /C"'"
] T NH2 + 2e- + 2W ~ ] TI NH2
/C"'" /.t:: J
/C"'" /C~
H N+ H H N H
I I
R R
Los grados de oxidacion de 105 dos carbonos que modifican su estado redox estan
indicados entre parentesis. Para estos dos atomos, el grado de oxidacion cambia de 0 (-1+1)
para la forma oxidada a un valor de -2 (-2 + 0) en la forma reducida. Esto significa que se trata
de un proceso de oxidorreduccion con la participacion de dos electrones. Desde el punta de
vista de la estructura molecular, es posible apreciar que el sistema de dobles enlaces conjugados
implica tres carbonos y un nitrogeno participando en la reaccion de oxidorreduccion.
De la misma manera, la oxidorreduccion del grupo prostetico de las flavoprotefnas,
como el FAD, se describe con la siguiente ecuacion:
o
II
C)Q(H3 N~ C!+2J
/C" N/H

CH
3
O I
/C~/C~ "'::::0
N (+3) N
I + 2e- + 2W ~

I
R
Es una vez mas, el sistema de dobles enlaces conjugados los afectados por la oxi-
dorreduccion, pero intervienen dos carbonos y dos nitrogenos.
Tambien en el caso de las quinonas, el sistema de dobles enlaces conjugados constituye
la base de sus propiedades de oxidorreduccion. Si R representa la cadena isoprenoica y
R' = CH3 en el caso de la ubiquinona de las mitocondrias 0, R' = CH3 Y R"= -H en el caso de
la plastoquinona en los c1oroplastos, la ecuacion de oxidorreduccion se escribe de la siguiente
manera:

Como 10 muestra la ecuacion 6.2, es posible obtener energia libre 0 trabajo cuando se
tienen un potencial electrico

De la misma manera que el pKa, en la quimica de la relacion acido-base, representa una


medida cuantitativa de la tendencia de un acido a perder un proton, existe en la quimica de la
oxidorreduccion un parametro cuantitativo que define la facilidad de un compuesto a perder
electrones 0 ser oxidado. Debido a que este compuesto puede considerarsele co·mo un agente
reductor este valor se denomina potencial reductor estandar 0 E'o. En el equilibrio acido-
basico se toma arbitrariamente al agua como neutral con un pKa igual a 7. Cualquier compuesto
con un valor de pKa menor a 7, el cual tendera a protonar el agua, se considera un acido y los
compuestos que tienden a ser protonados por el agua se les conoce como bases. En la
termodinamica de oxidorreduccion, se emplea tambien un estandar de referencia que es el
electrodo de hidrogeno estandar en una celda electroquimica.
EI electrodo de hidrogeno es un sistema redox electroactivo, 2H+/H2, que se construye
con una lamina de platino recubierta por una espuma del mismo platino depositada
electroliticamente (negro de platino), sumergida en una solucion de HCI a la cual se Ie hace
burbujear hidrogeno (figura 8.1).
La reaccion de oxidorreduccion puede escribirse de la siguiente manera.

H2 f----7 2H+ + 2e-

Cuando se tiene un medio con un pH = 0 y se burbujea hidrogeno a 1 atm de presion,


se obtiene un electrodo de hidrogeno estandar.
Esta media celda electroquimica se caracteriza por el hecho de que la actividad de los
protones y la actividad del hidrogeno son iguales a 1. Sabiendo que solamente las diferencias de
potencial, y no 105 potenciales, tienen un significado fisico, se ha impuesto la convenci6n de
que el potencial del electrodo de hidr6geno estandar es igual a 0 a todas las temperaturas. La
termodinamica redox utiliza el electrodo de hidr6geno estandar como referencia en una celda
electroquimica.
Una celda electroquimica consiste en dos medias celdas, cada una conteniendo un
donador de electrones y su respectivo aceptor (figura 8.2). En el diagrama, el lado izquierdo

1 M Fe+2
1 M Fe+3
de la celda electroquimica es una media celda consistente en el electrodo de hidr6geno estandar.
La otra media celda contiene una mezcla de donador y aceptor de electrones, ambos en una
concentraci6n de 1 M. En este ejemplo, la celda contienen 1 M de iones ferricos y 1M de iones
ferrosos.
La neutralidad electrica se conserva par medio del contacto de un puente de agar salino.
EIgalvanometro que se une alas dos medias celdas mide la fuerza electrornotriz 0 fern, en volts.
Esta es la medida del potencial (0 presion) de 105 electrones fluyendo desde una media
celda hasta la otra. Dependiendo de si el hidrogeno (H2) tiene mayor 0 menor tendencia a
perder electrones que el donador de electrones ensayado, 105 electrones fluiran en un sentido
o en otro. Si el H2 pierde sus electrones con mayor facilidad que el donador de electrones
ensayado, 105 electrones fluiran del electrodo de hidr6geno hacia la celda de medicion, oxidado
el H2 en H+ y obteniendo una fem positiva. Por el contrario, si el donador de electrones de la
celda de medicion pierde mas facilmente 105 electrones que el H2, este se oxidara y el flujo de
electrones sera de la celda de medici6n hacia el electrodo de medicion, obteniendo en el
galvan6metro una fem negativa.
La tendencia de un donador de electrones en reducir su respectivo aceptor es el potencial
reductor, como se mencion6 anteriormente.
En condiciones estandar, 250 C y 1M de donador y aceptor de electrones, este potencial
se denomina potencial reductor estandar E'o.
Cuanto mayor sea el valor de E'0 para un par redox, mas fuerte es como oxidante el
aceptor de electrones del par. Por ejemplo, sabemos por experiencia que el ion ferrico es un
oxidante fuerte. Esto se confirma cuando se mide la fem del par redox Fe3+/Fe2+en la celda
electroquimica de referencia, en don de se obtiene un valor de E'o = + 0.77 V. Los valores de
E'0 para algunos de 105 pares redox de interes en biologia se muestran en la tabla 8.2.
En la celda electroquimica se tiene la siguiente reaccion.

[0 ]a [H ]n/2
~C = -z FE = ~CO+RT In x
[Redt [H+
2

r
Si se define la fuerza electromotriz estandar 0 fem estandar como
~CO
E =---
o F
la fem de la celda estara descrita por la siguiente ecuaci6n:

[Ox)" [H2f/2
[Redt [H+ r
Como una de las mitades de la celda es siempre el electrodo de hidrogeno estandar,
podemos escribir:
Tabla 8.2 Potenciales reductores estandar de interes en biologia
Oxidante Reductor z E'0 (volts)
Acetato + C02 Piruvato 2 -0.70
Succinato + C02 u-Cetoglutarato 2 -0.67
Acetato Acetaldehido 2 -0.60
02 02 1 -0.45
Ferredoxina (ox) Ferredoxina (red) 1 -0.43
2W H2 2 -0.42
Acetoacetato ~-hidroxibutirato 2 -0.35
Piruvato + C02 Malato 2 -0.33
NAD+ NADH + W 2 -0.32
NADP+ NAPH + W 2 -0.32
FMN FMNH2 2 -0.30
Lipoato (ox) Lipoato (red) 2 -0.29
l,3-Bifosfoglicerato Gliceraldehido3-fosfato+Pj 2 -0.29
Glutationa (ox) Glutationa (red) 2 -0.23
FAD FADH2 2 -0.22
Acetaldehido Etanol 2 -0.20
Piruvato Lactato 2 -0.19
Oxaloacetato Malato 2 -0.17
u-cetoglutarato+NH4+ Glutamato 2 -0.14
Azul de metileno (ox) Azul de metileno (red) 2 -0.01
Fumarato Succinato 2 +0.03
CoQ CoQH 2 +0.04
Citocromo b (+3) Citocromo b (+2) 1 +0.07
Deshidroascorbato Ascorbato 2 +0.08
Citocromo c1 (+3) Citocromo c1 (+2) 1 +0.23
Citocromo c (+3) Citocromo c (+2) 1 +0.25
Citocromo a (+3) Citocromo a (+2) 1 +0.29
1/2 02 + H20 H202 2 +0.30
Ferricianuro Ferrocianuro 2 +0.36
Nitrato Nitrito 1 +0.42
Citocromo a3(+3) Citocromo a3 (+2) 1 +0.55
Fe (+3) Fe (+2) 1 +0.77
1/202 + 2W H20 2 +0.82

[Ox]a
E'=E' + RTIn---
o zF [Redt

Estarelaci6n es laecuaci6n de Nernst y define el potencial de oxidorreducci6n 0 potencial


redox de un par.
N6tese que esta ecuaci6n es similar a la de Henderson-Hasselbalch:

[aceptor de protones]
pH = pKa + In ---------
[donador de pro tones ]

de la misma manera que al pKa se Ie define como el punta medio de la curva de titulaci6n, al E'0
se Ie considera como el punta medio de la titulaci6n electroquimica donde el aceptor y donador
de electrones se encuentran en la misma concentraci6n.

Ejemplo 8.1 Por medio de 105potenciales redox resulta posible determinar la constante de
equilibrio de la reacci6n de oxidorreducci6n catalizada por la lactato deshidrogenasa.

Piruvato + NAOH + H+ ~ lactato + NAO+

o 0 OH 0
II # I #
CH -C-C + 2H+ + 2e- ~ CH -CH-C
3 '\ 3 '\

0- 0-

E'0 (piruvato/lactato) = -0.19 Volts


E'o(NAO+/NAOH2) = 0.32 Volts

E'(pir/lac)=E~(pir/lac)+ RT In [Piruvato]
zF [Lactato]

Si la reacci6n de oxidorreducci6n se encuentra en el equilibrio, se tiene E'0 (pir/lac)


= E' (NAP+/NAOH) Y se tendra:

RT [Iactato] [NAO+]
M~ =~ (NAO+ /NAOH) - ~(pir/lac)=-In-. ----
. zF [plruvato] [NAOH2]

zF I [lactat0l[NAO+] -InK
- ~Eo = In -------
RT [piruvato)[NAOH]
(2) (96 500) •
InK= ( )( ) [(-0.32)-(-0.19)]=-10.12
8.314 298.15

K = 4.02 x 10-5
EIvalor de la constante de equilibrio nos muestra que el equilibrio es muy favorable a la
formacion dellactato y NAO+. Esto se confirma por el valor de ~G calculado con ayuda de
la siguiente ecuacion en el equilibrio.
~Co=-RTln K

~CO = -(8.314) (298.15) In (4.02 X 10-5)

~Co = -25090 Jjmol


EIvalor negativo nos indica que el equilibrio se desplaza hacia la derecha 0 sea hacia la
formacion de lactato y NAD+.
Otra alternativa para calcular la ~CO consiste en utilizar la ecuacion 8.2:

~co = -z F ~E' = -(2) (96 500) [-0.32- (-0.19) 1


0

~co = -25 090 Jjmol

Como ya hem os visto, el metabolismo celular produce compuestos reducidos en todos 105
compartimentos importantes de la CE~lulaseucariotes. La glicolisis se \leva a cabo en el citosQI,
mientras que la oxidacion de acidos grasos y el cicio de Krebs ocurren en la matriz mitocondrial.
EItipo y numero de mitocondrias en una celula varia significativamente de acuerdo a la celula.
Este numero puede ser tan pequeno como solo uno 0 lIegar hasta cien mil.
La mitocondria esta constituida por cuatro regiones: las membranas internas y externas
el espacio intermembranas y la matriz (figura 8.3) La membrana interior se encuentra muy
plegada formando crestas, 10 cual aumenta considerablemente su superficie. Debido a que las

Figura 8.3 Estructura de fa


mitocondria.

/
/
/
/
/
/
/
/

Membrana
exterior
proteinas respiratorias estan soportadas en las membranas internas, la densidad de las crestas
se correlaciona con la actividad respiratoria de la celula. Por ejemplo, las celulas del musculo
cardiaco, las cuales tienen altos indices de respiracion, contienen crestas densamente
empacadas. Por el contrario, las celulas del higado poseen crestas mucho mas separadas,
pues presentan una menor tasa de respiracion.
Independientemente de donde, 0 en que compartimento celular se produzca la oxidacion
biologica, todos estos procesos producen acarreadores de electrones reducidos y
principalmente NADH2. La mayor parte del NADH2 se reoxida por las enzimas de la cadena
respiratoria terminal, las cuales se hallan en la membrana interna de la mitocondria, produciendo
ATP durante esta oxidacion. La membrana interna esta constituida por 70% de proteinas y
30% de IIpidos. De estasproteinas, 50% se puede estar involucrada en el transporte de electrones
y la fosforilacion oxidativa. EIresto de las proteinas se encuentran principalmente relacionados
con el transporte de sustancias a traves de la membrana. Por el contrario, la membrana externa
de la mitocondria contiene proteinas que incluyen aquellas enzimas que oxidan aminoacidos,
que sintetizan acidos grasos y fosfollpidos, y que realizan hidroxilaciones enzimaticas.
En la membrana interna de la mitocondria estan dispuestas las proteinas y acarreadores de
electrones que los conducen desde el NADH2 hasta el oxigeno, que es el aceptor final de elec-
trones y que en conjunto contituyen la cadena respiratoria terminal (figura 8.4). EItransporte de
electrones puede ser considerado como una cascada de electrones que pasa del NADH2, por
flavoproteinas, centros fierro azufre, coenzima Q y sobre todo por varios tipos de citocromos.
Evidentemente que para que el transporte de electrones pueda realizarse, los com-
ponentes siguen una serie de reacciones de oxidorreduccion, en una secuencia correspondiente
al incremento de su potencial redox E'Q. La cascada de electrones comienzan con la reoxidacion
de NADH2 par media de la NADH deshidrogenasa, la cual contiene un grupo flavina mono-
nucleotido como grupo prostetico y cataliza la siguiente reaccion:

EI complejo enzimatico tambien acepta electrones del NADPH2, pero ineficientemente.


La via mas utilizada es la oxidacion del NADPH2 con la reduccion del NAD+ par media de la
enzima transhidrogenasa:

EI complejo NADH deshidrogenasa contiene tambien un numero de centros fierro-azufre


(Fe-S). Estos centros Fe-Spueden hallarse en tres formas (FeS, Fe2S2y Fe4S4)y contienen en
una estructura tetrahedrica 105 azufres del grupo tiol de cisteinas y sulfuros inorganicos,
complejando iones de fierro. Estos grupos transfieren 105 electrones del FMNH2 hacia la
coenzima Q, cambiando el grado de oxidacion del fierro.
La coenzima Q a ubiquinona es un transportador de electrones muy lipofilo que consis-
te en un grupo benzoquinona can varios grupos isopreno. Cuando se tiene 10 unidades isopreno
en la coenzima Q se utiliza el simbolo QlO. Esta molecula es reducida aceptando 105 electro-
nes del fierro del centro Fe-S.A su vez la coenzima Q transfiere 105 electrones a una serie de
citocromos. Los citocromos consisten en hemoproteinas rajas a cafes que tienen un espectro
visible distintivo (figura 8.5). Los citocromos mas abundantes se c1asifican como a, b a c

I
I
I
I
I
I
I
I
I
I
_/
/~.
/

Figura 8.5 Espectros del citocromo c en su


forma oxidada y reducida.
dependiendo de su espectro. Los citocromos b, c, y Cl contienen el fierro complejado con la
protoporfirina IX; este es el mismo grupo hemo encontrado en la hemoglobina y la mioglobina. En
105 citocromos c y Cl, pero no en el citocromo b, el grupo hemo unido covalentemente a la
proteina por medio de enlaces tioeter entre las dos cadenas vinilo y dos residuos cisteina. Los
citocromos a y a3 contiene un grupo metalo-porfirina, que es un grupo derivado del hemo, en
donde muy cerca del Fe se encuentran asociados iones de cobre. Los citocromos durante las
reacciones de oxidorreducci6n modifican el grado de oxidaci6n del metal asociado, entre +2 Y +3
en el caso del Fe y entre +1 y +2 en el caso del Cu. Los citocromos son transportadores de un
electr6n.
Cada par redox participante en la cadena respiratoria terminal tiene un potencial redox
estandar caracteristico. Los donadores de electrones en esta cadena pueden c1asificarseen un
orden termodinamico de potenciales redox. EIflujo de electrones se realizara del potencial mas
negativo hacia el mas positivo. En la figura 8.6 se muestran en la escala vertical, 105 potenciales
redox estandar de 105 transportadores de electrones. Los electrones pasan del par mas negativo
(NADH2/ NAD+) al mas positivo (1/2 02+2 W/H20). EIcambio de energia libre en esta cadena
esta directamente relacionado con el cambio del potencial redox de acuerdo con la ecuaci6n 8.1.

donde ~Go es el cambio de energia libre, z es el numero de electrones, F es la constante de


Faraday (96 500 J/mol· volt) y Mh es la diferencia de potencial redox estandar de 105 pares
participantes.

Eo
+0.2

® 50

Figura 8.6 Potenciales redox durante el fluio de electrones en la cadena respiratoria terminal. £1potencial redox es la
fuerza conductora para la liberacion de energia.
Considerando el total de la cadena respiratoria 0 sea la transferencia de un par de
electrones entre el NADH2 y el 02, se tiene:

LiGD = -(2) (96 500) (0.82 -(-0.32))


LiGD = -220 KJ/mol = -52 Kcaljmol

Como se puede apreciar, estas reacciones liberan una cantidad significativamente alta
de energfa por cada par de electrones, la cual sirve para la sfntesis de ATP. Sabemos que
durante todos los pasos que conducen a la oxidaci6n completa de un mol de glucosa, para
producir C02 y H20, atraviesan 12 pares de electrones la cadena respiratoria. Entonces, la
energfa libre liberada sera de 12 x -220 = -2 640 KJ/mol.
Recordando que la LiGO de oxidaci6n de la glucosa es de -2 870 KJ/mol, se puede
concluir que casi la totalidad del cambio de energfa libre durante la oxidaci6n biol6gica de la
glucosa se realiza en la cadena respiratoria terminal.

Ahora descubriremos el mecanismo por el cualla energfa liberada de la respiraci6n, se utiliza en


la sintesis de ATP.Actualmente, se acepta como modelo para la sfntesis de ATP el modelo de
acoplamiento quimio-osmotico propuesto en 1961, por el bioqufmico britanico Peter Mitchell.
De una manera general, el modelo propone que la energia proveniente del transporte
de electrones se utiliza en un transporte activo de protones de la matriz de la mitocondria, 0
sea que este transporte saca protones de la matriz (figura 8.4). Esta acci6n origina un gradiente
electroqufmico de pro tones, con un pH inferior en la parte externa de la membrana interna.
Los pro tones en la parte externa, tienen la tendencia termodinamica de regresar e igualar el
pH en ambos lados de la membrana. En otras palabras, la energfa generada se utiliza para
mantener el gradiente de protones. Peter Mitchell, recibi6 el premio Nobel en 1978 por sus
logros cientificos.
Los protones en su regreso atraviesan el sistema ATPasa, descrito anteriormente en la
fotosfntesis, capftulo 7. En la figura 7.12 se muestra la conformaci6n del complejo ATP sintetasa
o factor acoplador Fl Fa. En la figura 7.13 tambien se muestra un mecanismo de transporte de
protones a traves del complejo Fl Fa. Como se discuti6 anteriormente, el complejo Fo contiene
un conducto especffico, 0 poro, para el paso de iones H+ que fueron bombeados fuera de la
mitocondria por el transporte de electrones. La energfa derivada de este transporte de protones
se usa en la sfntesis de ATP.
En el capftulo 6, se discuti6 el concepto de fuerza protomotriz (Lip). La ecuaci6n 6.13
define la fuerza protomotriz en volts:
Ejemplo 8.2 Calcular el cambio de energia libre de Gibbs en una un mitocondria que
presenta un potencial electrico entre el interior y el exterior de la membrana interna de
0.14 volts. EIpH del medio interior es de 6.61 y el pH del medio exterior es de 5.19.
Calculando la fuerza protomotriz:

L¥J = -23 ( R; }PHe - PI\) + E

(1.987) (298.15)
L\p=-(23) 23040 (5.19-6.61)+0.14

L\CO = FL\p = (23 040) (0.224)= 5160 caljmol

L\CO = 5.16 Kcaljmol

Este valor es la cantidad de energia libre generada por mol de protones H+, la cual
generaria aproximadamente 10.3 Kcal por cada par de equivalentes reductores. Estacantidad
parece ser la justa necesaria para sintetizar un mol de ATP.

Balance energetico en el metabolismo oxidativo

En el capitulo anterior y en este, hemos discutido la via metab61ica mediante la cual 105
carbohidratos se oxidan en C02 y agua. Ahora estamos en posici6n de calcular la energia total
generada y la eficiencia metab61ica de esta via metab61ica combinada, primero escribiremos las
ecuaciones netas de cada una de las eta pas.
Glic61isis

Glucosa + 2 ADP + 2 Pi+ 2 NAD+ f-----7 2 piruvato + 2 ATP + 2 NADH2 + 2 H20 + 2 H+

Complejo piruvato deshidrogenasa

2 piruvato + 2 NAD+ + 2 CoA-SH f-----7 2 acetil-CoA + 2 NADH2 + 2C02

Cicio de Krebs (incluyendo la conversi6n de GTP en ATP)


2 Acetil-CoA + 4 H20 + 6 NAD+ + 2 FAD+ + 2 ADP + 2 Pi f-----7

4 C02 + 6 NADH2 + 6 W +2 FADH2 + 2 CoA-SH + 2 ATP.

Sumando las tres ecuaciones obtenemos la siguiente ecuaci6n total.

Glucosa + 10 NAD+ + 2 FAD + 2 H20 + 4 ADP + 4 Pi


f-----7 C02 + 10 NADH2 + 8 W+ FADH2 + 4 ATP

Estosprocesos generan cuatro moles de ATP directamente, mas 10 moles de FADH2. Por
ahora, aun es incierta la relaci6n P/O para la oxidaci6n del NADH2 y FADH2, nosotros usaremos
valores de 3 y 2 respectivamente. De este modo, se obtiene un total de 38 AlP generados por
mol de glucosa oxidada. En celulas procariotes y otras, 105 acarreadores reducidos son
transportados del citosol hacia la matriz de la mitocondria por el mecanismo glutamato-aspartato
sin costo de energia. Sin embargo, en las celulas de 105 organismos eucariotes que utilizan el
mecanismo del glicerol fosfato deben pagar un costa energetico. En este caso, los electrones del
NADH, del citosol entran a la cadena respiratoria como FADH" de donde la generacion de AlP
por cada NADH, es de dos, y no de tres. Esta disminucion nos da un total de AlP de 36 por mol
de glucosa oxidada.
Recordando que la oxidacion total de una mol de glucosa produce un "'GO = -2 870 KJ Y
que la hidrolisis del AlP es acompai'iada de "'GO = -30.5 KJ/mol, podemos calcular la eficiencia
de operacion de la maquina bioquimica:

(numero de moles de AlP) (-30.5)


-2870

Eficiencia = (38) (-30.5) - 0.40 = 40%


-2870

8.1 De acuerdo a 105 valores de E'0 de la tabla 8.2, calcular la "'Go de la oxidacion del mala to,
por la mala to deshidrogenasa.

8.2 Recurriendo a 105 valores de la tabla 8.2, determinar la constante de equilibrio para la
reaccion de la glutation peroxidasa.

8.3 EI potencial redox medio, Eo,de la reaccion 2 W + 2 e' = H, se especifico arbitrariamente


como cero. Calcular E'o a pH 8.

8.4 EI potencial redox medio, Eo,de la siguiente reaccion es de -0.32 V a pH 7. Calcular E'o a
pH 5.

8.5 Calcular la "'G y la Keq para la siguiente reaccion:

FADH, + 2 citocromo c (Fe") = FAD + 2 citocromo c (Fe+') + 2 H+

Consulte 105 valores de la labia 8.2.

8.6 Deduzca la ecuacion que relaciona al potencial redox y at pH.

8.7 Determinar "'G para la oxidacion dellactato por el citocromo c oxidado a 298°K y pH 7.

Cit. c (Fe") + e- ~ Cit. c (Fe") Eo= +0.25 V


Piruvato + 2 H+ + 2 e- ~ Lactato Eo= -0.19 V

8.8 EI nicotinamida adenina dinucleotido (NAD) participa en muchas reacciones de oxi-


dorreduccion como par redox bivalente, segun se muestra en la siguiente reaccion:

NAD+ + 2 H+ + 2 e- ~ NADH + H+
Si el par tiene un valor de Eo de -0.32 V a 298°K y pH 7, calcular el potencial redox de una
solucion en estas condiciones, si: a) 90% se encuentra en su forma reducida y
b) 10% del nucleotido se encuentra en su forma reducida.

8.9 Se agrega tioglicolato a un medio de cultivo anaerobio con el fin de remover el oxfgeno
disuelto y de ajustar el potencial redox del medio, para el crecimiento de bacterias
anaerobias. EI par redox del tioglicolato es:

Si el valor de Eo es de -0.34 V a 35°C y pH neutro, calcular los valores de potencial redox


del medio de cultivo, sf: a) 20% del tioglicolato se halla en su forma reducida y b) 75% del
compuesto esta reducido.

8.10 EI butiril-CoA se oxida rapidamente en presencia de la butiril-CoA deshidrogenasa y del


pigmento redox, piocianina:

butiril-CoA + piocianina oxidada ~ crotonil-CoA + piocianina reducida

Un experimento a 303 K Y pH 7, mostro concentraciones en el equilibrio de 90 mM de


butiril-CoA; 42 mM de crotonil-CoA; 31 mM de piocianina oxidada; y 62 mM de piocianina
reducida. Calcular el valor de E'o del par crotonil-CoAfbutiril-CoA a 303°K y pH 7 si el par
de piocianina tiene una E'0 de -0.034 V en esta condiciones.