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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

ÉVALUATION DE LA REPRODUCTIBILITÉ D’UNE MÉTHODE DE


MESURE

1.  RAPPEL SUR L’ÉVALUATION DES PERFORMANCES D’UNE MÉTHODE DE


MESURE

Les définitions en italiques sont adaptées du (VIM) ISO, 1993) :


Vocabulaire International des termes fondamentaux et généraux de Métrologie.

L’exactitude d’une méthode (ou d’un instrument) de mesure est définie par son aptitude à
donner des réponses proches d'une valeur vraie. L’exactitude est un concept
qualitatif.

Deux critères contribuent à l’exactitude d’une méthode de mesure. Ce sont :

La justesse : aptitude à donner des indications exemptes d’erreur systématique

la fidélité : aptitude à donner des indications très voisines lors de l'application


répétée du même mesurande dans les mêmes conditions de mesure.

•   Ces conditions sont celle décrites pour la répétabilité :


•   La répétabilité peut s'exprimer quantitativement à l'aide des caractéristiques de
dispersion des indications

Ainsi, la fidélité de la méthode de mesure s’évalue par la répétabilité et la reproductibilité des


résultats de mesure .

Nous partons du principe que si la justesse d’un instrument ou d’une méthode de mesure a été préalablement
minimisée par étalonnage ou une autre opération, l’incertitude de la mesure reposes essentiellement sur la
répétabilité et la reproductibilité des résultats de mesure. Ceci est particulièrement vrai en Biochimie ou en
Biologie.

L’objectif de ce document est de développer comment se caractérise et s’évalue la fidélité d’un instrument
ou d’une méthode de mesure, par l’intermédiaire des ces deux derniers critères, répétabilité et
reproductibilité.

Gilles TIXIER : amplitude@wanadoo.fr 1/97 485935363.doc


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2.  COMPOSANTES ET MODE D’EXPRESSION DE LA FIDÉLITÉ D’UNE MÉTHODE


DE MESURE

Répétabilité des mesures


Étroitesse de l'accord entre les résultats des mesures successives du même produit,
effectuées dans la totalité des conditions suivantes :
- même méthode de mesure,
- même Opérateur,
- même instrument de mesure,
- même lieu,
- mêmes conditions d'utilisation,
- répétition sur une courte période de temps.
La répétabilité indique la dispersion minimum inhérente à la méthode (incompressible).

Reproductibilité des mesures


Étroitesse de l'accord entre les mesures successives du même produit, dans le cas où
les mesures individuelles sont effectuées en faisant varier les conditions telles que :
- le délai entre les prise de mesures
- l’Opérateur
- les conditions d'utilisation
- la méthode
- l’instrument de mesure

Pour que l’expression de la reproductibilité soit valable, il est nécessaire de spécifier la ou les conditions
que l'on fait varier. On parlera de reproductibilité Jour, reproductibilité Opérateur, ou des deux à la fois.

Pour évaluer la reproductibilité d’une méthode, dans le cadre de l’activité habituelle du Laboratoire de
contrôle d’un établissement, la condition que l’on fera varier en priorité est le délai entre les mesures (effet
Jours, incluant également l’effet des conditions d'utilisation comme l’humidité ambiante, la température du
labo, le vieillissement des réactifs, …). En effet, le plus souvent, on s’intéressera à la comparaison de deux
produits mesurés à des dates différentes.
L’effet Opérateur est de moins en moins influent avec le développement des méthodes automatiques. Quant
à s’intéresser à l’influence de la méthode de mesure ou de l’instrument, cela concerne essentiellement des
comparaisons inter-laboratoires.

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Expression de la répétabilité et de la reproductibilité


Ces deux critères de performance d’une méthode peuvent s'exprimer quantitativement
par la dispersion des résultats. En effet la distribution des mesures individuelles suit le plus souvent, une loi
Normale et il est alors possible d’évaluer leur dispersion par l’écart-type de ces valeurs.

Une méthode est d’autant plus performante (ou puissante : aptitude à différencier deux produits faiblement
différents) que la dispersion des mesures est faible (se traduisant par un écart-type petit).

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3.  PLANIFICATION D’ESSAIS POUR ÉVALUER SIMULTANÉMENT


LA RÉPÉTABILITÉ ET LA REPRODUCTIBILITÉ D’UNE MÉTHODE DE MESURE,
SOUS L’INFLUENCE DE FACTEURS ALÉATOIRES1
Le fichier Excel «  ANAVAR2.xls » contient les applications présentées dans ce chapitre 3.

3.1.  Cas où la reproductibilité est évaluée, sous l’influence d’un seul facteur


Exemple : l’effet Jour

Planification de l’essai

Prenons le cas d’une opération de titrage d’un composé biochimique, exprimé en mg/l
On prévoie, par exemple 5 séances de titrage et 4 répétitions par séance d’un même produit. Les résultats
sont les suivants :

Lundi Mardi Mercredi jeudi vendredi


3.18 3.35 3.50 3.32 3.32
3.28 3.22 3.47 3.41 3.39
3.29 3.30 3.34 3.28 3.26
3.20 3.45 3.40 3.42 3.32

Interprétation

La comparaison entre jours est traitée par Analyse de Variance à un facteur (application Exel 5.0) afin de
connaître la part de variabilité due à la répétabilité et à la reproductibilité-Jour.

1
•  Un facteur est caractérisé d’aléatoire quand il possède un nombre infini ou presque de modalités, d’où l’ont ire
au hasard un échantillon représentatif de cette population infinie. On ne s’intéresse d’ailleurs pas à la
comparaison entre deux modalités de ce facteurs. Dans le cas que nous traitons les facteurs étudiés (jour et
Opérateur)sont considérés comme aléatoires

•  Un facteur est caractérisé de fixe quand il possède un nombre fini de modalités, que l’on contrôle et que l’on peut
être amené à comparer. Ce sera le cas de plusieurs techniques différentes, mesurant le même produit,
éventuellement plusieurs laboratoires.

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RAPPORT DETAILLE
Nombre
Groupes d'échantillons Somme Moyenne Variance
Lundi 4 12.95 3.24 0.0031
Mardi 4 13.32 3.33 0.0093
Mercredi 4 13.71 3.43 0.0052
jeudi 4 13.43 3.36 0.0047
vendredi 4 13.29 3.32 0.0028

ANALYSE DE VARIANCE
Somme des Degré de Moyenne Valeur critique
Source des variations carrés liberté des carrés F Probabilité pour F
Entre Groupes (jours) 0.0750 4 0.0188 3.75 2.64% 3.06
A l'intérieur des groupes 0.0751 15 0.0050

Total 0.1501 19

On constate qu’il existe un effet Jour significatif (risque alpha < 5%), autrement dit qu’il y a plus de
différence entre deux titrages réalisés à des jours différents qu’au sein d’une même séance de titrage.

Notion d’estimation de variance

Il faut bien séparer la notion de « moyenne des carrés » et celle de variance d’un facteur. En effet, seul le
carré moyen résiduel (intra-groupe) est une variance. Les autres carrés moyens sont des quantités permettant
seulement de réaliser les tests, mais qui ne quantifient de manière absolue l’influence relative due à un
facteur.

C’est pourquoi, pour évaluer l’influence relative due à un facteur, il est nécessaire de disposer
d’estimation de variance propres à chaque facteur.

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Ces estimations de variance (symbole :

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avec un chapeau) quantifient l’influence des facteurs étudiés 2, sur la variabilité des résultats de titrage 3.

3
Elles ont la même dimension qu’une variance: le carré de l’unité de mesure

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Calcul des estimations de variance

Les formules pour obtenir les estimation de variances sont simplifiées dans le cas d’un nombre égal de
répétitions pour chacun des jours (ici : 4)

Somme des Degré de Moyenne


Source des variations carrés liberté des carrés
Entre Groupes (jours) SCj j-1 CMj
A l'intérieur des groupes SCr j . (n-1) CMr

Total SCT (j .n)-1

Le carré moyen (ici : 0,1501/19 = 0,00790) ne représente par la variance totale (reproductibilité Jour), en
effet il dépend aussi du choix pour l’essai, du nombre de répétitions et du nombre de jours. Les estimations
de variances sont indépendantes des effectifs choisis.

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La variance totale (reproductibilité Jour), est estimée par :

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ˆ
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T =

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ˆ
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j +

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ˆ
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r
où : Va est la variance intergroupes (effet Jour), estimée par : (CMj - CMr) / n
Vr est la variance intragroupes (résiduelle ou répétabilité), estimée par : CMr

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Dans notre exemple,

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ˆ
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j = (0,0188 - 0,0050) / 4 = 0,00345

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ˆ
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r= 0,00500

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ˆ
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T : 0,00345 + 0,00500 = 0,00845

La variance de reproductibilité-Jour est égale à 0,00845


à laquelle contribue un effet Jour pour (0,00345 / 0,0845) = 41%
et une répétabilité intra-Jour pour (0,0050 / 0,0845) = 59%

L’écart-type de répétabilité est égal à √ 0,00500 = 0,07 mg/ml


L’écart-type de reproductibilité-Jour est égal à √ 0,00845 = 0,09 mg/ml

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3.2.  Cas où la reproductibilité est évaluée, sous l’influence de deux facteurs croisés et


plusieurs répétitions Exemple : l’effet Jour et l’effet Opérateur

Planification de l’essai

On prévoie, cette fois 5 séances de titrage au cours de chacune desquelles 3 mêmes Opérateurs réalisent 2
répétitions d’un même produit. Les résultats sont les suivants :

Opérateur Lundi Mardi Mercredi Jeudi Vendredi


Albert 3,18 3,35 3,50 3,32 3,32
3,28 3,22 3,47 3,41 3,39
Robert 3,29 3,30 3,34 3,28 3,26
3,20 3,45 3,40 3,42 3,32
Dana Int. 3,30 3,42 3,44 3,43 3,37
3,27 3,35 3,51 3,40 3,36

Interprétation
U tili se z Wo rd 6 .0c (ou ul tŽ rie ur)

po ur a ffic h er un e imag e Maci ntos h.

Dans cet exemple, on constate que :


. Il n’apparaît pas d’influence significative entre Opérateurs (Risque alpha =11%>>5%)
. Il existe un effet Jour hautement significatif (risque alpha = 0,14% << 5
. Il n’apparaît pas d’interaction Jour x Opérateurs (Risque alpha =58%>>5%), autrement dit que l’influence
du jour se retrouve de la même façon chez chacun des Opérateurs.

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Estimations de variance
ANALYSE DE VARIANCE
Somme des Degré de Moyenne
Source des variations carrés liberté des carrés
Echantillon (Opérateur) SCo o-1 CMo
Colonnes (jours) SCj j-1 CMj
Interaction SCi (o-1).(j-1) CMi
A l'intérieur du groupe SCr o.j.(n-1) CMr

Total SCT (o.j.n)-1

Les estimations de variances sont obtenues ainsi :

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ˆ
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T =

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ˆ
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o +

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ˆ
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j +

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ˆ
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oj +

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ˆ
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où :

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ˆ
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o est la variance interlignes (effet Opérateur) = (CMo - CMoj) / j.n

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ˆ
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j est la variance intercolonnes (effet Jour) = (CMj - CMoj) / o.n

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ˆ
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oj est la variance d’interaction = (CMoj - CMr) / n

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ˆ
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r est la variance intragroupes (résiduelle ou répétabilité), estimée par : CMr

Application numérique

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Dans notre exemple,

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ˆ
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o = (0,00914 - 0,00307) / 10 = 0,00061

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ˆ
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j = (0,02840- 0,00307) / 6 = 0,00422

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ˆ
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oj = (0,00307 - 0,00366) / 2 = -0,00030

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ˆ
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r= 0,00366

En absence d’interaction, on préférera estimer la variance résiduelle par une variance


commune : CMr = (SCoj +SCr) / ((o-1).(j-1)+o.j.(n-1))

Ainsi, comme c’est le cas dans notre exemple, CMoj disparaît et CMr devient = 0,00345

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ˆ
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T : 0,00061 + 0,00422 + 0,00345 = 0,00829

La variance de reproductibilité-Jour est égale à 0,00829


à laquelle contribue un effet Opérateur pour (0,00061 / 0,0829) = 7%
à laquelle contribue un effet Jour pour (0,00422 / 0,0829) = 51%
et une répétabilité intra-Jour pour (0,00345 / 0,0829) = 42%

L’écart-type de répétabilité est égal à √ 0,00345 = 0,06 mg/ml


L’écart-type de reproductibilité (Jour & Opérateur) est égal à √ 0,00829 = 0,09 mg/ml

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3.3. Cas d’un plan d’essai avec deux facteurs croisés


mais seulement une répétition de mesure (n=1)
Exemple

Opérateur Lundi Mardi Mercredi Jeudi Vendredi


Albert 3,18 3,55 3,50 2,97 3,32
Robert 3,29 3,50 3,34 2,93 3,26
Dana Int. 3,30 3,42 3,44 3,43 3,37

Interprétation
ANALYSE DE VARIANCE
Source des variations Somme des Degré de Moyenne F Probabilité Valeur critique
carrés liberté des carrés pour F
Lignes (0pérateur) 0,02428 2 0,01214 4,2 5,6% 4,5
Colonnes (Jour) 0,04587 4 0,01147 4,0 4,6% 3,8
Erreur 0,02305 8 0,00288

Total 0,09320 14

Dans cet exemple, on constate que :


. Il apparaît une influence significative entre Opérateurs (Risque alpha =5,6%)
. Il existe un effet Jour également significatif (risque alpha = 4,6%
en rappelant que le calcul des F s’effectue avec l’interaction comme quotient puisque Cmr = 0.

Estimations de variance
ANALYSE DE VARIANCE
Source des variations Somme des Degré de Moyenne
carrés liberté des carrés
Lignes (0pérateur) SCo o-1 CMo
Colonnes (Jour) SCj j-1 CMj
Erreur SCoj (o-1).(j-1) CMoj

Total SCT o.j - 1

Les estimations de variances sont obtenues ainsi :

La variance totale (reproductibilité Jour+Opérateur) est égale à :

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ˆ
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T =

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ˆ
amplitude
Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

Gilles TIXIER : amplitude@wanadoo.fr 69/97 485935363.doc


amplitude
Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

o +

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ˆ
amplitude
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amplitude
Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

j +

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ˆ
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amplitude
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oj

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où :

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ˆ
amplitude
Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

o est la variance interlignes (effet Opérateur) = (CMo - CMoj) / j

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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

o est la variance intercolonnes (effet Jour) = (CMj - CMoj) / o

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r est la variance intragroupes (résiduelle ou répétabilité = CMoj

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Application numérique

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Dans notre exemple,

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o = (0,01214 - 0,00288) / 5 = 0,00185

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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

j = (0,01147- 0,00288) / 3 = 0,00286

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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

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oj = 0,00288

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Groupe de travail : « Méthodologie Statistique »

T = 0,00185 + 0,00286 + 0,00288 = 0,00760

La variance de reproductibilité-Jour est égale à 0,00760


à laquelle contribue un effet Opérateur pour (0,00061 / 0,0829) = 24%
à laquelle contribue un effet Jour pour (0,00422 / 0,0829) = 38%
et une répétabilité intra-Jour pour (0,00345 / 0,0829) = 38%

L’écart-type de répétabilité est égal à √ 0,00288 = 0,05 mg/ml


L’écart-type de reproductibilité (Jour & Opérateur) est égal à √ 0,00760 = 0,08 mg/ml

o
o O

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