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BIOQUIMICA (BIOG1006)
Guía Práctica de Laboratorio
1. INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos o hidratos de carbono están formados por carbono (C), hidrógeno (H)
y oxígeno (O) con la formula general (CH2O)n. Los carbohidratos incluyen azúcares,
almidones, celulosa, y muchos otros compuestos que se encuentran en los organismos
vivientes. Los azúcares simples se denominan monosacáridos y pueden combinarse
para formar carbohidratos más complejos. Ejemplos de azúcares simples son la glucosa,
fructosa y la galactosa. Los carbohidratos compuestos por dos monosacáridos se llaman
disacáridos, como la sacarosa, maltosa y lactosa. Los carbohidratos que están
compuestos de dos a diez monosacáridos se llaman oligosacáridos, y los que tienen un
número mayor se llaman polisacáridos, como el almidón, celulosa y glucógeno.
Los azúcares reductores son aquellos que poseen un grupo carbonilo libre y que a
través de este pueden reaccionar con otras moléculas donde el carbono hemiacetal o
hemicetal se le denomina carbono anomérico. (Arango, Velásquez, Ussa; 2017).
Los azúcares no reductores son aquellos que cuando 2 se unen, forman un disacárido,
los disacàridos por condensación liberan una molécula de agua y son azúcares no
reductores que se unen por enlaces glicosídicos de tipo Alfa o Beta ya que el grupo
oxidrilo (OH) de una hexosa se combina con el grupo aldehído (CHO) de otra hexosa
liberando 1 molécula de H2O. (EcuRed, s.f)
Reacción de Fehling.
El reactivo de fehling es una mezcla entre 2 soluciones acuosas:
- Sulfato cúprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.
- Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 173 g; solución de hidróxido de
sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 500 ml.
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitación
del hidróxido de cobre (II).
La prueba Fehling se utiliza para el reconocimiento de azúcares reductores. El poder
reductor que pueden presentar los hidratos de carbono proviene del grupo carbonilo,
que puede ser oxidado a grupo carboxilo con agentes oxidantes suaves. Si el grupo
carbonilo se encuentra combinado no puede presentar este poder reductor.
En medio alcalino, los azúcares reductores son capaces de reducir el ión Cu 2+ de color
azul a Cu+ de color Naranja. ES decir que el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo
carboxilo. (Bioquímica, 2016).
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3. MATERIALES:
4. PROCEDIMIENTO:
A. Reacción de Fehling
1) Se tomó 2 ml de la muestra que se quería analizar.
2) Se añadió 0.5 ml de Fehling A y 0.5 ml de Fehling B.
3) Se calentó el tubo por 30 segundos.
4) Se observó si la reacción era positiva o negativa.
5. RESULTADOS A REPORTAR:
Describir el resultado obtenido del ensayo con cada carbohidrato cuando fue expuesto
Realizado por: Página | 2
Aprobado por:
Escuela Superior Politécnica del Litoral
FACULTAD CIENCIAS DE LA VIDA
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al reactivo de Fehling.
RESULTADOS
Al agregar el reactivo de Fehling, las muestras de glucosa, lactosa, maltosa, glucosa y
sacarosa, se tornaron de color azul. Luego, al calentar por 30 segundos las muestras,
únicamente la glucosa, maltosa y lactosa se tonaron de color rojo. Las muestras de
sacarosa y almidón mantuvieron su color inicial.
Al realizar la hidrólisis ácida sobre la muestra de sacarosa y almidón donde
previamente se realizó la prueba de Fehling, se observó que la sacarosa se tornó de
color rojo, y el almidón mantuvo su color inicial.
La reacción era positiva si la muestra se tornaba de color rojo-ladrillo.
La reacción era negativa si la muestra se quedaba con el color azul.
Sacarosa Almidón
hidrolizada hidrolizado
+
-
Tabla 2: Resultados cualitativos de hidrólisis ácida.
DISCUSIÓN
Todos los monosacáridos son agentes reductores, al igual que la mayoría de los
disacáridos a excepción de la sacarosa. La glucosa es un monosacárido, por lo tanto
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posee poder reductor, debido a esto en presencia del reactivo de Fehling, y luego de
ser sometido a baño María, la glucosa presentó un color rojo.
De igual manera, la lactosa está compuesta por glucosa y galactosa, y la maltosa está
compuesta por dos glucosas unidas por un enlace glucosídico y por lo tanto presentan
poder reductor.
El reactivo de Fehling actuó de manera que si el azúcar es reductor, el reactivo se oxida
dando lugar a la reducción del sulfato de cobre de color azul a óxido de cobre de color
rojo-anaranjado, por lo tanto según la tabla n°1 la reacción del reactivo de Fehling con
la lactosa, glucosa y maltosa fue positiva.
La sacarosa y el almidón dan la reacción de Fehling negativa, ya que no presentan
grupos aldehídos libres, debido a esto como se observa en la figura 1, mantuvieron su
coloración inicial. Sin embargo, luego de realizar la hidrólisis ácida sobre la muestra de
sacarosa y almidón donde previamente se había realizado la prueba de Fehling, la
sacarosa se tornó de color rojo, ya que mediante la hidrólisis se descompone la
molécula en glucosa y fructuosa, debido a esto ahora si presenta poder reductor, ya
que están presentes dos monosacáridos luego de romper el enlace O-glucosídico de la
sacarosa, por lo tanto ahora la reacción es positiva.
Por el contrario, al realizar el mismo proceso con el almidón, este mantuvo su color
inicial, pero si se utilizaba mayor concentración de HCl, y se calentaba por más tiempo,
se lograría que el almidón también se descomponga totalmente y también presente
poder reductor, ya que esta molécula está compuesta fundamentalmente por glucosa.
CONCLUSIÓN
La reacción de Fehling en la sacarosa nos proporciona un resultado negativo, ya
que no presentó el color rojo característico de un azúcar reductor, puesto que
es un disacárido que se compone de glucosa y fructosa. No contiene ningún
átomo de carbono anomérico libre, ya que los carbonos anoméricos de sus dos
unidades monosacáridos constituyentes se encuentran unidos entre sí,
covalentemente mediante un enlace O-glucosídico. Por esta razón, la sacarosa
no es un azúcar reductor.
Se comprueba de una forma práctica que al realizar la hidrólisis de la sacarosa,
esta se descompone en glucosa y fructosa, por lo tanto estos monosacáridos si
presentan poder reductor por lo que posteriormente se observó una coloración
rojo ladrillo.
La prueba de Fehling nos permite identificar a un azúcar reductor como lo son la
glucosa, lactosa y maltosa. Además, se comprueba que la sacarosa y el almidón
son azúcares no reductores.
6. Bibliografía:
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julio.blogspot.com/2014/06/prueba-de-fehling.html
Arango M., Velásquez l., Ussa E. (2017). Identificación De Azúcares Reductores Y
No Reductores. Recuperado de:
https://www.studocu.com/es/document/universidad-de-antioquia/laboratorio-
de-quimica-de-alimentos/otros/identificacion-de-azucares-reductores-y-no-
reductores/2681408/view
EcuRed. Azúcares reductores. Recuperado de: https://www.ecured.cu/Az
%C3%BAcares_reductores