CENTRO DE CIÊNCIAS E TECNOLOGIA

DISCIPLINA BIOQUÍMICA
Profas. Roziana Jordão e Alexandra Salgueiro

PRÁTICA: ANÁLISE CLÍNICA - TRIGLICERÍDEOS

I Objetivos
• Determinar triglicerídeos (TG) em amostras;
• Interpretar resultados.

II Introdução
O perfil lipídico na análise clínica é definido pelas determinações do colesterol total (CT),
colesterol HDL (HDL-C), triglicerídeos (TG) e, quando possível, do colesterol LDL (LDL-C)
após jejum de 12 a 14 horas.
O método enzimático para determinação bioquímica de triglicerídeos em amostras é
baseado nas seguintes reações enzimáticas:

LIPASE LIPOPROTÉICA
Triglicerídeos + 3 H2O glicerol + ácidos graxos
GLICEROL QUINASE
glicerol + ATP glicerol-3-fosfato + ADP
GLICEROL-3-P OXIDASE
glicerol-3-fosfato + O2 dihidroxiacetona + H2O2 + Pi
PEROXIDASE
2 H2O2 + 4-aminoantipirina + 4 clorofenol 4-antipirilquinonimina + 4 H2O

O produto formado pela oxidação da aminoantipirina (antipirilquinonimina) apresenta

coloração avermelhada, cuja intensidade é diretamente proporcional à concentração de
triglicerídeos na amostra. A cor vermelha formada pela reação é medida em espectrofotômetro ou
fotocolorímetro com absorção máxima em 540 nm ou filtro verde.

III Procedimento
1. Marcar os tubos e adicionar os volumes conforme o quadro abaixo:
Sistema Tubos B (branco) P (padrão) A (amostra)
Amostra - - 10 µL
Padrão (200 mg/dL) - 10 µL -
Reagente enzimático 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
Observação: (i) Trabalhar em duplicatas para minimizar erros nas determinações analíticas.
(ii) Realizar a técnica com a amostra sem diluição e diluída.

2. Homogeneizar e colocar em banho-maria a 37 °C durante 10 min. O nível de água do

banho deve ser superior ao nível de reagentes nos tubos de ensaio.
 3. Determinar as absorbâncias da amostra (teste) e do padrão em 505 ou 540 nm
(dependendo do Kit utilizado na prática) ou em filtro verde (525 a 550 nm), utilizando
o controle (branco).
Cálculo
absorbância da amostra x 200
TG (mg/dL) = absorbância do padrão

absorbância da amostra x (TG em mg/dL)

absorbância do padrão 200 mg/dL

Observação: A reação é linear até 800 - 1100 mg/dL (depende do kit); se a amostra tiver
valor superior, diluir com NaCl 150 mmol/L de tal modo que a concentração
atinja entre 100 e 250 mg/dL (multiplicar o resultado pelo valor de diluição).

IV Interpretação de resultados

Os valores de referência de TG para indivíduos acima de 20 anos de idade estão

especificados na Tabela 1.

Tabela 1 Valores de referência de TG para indivíduos maiores de 20 anos de idade

Lipídeo Valores Categoria

(mg/dL)
TG < 200 desejável
200 - 400 limítrofe
400 - 1000 elevado
> 1000 muito elevado

A determinação de triglicerídeos é importante no laboratório clínico para classificação de

dislipidemias. É importante a correlação entre a hipertrigliceridemia e o risco aumentado de
cardiopatia coronariana. Aumentam os níveis de triglicerídeos: obesidade, estresse emocional,
algumas dietas e as doenças: diabetes, síndrome nefrótica, uremia, alcoolismo, hipotireoidismo e
mieloma múltiplo.

V Referência
LABTEST Diagnóstica – Triglicérides (GPO – ANA). Cat. 59-4/50. Instruções de uso. Minas
Gerais: Labtest Diagnóstica; rev. jul, 1999.
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Profas. Roziana Jordão e Alexandra Salgueiro

Aluno: ________________________________________________________ Turma:______

Data: _____________

FIXAÇÃO DO APRENDIZADO DA PRÁTICA

ANÁLISE CLÍNICA - TRIGLICERÍDEOS

1 Especifique o fundamento da dosagem clínica enzimática de triglicerídeos.

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2 Correlacione a reação colorimétrica que ocorre nas dosagens enzimáticas de glicose e de

triglicerídeos.
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3 Determine o fator para calcular triglicerídeos por kit enzimático, visando expressar o resultado em
mg/dL.
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4 Calcule as concentrações de triglicerídeos na amostra investigada.

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5 Interprete o resultado de triglicerídeos detectado.

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