0100 1.01384.9025 Mode opératoire Analyse unique Microscopie Prélever 20 µl de sang et 20 µl de solution de travail du bleu de crésyl brillant dans une pipette pour hémoglobine et les verser dans un petit réci-
Bleu de crésyl brillant en solution
pient pouvant être refermé. Mélanger soigneusement et prélever un frottis fin après 30 min.
pour le coloration de réticulocytes et des Analyses en série
trichomonades A l’aide d’une tige en verre, étaler une fine couche de solution de travail du bleu de crésyl brillant sur un porte-objet. Des porte-objets ainsi préparés et pour la microscopie séchés à l’air se conservent 2 à 3 semaines. Pour la numération des réticulocytes, déposer rapidement une goutte de sang sur la couche de colorant et mettre immédiatement le porte-objet avec le matériel encore humide dans une chambre humide pendant 5 - 10 minutes (boîte de Pétri avec du papier filtre humidifié). Faire ensuite sécher Dispositif médical de diagnostic in vitro à l’air.
Numération au microscope Le présente « Bleu de crésyl brillant en solution - pour le colortion de Effectuer la numération des réticulocytes sur 1000 érythrocytes au micros- réticulocytes et des trichomonades pour la microscopie » est utilisé pour le cope en tours méandreux avec immersion d’huile. Pour ne pas perdre le diagnostic cellulaire dans la médecine humaine et sert à l’examen hémato- fil lors de la numération, insérer un filet de numération pour réticulocytes logique d’échantillons d’origine humaine. C’est une solution de colorant qui divisé en petits carrés (ou un diaphragme carré en papier) dans l’un des est utilisée pour rendre des structures cibles analysables pour le diagnostic deux oculaires. (par coloration) dans des épreuves hématologiques. Dans le sang périphérique, on trouve presque exclusivement les degrés III et IV de développement. Avec le bleu de crésyl brillant les réticulocytes Principe montrent un réseau bleu noir que des points en bleu noir. Il est possible de déterminer la capacité de régénération des érythrocytes en effectuant une numération des réticulocytes. Pour l’examen microscopique de préparations colorées avec un grossisse- La détermination de la substance granulo-filamenteuse (ribunonucléopro- ment >40x, il est recommandé d’utiliser de l’huile d’immersion. téine) se fait à l’aide de jeunes érythrocytes non fixés (dans une coloration supravitrale). Résultat Selon le degré de développement des réticulocytes, on différencie quatre formes de maturité de la substance granulo-filamenteuse : serpentin (I), Dans le sang périphérique, on trouve presque exclusivement les degrés réticulaire incomplet (II), réticulaire complet (III) et granulaire (IV). Dans le III et IV de développement. Avec le bleu de crésyl brillant les réticulocytes sang périphérique, on trouve presque exclusivement les degrés III et IV de montrent un réseau bleu noir que des points en bleu noir. développement. Le nombre de réticulocytes est exprimé par rapport à 1000 érythrocytes Avec le bleu de crésyl brillant les réticulocytes montrent un réseau bleu noir comptabilisés, c’est à dire en ‰. En présence d’un nombre faible d’éry- que des points en bleu noir. throcytes, on se reportera au nombre absolu de réticulocytes/µl.
Matériel d’échantillons Calcul
Sang veineux anticoagulé ou dans des cas exceptionnels sang capillaire nombre d’érythrocytes/µl x nombre de réticulocytes(‰) Nombre de réticulocytes = [cellules/µl] 1000 Réactifs Art. 101384
Bleu de crésyl brillant en solution 100 ml, 25 l pour le colortion de réticulocytes et des trichomonades Valeurs normales pour la microscopie ‰ Nombre de réticulocytes/µl Adultes 5 - 15 25 000 - 75 000 Nécessaire en plus : Nouveaux-nés 20 - 60 100 000 - 300 000 Art. 106404 Chlorure de sodium pour analyse 500 g, 1 kg, EMSURE® ACS,ISO,Reag. Ph Eur 5 kg Remarques techniques Le microscope utilisé doit respecter les exigences d’un laboratoire de dia- Préparation des échantillons gnostics médicaux. Le prélèvement d’échantillons doit être effectué par du personnel qualifié. Utiliser une pipette à hémoglobine et un filet de numération pour réticulo- Tous les échantillons doivent être traités conformément aux règles de l’art. cytes. Tous les échantillons doivent être clairement identifiés. La solution de colorant diluée doit être filtrée avant utilisation. Utiliser des instruments appropriés pour le prélèvement d’échantillons et la Eliminer l’excédent d’huile pour immersions avant l’archivage. préparation, respecter les instructions du fabricant pour l’emploi / l’utilisa- tion. Diagnostic Les diagnostics doivent être exclusivement effectués par des personnes Préparation du réactif autorisées et formées. Solution saline isotonique Les nomenclatures en vigueur doivent être utilisées. Pour la préparation d’env. 1000 ml de solution, il faut additionner et dis- Des tests plus poussés seront choisis et réalisés selon des méthodes recon- soudre : nues. Chaque étape doit être effectuée sous contrôle, afin d’exclure toute possibi- Chlorure de sodium 8,5 g lité de résultat erroné.
Eau distillée 991,5 g
Stockage Stocker le Bleu de crésyl brillant en solution - pour le colortion de réticulo- cytes et des trichomonades pour la microscopie entre +15 °C et +25 °C. Solution de travail du bleu de crésyl brillant Le Bleu de crésyl brillant en solution, art. 101384, peut être utilisé sous forme non dilué ou dans une dilution de 1 : 200 maximum avec de la Stabilité solution isotonique de chlorure de sodium. La dilution optimale devra être Le Bleu de crésyl brillant en solution - pour le colortion de réticulocytes réalisée lors d’un test préalable. et des trichomonades pour la microscopie peut utiliser jusqu’à la date de La solution de colorant diluée préparée extemporanément chaque journée péremption indiqué. de travail et filtrée avant utilisation. Après la première ouverture du flacon, conserver entre +15 °C et +25 °C et utiliser jusqu’à la date de péremption. Tenir les flacons toujours bien fermés.
Capacité env. 1000 applications / 100 ml Remarques sur l’utilisation Réservé à une utilisation professionnelle. Pour éviter les erreurs, l’application doit être effectuée par un personnel qua- lifié. Respecter les directives nationales relatives à la sécurité au travail et à l’assurance de la qualité. Utiliser des microscopes équipés conformément au standard.
Protection contre les infections
Veiller impérativement à une protection efficace conformément aux direc- tives des laboratoires.
Consignes d’élimination Eliminer l’emballage conformément à la réglementation en vigueur. Les solutions usagées et les solutions dont la date de péremption est dé- passée doivent être traitées comme des déchets dangereux, en respectant les directives locales relatives à l’élimination des déchets. Pour commander les instructions sur l’élimination des déchets, cliquer sur le Quick Link « Hints for Disposal of Microscopy Products » sur www.microscopy-products.com. Au sein de l’UE s’applique le règlement CE) n° 1272/2008 relatif à la clas- sification, à l’étiquetage et à l’emballage des substances et des mélanges, modifiant et abrogeant les directives 67/548/CEE et 1999/45/CE et modi- fiant le règlement (CE) N° 1907/2006.
Réactifs auxiliaires Art. 101368 Bleu de crésyl brillant zinc chlorure sel double 25 g pour la microscopie Certistain® Art. 103699 Huile pour immersion selon ISO 8036 flacon compte- pour la microscopie gouttes de 100 ml Art. 104699 Huile pour immersions flacon compte- pour la microscopie gouttes de 100 ml, 100 ml, 500 ml Art. 106009 Méthanol pour analyse 1 l, 2,5 l, 5 l EMSURE® ACS, ISO, Reag. Ph Eur Art. 106404 Chlorure de sodium pour analyse 500 g, 1 kg, EMSURE® ACS,ISO,Reag. Ph Eur 5 kg
Classification des matières dangereuses
Art. 101384 Tenir compte de la classification des matières dangereuses indiquées sur l’étiquette et les indications de la fiche de données de sécurité. La fiche de données de sécurité est disponible sur le site web et sur demande.
Composants principaux de produit
Art. 101384 C.I. 51010 1 g/l C.I. 52040 3 g/l NaCl 9 g/l 1 l = 1,01 kg
Autres produits d’IVD
Art. 101383 Eosine-bleu de méthylène en solution 100 ml, 500 ml, selon Wright 2,5 l pour la microscopie Art. 109204 Azur-éosine-bleu de méthylène selon 100 ml, 500 ml, Giemsa en solution 1 l, 2,5 l pour la microscopie Art. 111674 Hemacolor® Coloration rapide des frottis 1 set de sang coffret de coloration pour la microscopie
Littérature 1. Löffler, H., Rastetter, J., Haferlach, T, Atlas der klinischen Hämatologie, 2004, Springer-Verlag Berlin Heidelberg 2. Conn’s Biological Stains: A Handbook of Dyes, Stains and Fluorochromes for Use in Biology and Medicine, 10th Edition, (ed. Horobin, R.W. and Kiernan, J.A). Bios, 2002
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