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¡A. 8;BUOTECA DE l) U"'iYE~¡"o',o
OH NORTE

originales

Alteraciones en el perfil electroforético proteico


sérico en individuos alcoholicos crónicos
ARNULFO RAMBAL1, GERMAN ANZOLA2 y MARTHA GUERRA DE MUI'iIOZ3

Sobre una muestra de 48 pacientes alcohólicos crónicos, de la clínica FUNDAR, de Bogotá, se hicie·
ron análisis colorimétricos y electroforéticos de proteínas séricas, comparándose los resultados esta-
dísticamente, según la distribución normal estándar, contra 48 testigos no alcohólicos, con los si·
guientes resultados: a) los valores de proteínas séricas totales son iguales en ambos muestreos; b) los
valores de albúmina son mayores en los alcohólicos crónicos sin sobrepasar los valores de referencia;
e) las globulinas totales son menores en los testigos y por debajo de los valores de referencia; d) la
a: l-globulina, la O' 2-globulina y la 'Y -globulina disminuyen en los alcohólicos crónicos pero dentro
de los valores de referencia, mientras la ¡3-globulina no muestra variación.

Palabras claves: alcoholismo, proteínas sanguíneas = proteínas séricas, albúmina sé rica, electroforc-
sis de proteínas sanguíneas, globulinas séricas, a:-globulina, ,B-globulina, ')'-globulina.

Introducción la qu (mica corporal semejantes a las causadas por


otros sedantes, tales como barbitúricos y tranqui-
El alcohol ha sido conocido y utilizado por las
lizantes. Como tal, el alcohol tiene múltiples im-
sociedades humanas desde los tiempos prehistóri-
plicaciones farmacológicas.
cos, y su uso y abuso, han influ (do durante mu-
cho tiempo sobre las costumbres culturales. Su Estudios electrofisiológicos sugieren que el al-
ingestión, en cantidades moderadas, es un hábito cohol, al igual que otros anestésicos generales, tie-
socialmente aceptado en muchas partes del mun- ne su primera acción depresora sobre aquellas par-
do; pero ingerido en exceso) no solo es socialmen- tes del cerebro que participan en las funciones al-
te nocivo, sino que constituye también un proble- tamente integradas. Las estructuras polisinápticas
ma de salud pública. del sistema activador reticular de algunos sitios
corticales son particularmente susceptibles, la cor-
El alcohol ingerido en grandes cantidades se
teza queda entonces liberada de su control inte-
convierte en una droga) originando alteraciones en
grante, lo que da por resultado que los diversos
procesos relacionados con el pensamiento ocurran
R'ecibido 24 de ;ulio, 1984. Aceptado 16 de octubre, 1984. en forma desorganizada y que se interrumpa la ac-
tividad normal de los procesos motores.
1. M.Sc. Derartamento de Biología, Universidad del Atlántico.
Barranquilla, Colombia. Si la velocidad de absorción del alcohol en el
conducto gastrointestinal es elevada, puede resul-
2. M.Sc. Escuela Militar de' Medicina y Pontifjcia Universidad la-
tar una concentración relativamente grande en la
veriana. Bogotá. D.E. Colombia.
sangre por la ingestión de una pequeña cantidad
3. M.Sc. Pontificia Universidad Javeriana. Bogotá. D.E. Colom- de alcohol. Lo mismo sc aplica si cs vana su distri-
bia. bución hacia los tejidos (como los músculos). Qui-
© Universidad del Norte zá por escaso riego sangu (neo. En ambas circuns-

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UNIVERSIDAD DEL NORTI
BjJ3b!PILcA
tancias, pueden producirse rápidamente los efec- mediante electroforesis en acetato celulosa (Super
tos centrales en virtud de que el encéfalo tiene un Seprahore), de Gelman Sciences).
gasto sanguíneo especialmente elevado y un gran El "buffer" utilizado fue barbitol sódico, pH
coeficiente de afinidad por el alcohol y los efec- 8.8 (High resolution Buffer, Tris -Bartital 50-
tos, en consecuencia, son de breve duración. dium, Barbital de Gelman Sciences). Las fraccio-
Nuestra investigación fue la de comparar los pa- nes proteicas obtenidas se revelaron con Ponceau
trones electroforéticos de los niveles de las dife- S, (Ponceau General Protein Stain 0.5%w/v Pon-
rentes fracciones proteicas séricas en individuos ceau S, in 7,5/ w/v Tricholoroacetic Acid in water,
alcohólicos crónicos e individuos normales, con el de Gelman Sciences), La cuantificación de las
fin de poder predecir en cuales de ellos aparecen mismas, se hizo en un densitómetro Gelman
alteraciones para poderlos relacionar con resulta- DCD-16,
dos encontrados o informados en otras investiga~
El proceso de selección de ambos grupos se hi-
ciones de la misma naturaleza.
zo utilizando un protocolo elaborado con anterio-
ridad, En cada una de las determinaciones realiza-
Materiales y métodos: das se hizo control de calidad utilizando solucio-
Este estudio se llevó a cabo en 48 pacientes al- nes stándares en un suero control de referencia de
cohólicos crónicos internados en la clínica "Fun- concentraciones conocidas (Precinorum y Preci-
dar" en la ciudad de Bogotá. La muestra, consti- path S, de laboratorios Boehringer Mannheim
tuída por hombres y mujeres en igual número, S, A.),
presentaba edades comprendidas entre los 16 y 62 Se hizo, además, comprobación de calibración
años. apropiada de los equipos empleados, El análisis es-
Paralelamente, se estudió un grupo control in- tad ístico incluyó comparación de promedios basa-
tegrado por 48 personas sanas, mitad de sexo fe- dos en la distribución normal estándar, dado que
menino y mitad. de sexo masculino, en iguales el tamaño de la muestra era mayor de 30 pacien-
condiciones nutricionales y ambientales, tes y 30 testigos,
La muestra utilizada fue sangre venosa no es-
tancada (5,0 mi), Se tomó, estando los integrantes Resultados:
de los dos grupos en ayunas de 12 horas y se sepa- A 48 pacientes alcohólicos cronlCOS, no nata-
ró rápidamente del suero (evitando hemólisis) por dos, se le hicieron determinaciones de proteínas
centrifigación, Inmediatamente después, se proce- totales y deferenciadas utilizando métodos quími-
saron diferentes parámetros a estudiar. cos y electroforéticos, con el objeto de evaluar
La determinación de proteínas totales se reali- las posibles modificaciones inducidas en la sínte-
zó d.c acuerdo con el método de Biuret (1). En sis proteica ocasionada por la ingesta prolongada
esencia, el fundamento se basa en lo siguiente: las de etanol (Fig, 1), Paralelamente a ese estudio, se
prote ínas y los péptidos, al contrario que otros

..--
0, 0'''';•.•
compuestos nitrogenados (creatinina, urea, ácido ., ~',",""'.
GEL'M~

,~
SCIENaS,

úrico), dan en solución alcalina con iones de co-


bre un compuesto de color violeta debido al com-
lo•• ',"o
~, .
c...•......•
.'
n., ••
•••" ••••• d

R_'«l
.,~'fll
'TOTAL

.""4'"
plejo que se forma entre el ión cúprico y dos enla- ec.

I" I
REL' GR."
'"
ces peptídicos (1), I 6.01.75

I I , 1.96
La valoración de albúmina se basa en el método
I
, ."
J
escrito por Dumas, B,T, Watson, W.A, y Biggs, H.
I I I I lUl
G. (1) cuyo principio es: la albúmina en una solu- I I 1, 15_671
ción "tamponada" reacciona con el verde de bro· I 1
mocresol, formando una reacción de enlace con I
el tinte. I
Las globulinas totales se calcularon mediante la I
diferencia entre las concentraciones de las proteí-
nas totales y las albúminas, Las determinaciones Fig. 1. Proteinogramaelectroforético sérico de un individuo
de las diferentes fracciones protéicas se realizaron alcohólico crónico.

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determinó los niveles de perfil proteico en 48 indi-
viduos sanos: para ello se hicieron las mismas medi-
.", c:::JAkOMII"".
ciones del grupo en estudio (Fig. 2). En la figura 3 ~NOajcohól_

se muestra los niveles de proteínas totales, albú-


mina y globulinas totales, analizada en los indivi-
duos alcohólicos crónicos. Encontramos que hay
,,-
~-
,,~ Rec¡unted "
o•••
GELM¡\,N

•.
SClENCLS,
~., '"0
Lot.,ion C.alog
I'<rlorm<d

00<,.,
". RepOned
No. 9361
TOl¡\,l
GRAMS.
(;cmmo."

,,~
flC·

'"' REL.'lI, GR,"


Albú ••.•••

Fig. 4. Valores promedios de las diferentes fracciones pro-


teicas de los dos grupos en estudio.

I
En la literatura médica consultada, encontra-
mos que paciente cirróticos post-alcohólicos,
muestran un cuadro proteinográmico de hipopro-
teinemas acompañado de hipoalbuminemia e hi-
pergamaglubul inem ia .
./
~
,
"Ibu", 0,
, 0', , No Valores de
• Alcohólicos Alcohólicos referencia

Fig. 2. Proteinograma electroforético sérico de un indivi· Proteínas 6.84854 6.81479 6.5 - 8.5
duo testigo totales l. : 0.950301 0.353674

g/di

c::::J
Albúmina
1: 4.7048
0.81149
4.02396
0.30047
3.5· 5.0

Alcohólicos

~NQalcohÓlicos Glubulinas
totales [: 2.143958
0.50401258
2.780208
0.31723868
j 2.5 - 3.5

6 0-1 0.223958 0.2639586 0.1 - 0.4


r ~ 0.199795 0.101682

0-2
I~ 0.546042
0.276903
0.66106
0.112737
0.2 - 1.2

~
1: 0.7475
0.229268
0.72638
0.1247506
0.5 - 1.1

O
1: 0.626625
0.28085353
1.110833
0.196358696
I 0.5 - 1.6

P'ot.totales Albúmina GlobuLtoul., TABLA 1. Relación de los diferentes valores promedios


de proteínas totales, albúmina y globulinas totales de indi-
Fig. 3. Niveles de proteínas totales. Albúmina y globulina viduos alcohólicos crónicos e individuos testigos.
totales de los dos grupos en estudio.
un ligero aumento en las proteínas séricas totales, En vista de que nuestros pacientes presentaron
hay un aumento en la albúmina sérica y las globu- un resultado diferente, decidimos estudiar 10 pa-
linas totales exhiben disminución. La figura 4 pre- cientes ci rróticos post-alcohól icos de diferentes
senta los diferentes patrones electroforéticos en centros hospitalarios de la ciudad, diagnosticados
los individuos alcohólicos crónicos y se puede ob- mediante pruebas de laboratorio y de patología
servar que la o: - 1 globulina: se encontró disminuí- (Biopsia hepática), encontrando que al analizar
da, lo mismo que la o: - 2 globulina; la ~-globulina las proteínas totales y diferenciadas, éstas se ajus-
no mostró variación, pero la 'Y-globulina presentó taban a los parámetros descritos como Ilcirrosis"
una disminución (ver tabla 1). (ver tablas 2, 3 Y 4).

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p•.•u.r ••••'o••l•• No se debe desconocer que, en la actualidad, es
G/Dl
AIb"mim>
GjOl ,~,
GI"""II"",

,.•
contra sentido el efecto del etanol sobre la s(nte-
,. V,R.
sis proteica, todo ello basado en los diferentes mé-
- ., - ,.• - H
todos de estudio. En teor(a, los experimentos me-
", , ", ",
I I ;
I
;
tabólicos sobre ensayos del efecto del etanol so-
•., I 0.25 1.48
I 0,05 3.02
1
0.10
bre s(ntesis de prote(nas, debeda llevarse a cabo
bajo condiciones completamente normales, lo
TABLA 2. Promedios totales de los valores obtenidos en cual se da pocas veces. Cuando organismos (nte-
proteínas totales, albúminas y globulinas totales, en 10 gramente normales, la cond ición nutricional, por
pacientes cirróticos alcohólicos estudiados. lo tanto, los efectos directos del etanol sobre un
aspecto espedfico del metabolismo, son con fre-
cuencia diti'ciles de precisar. Se ha documentado
que el etanol afecta muchos sistemas al mismo
"lbúmi", .., .., , , tiempo, considerando que estos sistemas funcio-
,.•
GIDL GrOL GIDL GIDL G¡OL

V.R. V,R. V.R. V,R.


nan de una manera integrada. Un cambio produ-
cido en un sistema cualquiera trata de ser com-
0.1-0.4 •. ; U 0.5_1.6

,"
).S·U
pensado por la adaptación de otros sistemas.
xl> ,1; 1
"
; ,1, , 1 ;
Muchos sistemas se han caracterizado por anali-
1.4810.2.1 0,1,10,02
" 10.01
"
10.0) 2.42 1 •., zar si la función de un órgano determ inado y por
otro lado los resultados a nivel de s(ntesis de pro-
TABLA 3. Valores promedios de las fracciones protéicasen tdnas presentan resultados antagónicos, es decir,
los pacientes cirróticos estudiados.
organismos alcohólicos presentan alteraciones
(inhibiciones) en la s(ntesis de la albúmina como
se ha reportado que ocurre en hígado de coneji-
.., .., llos de Indias, mas no la incorporación de amino-
_.
,......
1'<01.1 ••• , ,,~.,i ••• GIob.fi •.•••
'0' ••••

Ak0h6I0:0 Al<ohólO:o "I,_;eo Al_o "koMi",o Al,_;:o "',ohIil""


ácidos en las protdnas del corazón (7).
• o!Iolco rn...;, • "óoko ,nlnO:o "ónlco ,o!Ioko

,. También se ha observado, que, al alimentar ani-


..•
V.ml •••••• S.lO 1,16 0,01 O.U 0.34 0.001

•• males de experimentación con etanol, por 4 sema-


,-- .., ..,
V,mbl •••• m 0.61 1.31 1.)6 1.140

Prol.IO ••••• Albú.,i •.••


GloboH"" nas, se presenta una disminución en el contenido
de proteínas del corazón.
,. 2.11 0.16 0.47 O,S¡ 0,6] Debe tenerse en cuenta, al analizar los efectos
V'.ml.>l •••• I,OO 0.56 0.93 '.00 1.51
metabólicos, no solamente la posible acción del
etanol, sino también los intermediarios generados
TABLA 4. Valores máximos y mínimos de proteínas sé- durante su oxidación ya que la producción de ace-
ricas en individuos alcohólicos crónicos y no alcohólicos. taldehido, afecta la síntesis proteica (8).
Las anteriores consideraciones pueden analizar-
se teniendo el cuenta el siguiente aspecto: las en-
Discusión
zimas, como proteínas que son, juegan un papel
Las diferentes investigaciones realizadas sobre importante en el metabolismo por catalizar mu-
el efecto del etanol en la s(ntesis de prote(nas. chas reacciones bioqu ímicas; por lo tanto, la sín-
Muestran como, en los alcohólicos, se observa al- tesis proteica alterada como consecuencia de la in-
gunas alteraciones relacionadas con la nutrición gesta crónica de etanol, puede ser causa de una
celular. deficiencia a nivel enzimático. Es de suponer que
Es lógico pensar que una disminución en la s(n- los efectos metabólicos del etanol están dirigidos
tesis de una prote(na alterará las diferentes reac- fundamentalmente a aquellos órganos que lo me-
ciones metabólicas celulares; según sea ésta, el tabolizan; de hecho, el más importante es el híga-
efecto será diferencial para el célula y si las altera- do, considerando sus múltiples funciones: desin-
ciones permanecen, muchas células se comprome- toxicación de diferentes tipos de productos prove-
ten y pueden ser afectadas, originando daño en un nientes del metabolismo del amoníaco de la inges-
órgano con implicaciones a nivel del organismo ta diaria. La formación de bilis, regulación de los
total. niveles de glucosa sangu ínea y s(ntesis de muchas

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proteínas plasmáticas, incluyendo factores de coa- - Modificaciones inducidas por la deficiencia de
gulación; procesos éstos que requieren de gran nú- enzimas.
mero de enzimas, sintetizadas en el propio híga- - Fundamentales en la síntesis proteica.
do, nos pemite decir que el funcionamiento del
hígado depende del mantenimiento equilibrado - Alteración en la incorporación de aminoácidos,
de la síntesis de prote ínas. por modificación de factores o enzimas que de-
terminan el proceso.
Se ha demostrado, en ratas, que el consumo de
- Alteración en la incorporación de aminoácidos,
etanol disminuye la síntesis de albúmina (5, 6).
por modificación de factores o enzimas que de-
Existen evidencias de que la disminución de terminan el proceso.
ciertas proteínas plasmáticas, corresponde a una
- Alteraciones a nivel mitocondrial, al ser estas la
disminución en su secreción, lógicamente, esto
principal fuente de energía, lo cual induciría
nos muestra un efecto marcado sobre el equilibrio
por deficiencia energética, alteración en la sín-
interno, pero no explica las modificaciones en la
tesis proteica.
síntesis de proteínas al interior del hígado (45).
- Modificación de proteínas plasmáticas por alte-
La importancia de los sistemas generadores de
ración en los procesos de permeabilidad celular
energía, deben ser tenidos en cuenta, pues los
efectos del etanol sobre la función mitocondrial para las mismas.
son conocidos (1. 2. 4). '
Alteraciones en las enzimas microsomáticas da-
da su característica de ser inducibles, explicaría- Conclusiones
también muchas alteraciones en procesos metabó-
1. Los valores de proteínas séricas totales, cuanti-
licos, si no descartamos el papel que puede tener
el sistema microsomático sobre la oxidación del ficadas en individuos alcohólicos crónicos son
etano., podemos pensar que una deficiencia en la iguales a los de los individuos del grupo testigo
actividad de este sistema, dejarr'a moderadas con- y todos los valores se encuentran dentro del
centraciones del etanol circulante, en busca de ser rango de referencia.
degradado, obligatoriamente, por parte del siste- 2. Los valores de albúmina, son mayores en los in-
ma de la alcohol deshidrogenasa. dividuos alcohólicos crónicos que en los indivi-
duos testigos, pero se localizan dentro de los
Toda discusión o apreciación teórica sobre los valores de referencia.
efectos del etanol, en la síntesis de proteínas, de- 3. Los valores de las globulinas totales, son meno-
be considerar los modelos experimentales que se res en los individuos testigos y además, están
utilicen en las condiciones totales del organismo por debajo de los valores de referencia.
afectado. Los efectos del etanol en animales de
experimentación, dependen de la dosis suministra- 4. La 1 -globulina presenta una disminución en los
da de los métodos de administración, del estado individuos alcohólicos crónicos con relación a
nutricional y del estado orgánico, lo cual tiene va- la misma en los individuos testigos, pero dentro
lidez especial en nuestro caso. de los valores de referencia.

Las interrelaciones entre nutrición y enferme- 5. La 2-globulina tiene una disminución en los in-
dad alcohólica, no ha sido ampliamente estudiada dividuos alcohólicos crónicos con relación a los
y tal vez este ser ía un campo para continuar esta individuos testigos, pero dentro de los valores
línea de investigación. de referencia.

La tendencia de los resultados obtenidos en 6. Los valores de la -globulina no esperimenta va-


nuestros experimentos están de acuerdo con los riación con relación a los valores de la misma
informados en la literatura, es decir, que existen en los individuos testigos y los valores de refe-
evidencias suficientes para indicar que hay modifi- rencIa.
caciones en los niveles de proteínas plasmáticas en 7. La -globulina tiene una disminución en los indi-
los organismos tratados crónicamente con etanol; viduos alcohólicos crónicos, con relación a la
las posibles explicaciones para ello, podríamos misma en los individuos testigos, pero se en-
centrarlas desde los siguientes puntos de vista: cuentra dentro de los valores de referencia.

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