Vous êtes sur la page 1sur 2

Matériaux et méthodes

Échantillonnage

Trente échantillons de fromage ont été collectés dans la grande Jordanie Gouvernorats (Amman, Al-
Balqa, Jerash et Madaba) utilisant une glacière. Des pinces pré-stérilisées enveloppées de papier
d'aluminium ont été utilisées pour prélever des échantillons de fromage blanc à pâte molle de chaque
site déterminé dans les gouvernorats, et a été placé dans des sacs en plastique pré-stérilisés scellables
à 500 g de chaque site. UNE questionnaire de collecte d'informations sur le fromage a été rempli à le
moment de l'échantillonnage en interrogeant les producteurs de fromage.

Tests microbiologiques

L'homogénat d'échantillon a été préparé en utilisant 25 g de chaque échantillon prélevé à partir de


trois pièces différentes évitant la surface dans un sac pré-stérilisé, et 225 ml de tampon de dilution au
citrate de sodium à 2% à 40 ° C-45 ° C était ajoutée. Des dilutions en série appropriées ont été
effectuées [13]. Comptage de plaques standard (SPC): le comptage de plaques standard a été exécuté
en utilisant de la gélose de comptage sur plaque par la méthode sur plaque coulée selon Laird et al.
[13]. Les boîtes ont été incubées à 32 ± 1 ° C pendant 48 ± 3 h. Le nombre a été calculé et exprimé en
UFC / g de fromage.

Comptage des bactéries lactiques (LABC):

Verser le placage de l'échantillon dilutions ont été effectuées en utilisant de la gélose MRS stérilisée
pré-préparée (Oxoid, ROYAUME-UNI). Les plaques ont été incubées à 37 ± 1 ° C pendant 48 ± 3 h
dans un environnement aérobie réduit. conditions. Les colonies individuelles ont été testées pour la
réaction de catalase, gramme réaction (kit de coloration de Gram, laboratoire Delta, Espagne) et
morphologie cellulaire. Les cocci ou bâtonnets Gram positifs, catalase-négatifs ont été
provisoirement considérés comme être des bactéries lactiques [14].

Nombre de levures et de moisissures:

le nombre de levures et de moisissures a été effectué selon à Frank et Yousef [14]. La gélose sur
plaque (Himedia, Inde) était utilisé après que deux ml de solution antibiotique ont été ajoutés pour
100 ml de moyen et mixte. La technique de placage étalé a été utilisée et les plaques ont été incubés à
25 ° C pendant 5 jours.
Dénombrement de Staphylococcus aureus:

gélose Baird-Parker (BPA) (Oxoid) en utilisant la méthode de la plaque striée. Les plaques ont été
incubées à 35 ± 1 ° C pendant 45- 48 h. Production de coagulase, test de catalase, utilisation
anaérobie de le glucose et le mannitol et la coloration de Gram ont été utilisés pour plus d'assurance
[15]. Contrôle positif de Staphylococcus aureus subsp. aureus 43300 ™ a été acheté et utilisé à des
fins de comparaison.

Comptage des entérobactéries: le comptage des entérobactéries a été effectué comme décrit dans la
Norme internationale, ISO 21528-2: 2004. Pour technique de plaque a été appliquée en utilisant de la
gélose biliaire-glucose rouge violet (VRBG) (Oxoïde). Les plaques ont été incubées à 37 ° C pendant
24 h ± 2 h. Entérobactéries les colonies suspectes ont été confirmées par coloration de Gram, test à
l'oxydase et test d'oxydation / fermentation.

Présence de Salmonella: L'homogénat d'échantillon a été préparé en utilisant bouillon de lactose et


incubé à 35 ° C pendant 24 ± 2 h (étape de pré-enrichissement).

Isolement de Salmonella: une quantité de 10 ml de mélange a été transférée à 100 ml de bouillon de


sélénite cystéine (CS) (Himedia). Le mélange était vortexé et incubé pendant 18 à 24 h à 37 ° C
(étape d'enrichissement). Les cultures incubées ont été mélangées et striées sur de la gélose verte
brillante (BG) (Himedia, Inde). Les plaques ont été incubées à 37 ° C pendant 20-24 h, puis examiné
pour la présence de colonies suspectes de Salmonella. Tests de confirmation biochimique incluant
des inclinaisons de TSI (triple sucre gélose au fer, Himedia), LIA (gélose au fer lysine, Himedia) et
gélose à l'urée UA, Himedia) ont été inoculés par des stries obliques et des fesses poignardées. le
trois inclinaisons ont été incubées à 37 ° C pendant 24 h (ISO 6785: 2001). Positif lutte contre
Salmonella enterica subsp. enterica sérovar Typhimurium 14028 ™ a été acheté et utilisé à des fins
de comparaison.

Tests physiques et chimiques : pH du fromage titrable acidité (% d'acide lactique), sel (NaCl) en
saumure et le fromage, et la détermination des cendres ont été exécutés selon Hooi et coll. [16]. La
teneur en humidité a été mise en œuvre comme Case et al. [17]. Kit de test de phosphatase pour le lait
et les produits laitiers (HEYL, Allemagne) a été utilisé comme décrit par la société HEYL.
Échantillon de fromage de 0,25 g a été ajouté aux réactifs de test au lieu du lait. Positif et négatif les
contrôles du test de phosphatase ont été effectués en fabriquant des fromage blanc à pâte molle tel
que décrit par Humeid et Tukan [3], sauf que ils ont été transformés à partir de lait cru sans
pasteurisation. Le fromage était puis divisé en deux portions, la première a été bouillie, qui a servi de
contrôle négatif, et l'autre n'était pas bouilli, ce qui a servi de contrôle. Analyses statistiques Analyse
statistique des niveaux microbiologiques, physiques et chimiques les tests ont été analysés à l'aide du
test F, test t (LSD), gamme Studentized de Tukey et corrélation du logiciel d'analyse statistique
(SAS) version 9 [18, 19].