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Alpha-amylase
J.-L. Dhondt

L’amylase est une endoglucosidase qui scinde les liaisons 1–4 des polymères d’alpha-D glucose. Deux
groupes d’isoenzymes génétiquement différents existent chez l’homme : le type pancréatique et le type
salivaire. L’activité catalytique de l’amylase peut être déterminée dans le sérum ou l’urine. Depuis 2006,
il existe une méthode de référence recommandée par l’International Federation of Clinical Chemistry
(IFCC) et un matériel de référence permettant le calibrage. Utilisé initialement pour aider au diagnostic
de pancréatite aiguë, il est actuellement recommandé de lui préférer la lipase.
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Mots-clés : Enzymes ; Amylase ; Lipase ; Pancréatite ; Oreillons

Plan L’activité de l’amylase peut être mesurée dans le sérum ou le

plasma (prélèvement sur héparine ; les chélateurs du calcium sont
■ Intérêt physiopathologique 1 à éviter, acide éthylène diamine tétra-acétique [EDTA] et oxalate
inhibent l’activité).
■ Étape préanalytique 1 Ce paramètre fait partie de ceux ayant une très bonne stabi-
■ Techniques de mesures 1 lité (supérieure à dix heures à température ambiante, 48 heures à
Technique utilisant un substrat nitrophényl polyoside 1 +2 à 8 ◦ C) [1] . Cependant, il a été noté une activité généralement
Technique utilisant un substrat maltotétraose (G4 ) 2 instable dans les liquides biologiques provenant de ponctions
Dosage des isoenzymes 2 exploratrices (plèvre, ascite, kystes), de drains (abdominaux, pleu-
■ Interprétation des résultats 2 raux), de liquides prélevés au cours d’endoscopies digestives. Il est
Valeurs usuelles 2 nécessaire alors de procéder rapidement à l’analyse ou de congeler
Variations pathologiques 2 l’échantillon à –20 ◦ C.
Macroenzymes 2 La détermination de l’amylase urinaire est effectuée sur des
■
urines de 24 heures sans conservateur, mais placées au réfrigéra-
Intérêt actuel du dosage 2
teur. En cas d’urgence, le dosage peut être réalisé sur une miction.
L’amylase est instable à pH acide.

 Intérêt physiopathologique
L’amylase ou alpha-amylase est une endoglucosidase (1,4-
␣-D-glucane 4-glucanohydrolase, EC 3.2.1.1) impliquée dans la
digestion des sucres complexes, elle hydrolyse les liaisons
alpha 1–4 des polysaccharides de type amidon et glycogène.
Deux groupes d’isoenzymes génétiquement différents existent
chez l’homme : le type pancréatique (P) et le type salivaire (S).
Alors que le type P est presque exclusivement d’origine pancréa-
tique, le type S a des origines diverses. Il existe dans les glandes
salivaires, mais aussi dans les larmes, la sueur, le lait maternel,
le liquide amniotique, les poumons, les testicules et l’épithélium
des trompes de Fallope. Cela explique le manque relatif de spécifi-
cité du dosage. Les types P et S sont présents dans le sang en faible
quantité, déterminant chacune pour moitié l’amylasémie du sujet
normal.
C’est une molécule de petit poids moléculaire (50 kDa), elle
est donc filtrée par le glomérule rénal, en partie réabsorbée, et
éliminée dans les urines.
 Étape préanalytique
Le prélèvement doit être réalisé à jeun car le glucose diminue
les taux sériques de l’amylase (situation à prendre également en
considération en cas d’administration intraveineuse de solutés
glucosés).
 Techniques de mesures
Il existe de nombreuses techniques en fonction du substrat
synthétique utilisé. Un matériel de référence certifié (Certified
Reference Material : CRM 476), composé d’amylase pancréatique
humaine purifiée et stabilisée [2, 3] , permet néanmoins de standar-
diser les techniques.
Technique utilisant un substrat nitrophényl
polyoside
Le 4,6-éthylidène (G1)-4-nitrophényl (G7)-␣-(1→4)-D-malto-
heptaoside (EPS, Et-G7-PNP) est le substrat utilisé dans la méthode
de référence recommandé par l’IFCC [4] .
L’amylase libère soit du maltose (G2 ), soit d’autres polyosides
en G3 , G4 ou G5 :
5 Et-G7 -PNP → 2 ET-G5 + 2 G2 -PNp + 2 Et-G4 + 2 G3 -PNp + Et-G3
+ G4 -PNP
Une ␣-glucosidase hydrolyse ensuite la liaison ␣ 1-6 du PNP, le
PNP est mesuré à 405–409 nm :
2 G2 -PNP + 2 G3 -PNP → 4 PNp + 10 glucose (l’enzyme ne peut
agir sur G4 -PNP).
Un autre substrat, le 2-chloro-4-nitrophenyl-α-D-maltotrioside
(CNP), est également souvent utilisé [3, 5] .

EMC - Biologie médicale 1

Volume 8 > n◦ 1 > mars 2013
http://dx.doi.org/10.1016/S2211-9698(13)59252-1

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90-10-0095-A  Alpha-amylase
Tableau 1.
Performances attendues du dosage de l’amylase pancréatique [6] .
Niveaux de Bas Moyen
concentration (± 50 U/l) (± 150 U/l)
Répétabilité (%) 4,5 4,5
Reproductibilité 6 6
(%)
Justesse (%) 8 6,7
Technique utilisant un substrat
maltotétraose (G4 )
La séquence réactionnelle est :
• action de l’amylase : maltotétraose → 2 maltoses ;
• puis action d’une phosphorylase : maltose + phosphate → glu-
cose + glucose-1-phosphate ;
• puis action d’une phosphoglucomutase : glucose-1-phosphate
→ glucose-6-phosphate ;
• puis action d’une glucose-6-phosphate deshydrogénase :
+ NAD+ → 6-phosphogluconate + NADH, H+ .
Le NADH, H+ est mesuré à 340 nm.
Dosage des isoenzymes
Il peut se faire par séparation électrophorétique ou chromato-
graphique, ou par méthode immunologique. Une méthode par
inhibition permet le dosage des deux formes isoenzymatiques
dans le sérum ou l’urine (par exemple, systèmes Roche/Hitachi
Cobas) ; l’activité amylasique est mesurée (méthode chromogé-
nique) avant et après l’action d’un inhibiteur qui inhibe à 80 %
l’isoamylase S et à 20 % l’isoamylase P.
Les performances attendues du dosage sont rapportées dans le
Tableau 1 [6] .
 Interprétation des résultats
Ce sont essentiellement des augmentations de l’amylase qui
sont recherchées.
Valeurs usuelles
Les valeurs attendues chez l’adulte sont : de 31 à 107 U/l, soit
de 0,52 à 1,78 ␮kat/l à 37 ◦ C [4] ; l’amylasurie est inférieure à
440 U/24 h.
Variations pathologiques
Pancréatite aiguë
Augmentation de l’amylasémie qui atteint trois ou quatre fois
la valeur normale. Cette augmentation débute entre la 3e et la
6e heure, le maximum est atteint entre la 20e et la 30e heure. Les
taux se normalisent en 3 à 8 jours. Néanmoins, les valeurs sont
trouvées normales chez 10 à 15 % des patients. Parallèlement, on
note une augmentation de l’amylasurie, avec un décalage de 6 à
10 heures pour le début, le pic et la normalisation (une insuffi-
sance rénale entraînera une augmentation de l’enzyme sérique
par diminution de sa clairance rénale, jusqu’à deux fois la limite
supérieure des valeurs de référence).
La demi-vie de l’amylase sérique étant très courte, sa diminu-
tion dans le sérum peut être très rapide après le traitement ou
à la résolution de la pathologie initiale ayant entraîné son aug-
mentation. C’est la raison pour laquelle le dosage de la lipase,
une autre enzyme pancréatique ayant une demi-vie un peu plus
longue, est souvent prescrit en même temps que celui de l’amylase
afin d’augmenter l’efficacité diagnostique.
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Tableau 2.
Circonstances pouvant s’accompagner d’une augmentation d’amylase en
dehors des pancréatites aiguës.
Élevé
(±400 U/l) Anévrisme disséquant de l’aorte
3,8 Appendicite aiguë, péritonite
5 Brûlures étendues, choc traumatique
Cancers : ovaire, prostate, poumon, œsophage, sein, thymus, intestin
6,2
Chirurgie abdominale
Cholangio-pancréato-graphie
Cholécystographie
Diverticule duodénal
Grossesse ectopique rompue
Hémorragie intraabdominale
Hyperlipoprotéinémie de types I et V durant les épisodes de crise
abdominale
Intoxication aiguë à l’alcool
Kystes ovariens
Lithiase du cholédoque
Maladie inflammatoire pelvienne
Mononucléose infectieuse
Pancréatite chronique
Prise d’opiacés
Pseudokyste pancréatique
Sarcoïdose avec atteinte pancréatique
Traumatisme cérébral
Ulcère gastroduodénal perforé ou non
Autres pathologies
Cependant, le pancréas étant un organe très sensible aux
atteintes des organes voisins, l’amylase sérique est également aug-
mentée dans le cas de plusieurs autres atteintes abdominales ;
par exemple, la grossesse ectopique, la cholécystite, la chirur-
gie abdominale (10–15 % des patients), etc., et également en cas
d’intoxication aiguë à l’alcool et de prise d’opiacés (Tableau 2).
L’isoenzyme salivaire est augmentée dans les cas d’oreillons et
autres affections des glandes salivaires.
Macroenzymes
La macroamylase est un complexe anormal entre l’amylase
et une immunoglobuline (IgA dans 80 % des cas ou IgG). En
raison de son poids moléculaire élevé, ce complexe ne peut
être filtré au niveau rénal, et sa demi-vie sérique est allongée
provoquant une accumulation de l’enzyme dans le sérum. La pré-
sence de macroamylase (prévalence : 1–3 % de la population) n’est
associée à aucune pathologie spécifique, mais constitue une dif-
ficulté d’interprétation d’une activité sérique élevée. Le dosage
de l’activité amylase dans l’urine et le calcul de la clairance de
l’amylase par rapport à la clairance de la créatinine permettent
de soupçonner la présence d’une macroamylase. Cependant, sa
confirmation exige la séparation des isoenzymes du sérum par
chromatographie d’échange d’ions, électrophorèse ou focalisa-
tion isoélectrique.
 Intérêt actuel du dosage
Pour le diagnostic des pancréatites aiguës, le dosage de l’amylase
est de plus en plus abandonné au profit du seul dosage de la
lipase sérique (au seuil de trois fois la norme) qui est plus sensible
 Alpha-amylase  90-10-0095-A

(94 %) et plus spécifique (96 %) que l’amylase (sensibilité : 83 % et
spécificité : 88 %). On notera de plus que l’élévation de la lipasé-
mie est plus prolongée que celle de l’amylasémie. C’est ainsi que
l’évaluation faite en 2009 par la Haute Autorité de santé (HAS) [7]
a confirmé les termes du consensus de 2001 [8] :
• le couple sensibilité/spécificité de la lipase est toujours supérieur
à celui de l’amylase et ce, quel que soit le moment de la mesure ;
• l’association des deux dosages n’apporte aucun bénéfice sup-
plémentaire par rapport au simple dosage de la lipase.
 Références
[1] Foucher B, Pina G, Desjeux G, Prevosto JM, Chaulet JF, Cheminel
V. Influence de la température et du délai avant centrifugation sur la
stabilité de 28 paramètres de détermination courante en biochimie. Ann
Biol Clin 2005;63:93–100.
[2] Gubern G, Canalias F, Gella FJ, Colinet E, Profilis C, Calam DH,
et al. Production and certification of an enzyme reference material for
pancreatic ␣-amylase (CRM 476). Clin Chim Acta 1996;251:145–62.
[3] Canalias F, García E, Sánchez M. Metrological traceability of values for
␣-amylase catalytic concentration assigned to a commutable calibrator
materials. Clin Chim Acta 2010;411:7–12.
[4] International Federation of Clinical Chemistry, Laboratory Medicine
(IFCC), Schumann G, Aoki R, Ferrero CA, Ehlers G, Férard G, Gella
FJ, et al. IFCC primary reference procedures for the measurement of
catalytic activity concentrations of enzymes at 37 degrees C. Clin Chem
Lab Med 2006;44:1146–55.
[5] Gella FJ, Gubern G, Vidal R, Canalias F. Determination of total
andpancreatic␣-amylase in human serum with 2-chloro-4-nitrophenyl-
␣-D-maltotrioside as substrate. Clin Chim Acta 1997;259:147–60.
[6] Vassault A, Grafmeyer D, de Graeve J, Cohen R, Beaudonnet A,
Bienvenu J. Analyses de biologie médicale : spécifications et normes
d’acceptabilité à l’usage de la validation de techniques. Ann Biol Clin
1999;57:685–95.
[7] HAS. Évaluation de l’amylasémie et de la lipasémie pour le diagnostic
initial de la pancréatite aiguë. Rapport d’évaluation technologique. juin
2009, www.has-sante.fr/portail/upload/docs/application/pdf/2009-
07/texte court amylase-lipase 2009-07-27 16-56-8 583.pdf.
[8] Conférence de consensus : pancréatite aiguë. Conclusions et recom-
mandations du jury. Gastroenterol Clin Biol 2001;25:177–92.

J.-L. Dhondt, Professeur, Faculté libre de médecine (dhondtjlouis@gmail.com).

Laboratoire de biochimie, Hôpital Saint-Philibert, 115, rue du Grand-But, 59480 Lomme cedex, France.

Toute référence à cet article doit porter la mention : Dhondt JL. Alpha-amylase. EMC - Biologie médicale 2013;8(1):1-3 [Article 90-10-0095-A].

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