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TP ECBU Avril 2018 

AS MERAD, A ZEROUKI, HACHID, BELOUFA, NOUAR, TOUATI

Objectifs :
- Maîtriser l’examen microscopique.
- Connaître les techniques d’ensemencement d’une urine et savoir interpréter les résultats
d’un ECBU.

Premier jour (J1)

1- Examen macroscopique de l’urine :


Noter l’aspect (clair, trouble, purulent, hématique)
2- Examen microscopique :
 Examen et dénombrement des leucocytes à l’aide de Cellule de comptage
(Malassez) : Méthode de référence (Voir poste fixe correspondant)
- Mélanger l’urine par plusieurs retournements
- Prélever une goutte de l'urine totale à la pipette Pasteur et la Démonstration
déposer sur un des 02 compartiments de la cellule Malassez.
- Poser la lamelle dessus.

- Observer à l'objectif x40 :


01 bande =

Cellule Malassez
- 10 bandes (horizontal ou vertical)
- 01 bande = 10 rectangles
- Volume Malassez (10 bandes)
= 1 mm3 = 01 µl
= 01 bande

- Cellule
malasse
z-
o Noter la présence de leucocytes, bactéries (forme et disposition), hématies, cristaux,
cellules épithéliales,

o Dénombrer les leucocytes  selon les indications suivantes :


- compter le nombre de leucocytes dans au moins 3 bandes (horizontales ou verticales).
- Pour les leucocytes qui chevauchent 2 rectangles, ne les compter qu’une fois.
- Faire la moyenne du nombre de leucocytes par bande (total des cellules observées,
divisé par le nombre de bandes comptées)
- Multiplier le nombre obtenu par 10 pour connaître le nombre de leucocytes par mm3
(ou 1µl).

1
- Multiplier le nombre obtenu par 100 pour connaître le nombre de leucocytes dans 1 ml.

3- Numération urinaire (uroculture) par la  méthode de l’anse calibrée de 10 µl: 

- Prendre une boîte de Pétri contenant une gélose


nutritif (GN) bien sèche.

- Stériliser l’anse calibrée au Bec Bunsen et refroidir


contre les parois intérieures du tube d’urine.

- Prendre 10 µL d'urine bien homogénéisée à l’aide de


l’anse calibrée stérile  et déposer sur un rayon de la boite (a)

- Étaler le dépôt en stries perpendiculaires au rayon sur


toute la surface de la gélose (b).

- Incuber à 37°c pendant 24h.

Deuxième jour (J2)

1- Lecture des boîtes de numération:

- Sortir les boîtes de l’étuve

- Réaliser la numération des germes urinaires en comparant la densité des colonies présentes
sur la partie supérieure de la gélose à celle du schéma fourni ci-dessous (c).

- bactériurie : Exprimer le résultat de la numération en nombre UFC / mL d'urine

(c) Planche étalon

2- Interprétation biologique: (Voir polycopié : tableau interprétation ECBU)

Faire l’interprétation de l’ECBU en fonction de :


- Bactériurie

2
- Leucocyturie
- Renseignements cliniques

3- Orientation identification bactérienne:

- Aspect colonies après uroculture sur milieu chromogène (voir poste fixe correspondant).