Vous êtes sur la page 1sur 33

Méthode d’étude de la cellule

Cours physiologie cellulaire


Master 1 Microbiologie
Observation Microscopique

 Visualisation : micro (1 – 100 µm) nano (<1 µm) en temps différé

Microscope à
Microscope optique Microscope
force atomique (AFM)
électronique
La gamme des tailles des objets visibles par différentes
techniques de microscopie

La taille de l’objet le plus petit visible par une technique donnée est
limitée par le pouvoir de résolution de l’équipement ainsi que par
d’autres facteurs
• le microscope optique, aussi appelé photonique,
parce qu'il utilise des photons,

• le microscope électronique qui utilise des


électrons pour étudier l'objet,

• le microscope à champ proche qui utilise la force


atomique et l’effet tunnel.
Caractéristiques du microscope optique
Du microscope électronique en transmission
Et du microscope électronique à balayage
MICROSCOPE PHOTONIQUE

La technique de microscopie optique est la plus ancienne utilisée.


Principe : la préparation est éclairée par une lampe. Les molécules à observer
vont interagir avec la lumière de plusieurs façons :
il existe trois types de la microscopie optique:
• soit en absorbant certaines longueurs d'onde de la lumière. C'est la
microscopie en lumière directe ou Microscopie en lumière polarisée
• soit en provoquant un déphasage des différents rayons lumineux. C'est la
microscopie en contraste de phase.
• soit en émettant de la lumière à une autre longueur d'onde que celle
d'origine. C'est la microscopie à fluorescence.
Schéma de la structure d’une
bactérie de type bacille flagellé
Schéma d’une
cellule eucaryote
animale
Type de microscope?
Type de microscope?
Les échantillons biologiques doivent en général être recouverts d’une
couche de 5 à10 nm d’or, de platine ou de palladium, afin de réfléchir
les électrons.
MICROSCOPIE ÉLECTRONIQUE EN TRANSMISSION

La microscopie électronique en transmission (ou MET, en anglais TEM ou


Transmission Electron Microscopy) est une technique de microscopie où un faisceau
d'électrons est « transmis » à travers un échantillon très mince

Elle consiste à placer un échantillon suffisamment mince sous un faisceau d'électrons, et


à utiliser un système de lentilles magnétiques pour projeter l'image électronique de
l'échantillon sur un écran phosphorescent qui la transforme en image optique.
PRINCIPE DE FONCTIONNEMENT DU MET
Préparation des échantillons pour l’examen au microscope
Le microscope à
fluorescence: un microscope
photonique qui détecte une Répartition des éléments du cytosquelette
lumière fluorescente dans les neurones
Marquage de structures intracellulaires (noyau en bleu et
filaments d'actine en rouge) et suivi de l'internalisation d'une
protéine (la transferrine en vert)