PRÁCTICA 1

• Esta tabla refleja a concentración en nM de p-Nitrofenol que tienen los 5

patrones utilizados en esta práctica.

PATRONES ABSORBANCIA
S1 0.056
S2 0.212
S3 0.454
S4 0.918
S5 1.527

• En esta otra tabla se reflejan la cantidad de p-Nitrofenol de las 7 cubetas

resultantes de la reacción enzimática.
Tiempo Cubetas Concentración de Patrón similar
p-Nitrofenol
0 Inicio 0 S1
8 Fin 0 S1
1 E1 8.107 S2
2 E2 22.173 S3
4 E3 40.973 S4
6 E4 70.773 S4
8 E5 102.173 S5
 • Tasa de reacción
En este caso es imposible determinar la tasa de reacción, puesto que en la gráfica(en la
cual está representada la cantidad de p-Nitrofenol frente al tiempo), no se ha obtenido
ninguna parte lineal.
Esto puede ser debido a fallos en la lectura de alguna absorbancia en el
espectrofotómetro, o también puede ser debido a fallos al cronometrar el tiempo
transcurrido.
Si hubiera un tramo recto se podría calcular así (por ejemplo):

Tasa = Y2-Y1/X2-X1 = 102.173-8.07/8-1= NMOL/MIN

PRÁCTICA 2

• Esta tabla refleja a concentración en nM de p-Nitrofenol que tienen los 5

patrones utilizados en esta práctica.

PATRONES ABSORBANCIA
S1 0.068
S2 0.181
S3 0.393
S4 0.785
S5 1.607
 • Tabla que refleja como varía a cantidad de p-Nitrofenol a diferentes
temperaturas de forma aproximada, se non se ten espectrofotómetro.

Temperatura Patrón más similar Cantidad de p-Nitrofenol

formado
0ºC S2 12.5
22ºC (temperatura S3 25
ambiente)
37ºC S4 50

• Tabla donde se observan las absorbancias dadas por el espectrofotómetro y la

cantidad de p-Nitrofenol formado.

Temperatura Absorbancia Cantidad de p-Nitrofenol

formado
0ºC 0.204 11.898
22ºC (temperatura 0.536 33.044
ambiente)
37ºC 1.059 66.357

• Tasa de reacción
Tasa de producto formado a 0ºC = (11.898-0)/(2-0)= 5,949 nmol/min
Tasa de producto formado a 22ºC= (33.044-0)/(2-0)= 8.261 nmol/min
Tasa de producto formado a 37ºC= (66.357-0)/(2-0)= 33,1785 nmol/min

• Conclusiones

Al aumentar la temperatura, como se observa aumenta la cantidad de p-Nitrofenol por

minuto formado.

PRÁCTICA 3

• Esta tabla refleja a concentración en nM de p-Nitrofenol que tienen los 5

utilizados en esta práctica.

PATRONES ABSORBANCIA
S1 0.068
S2 0.181
S3 0.393
S4 0.785
S5 1.607
 • Cantidad de p-Nitrofenol formado a distintos pH, sin espectrofotómetro.

pH Patrón similar Cantidad de p-Nitrofenol

5 S3 25
6.3 S3 25
8.6 S3 25

• Cantidad de p-Nitrofenol a distintos pH, con espectrofotómetro.

pH Absorbancia Cantidad de p-Nitrofenol

5 0.302 18.14
6.3 0.369 22.408
8.6 0.340 20.56

• Tasa de reacción

Tasa de producto formado a pH=5 = (18.14-0)/(2-0)= 9,07 nmol/min

Tasa de producto formado a pH=6.3 = (22.408-0)/(2-0)= 11,204 nmol/min
Tasa de producto
formado a pH 8.6 =
(20.56-0)/(2-0)=
10,28 nmol/min
 • Conclusiones

Con la representación gráfica de la tasa de producto formado, se puede concluir que el

pH óptimo de trabajo de la enzima es al de 6.3, ya que es a ese pH cuando la reacción
transcurre más rápido.

PRÁCTICA 4

• Esta tabla refleja a concentración en nM de p-Nitrofenol que tienen los 5

patrones utilizados en esta práctica.

PATRONES ABSORBANCIA
S1 0.068
S2 0.181
S3 0.393
S4 0.785
S5 1.607
 • En esta otra tabla se reflejan la cantidad de p-Nitrofenol resultante de la reacción
enzimática a distintos tiempos y concentraciones.

Tiempo Cubetas Concentración de Absorbancia Patrón

p-Nitrofenol similar
1 H1 35.656 0.577 S3
2 H2 42.408 0.683 S3
8 H3 85.210 1.355 S4
1 L1 12.535 0.214 S2
2 L2 25.210 0.413 S3
8 L3 66.866 1.067 S4

• Tasa de reacción

Tasa inicial de la reacción de la enzima de alta concentración  35.656051/1=

35.656nmol/min
Tasa inicial de la reacción de la enzima de baja concentración 12.5350318/1=
12.5350318 nmol/min
 • Conclusiones
Se puede concluir que la variación de la concentración de enzima no afecta a la
velocidad de reacción.

PRÁCTICA 5

• Esta tabla refleja a concentración en nM de p-Nitrofenol que tienen los 5

patrones utilizados en esta práctica.

PATRONES ABSORBANCIA
S1 0.056
S2 0.212
S3 0.454
S4 0.918
S5 1.527
 • En esta otra tabla se reflejan la cantidad de p-Nitrofenol resultante de la reacción
enzimática a distintos tiempos y concentraciones.

Tiempo Cubetas Concentración de Absorbancia Patrón

p-Nitrofenol similar
1 H1 37.173 0.628 S4
2 H2 102.107 1.602 S4
8 H3 159.24 2.459 S5
1 L1 20.973 0.385 S2
2 L2 30.173 0.523 S3
8 L3 50.507 0.828 S4

• Tasa de reacción

Tasa inicial de la reacción de la enzima de alta concentración  37.173/1=

37.173nmol/min
Tasa inicial de la reacción de la enzima de baja concentración 20.973/1= 20.973
nmol/min

• Conclusiones
Con los resultados obtenidos, se puede determinar que a mayor concentración de
sustrato mayor es la cantidad de p-Nitrofenol formado, por lo cual mayor será la
velocidad de reacción.

PRÁCTICA 6

• Esta tabla refleja a concentración en nM de p-Nitrofenol que tienen los 5

patrones utilizados en esta práctica.

PATRONES ABSORBANCIA
S1 0.056
S2 0.212
S3 0.454
S4 0.918
S5 1.527
 • Datos experimentales

Cubeta Absorbancia a 410 Cantidad de p- Patrón similar

nm Nitrofenol producido
(nmol)
1 0.086 1.04 S1
2 0.093 1.507 S1
3 0.097 1.773 S1
4 0.093 1.507 S1
5 0.104 2.24 S1
6 0.000 0 S1

• Tasa de reacción

Tasa inicial de reacción= 1.04/1= 1.04 nmol/min

• Conclusión.
Se puede concluir, que el hongo utilizado contiene la enzima puesto que es capaz de
producir p-Nitrofenol, que es el producto de la reacción.