CORRECTION TD N° 4

EXERCICE 1

1.
-> La région codante (ORF) dans l’opéron tryptophane commence par une région leader qui
contient plusieurs codons Trp en son sein

-> Cette région est suivie de l’atténuateur = région où l’ARN en cours de synthèse peut prendre
plusieurs structures en épingle à cheveux.

La formation de la structure d’ARN dépend du positionnement du ribosome qui a commencé la

traduction au niveau de la région leader.

-> S’il y a peu de Trp dans la bactérie => le ribosome est bloqué (ou ralenti) au niveau des codons
Trp. Ce blocage laisse libre la région 2 qui peut ainsi s’hybrider avec la région 3

-> hybridation des régions 2 et 3 de l’ARN qui empêche la formation d’un terminateur intrinsèque =>
donc l’ARN-pol peut continuer son élongation.

-> S’il y a beaucoup de Trp dans la bactérie => le ribosome peut poursuivre la traduction malgré
la présence des codons Trp

->En avançant, le ribosome détruit l’hybridation des régions 2 et 3 de l’ARN, ce qui permet une
nouvelle hybridation (régions 3 et 4)

-> l’hybridation des régions 3 & 4 -> terminateur intrinsèque formé par ->la formation de ce
terminateur provoquera l’arrêt de la transcription.

2. Une mutation non sens au niveau du peptide leader aura les mêmes conséquences qu’il s’agisse
d’une concentration faible ou élevée en tryptophane. Dans les deux cas, le ribosome quitte l’ARNm
avant d’arriver aux codons tryptophane du peptide.

Dans ces conditions, la région 1 reste libre pour s’apparier à la région 2, laissant ainsi la possibilité à
la région 3 de s’apparier à la région 4. Ainsi, l’épingle à cheveux de l’atténuateur peut alors se
former. Dans ces conditions, on ne peut avoir que la formation de l’ARNm court. En conséquence,
dans le cas de cette mutation, quelque soit la concentration du tryptophane endogène, la bactérie sera
incapable de le synthétiser.

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EXERCICE 2

1.

A.
Analyse Western blot
La protéine Myoser a une masse moléculaire de 30 kDa chez les souris contrôles. Elle n'est
présente que dans le cœur et le muscle strié squelettique et en quantité plus importante dans ce
dernier. Chez les souris Mdx, la protéine Myoser s'accumule en quantité similaire dans les
deux tissus cependant sa masse moléculaire est réduite de 5 kDA.
Interprétation

L'analyse du Western blot suggère que le gène Myoser s'exprime spécifiquement dans le
muscle strié squelettique et le cœur pour donner une protéine active de 30 kDa. Chez la souris
Mdx, la protéine ne faisant plus que 25 kDa il y a une perte d'information qui doit la rendre
non fonctionnelle. Le phénotype Mdx pourrait être dû à la perte de fonction de la protéine
Myoser.

B.

Le gène Myoser possède trois exons et deux introns. Après transcription et maturation de
l’ARN pré-messager il y aura formation d'un ARNm qui comporte les trois exons plus une
queue poly(A) d'environ 200 adénosines. Cet ARNm aura donc une taille de :

Exon 1 (300 nt) + Exon 2 (200 nt) + Exon 3 (600 nt) + Queue poly(A) (200 nt) = 1300 nt ou
1,3 kb.

La taille de l'ARNm Myoser est donc en accord avec la structure du gène Myoser.

2.

A.
Souris Contrôle

Séquence du brin lu : 5'- CCC CCG CCT GGA TAG AAG GGC GTC TGT -3'

Séquence du brin réel : 5'- ACA GAC GCC CTT CTA TCC AGG CGG GGG -3'

Souris Mdx

Séquence du brin lu : 5'- CCC CCG CCT GGA TAG AAG TTA GTC TGT -3'

Séquence du brin réel : 5'- ACA GAC TAA CTT CTA TCC AGG CGG GGG -3'

B.

Le codon GCC codant pour une alanine a été transformé en un codon TAA qui est un codon
stop. Ce dernier entraîne un arrêt prématuré de la synthèse protéique, ce qui va donner une
protéine tronquée non fonctionnelle.
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