USTHB/FGC 2ère Année Master Hydraulique Urbaine

Travaux Pratiques : Epuration des eaux

TP3 : Détermination de la demande biochimique en oxygène (DBO5).

1. Définition
La demande biochimique en oxygène après n jours (DBOn) représente la quantité d’oxygène dissous qu’il
faut fournir à un échantillon d’eau pour minéraliser par voie biochimique (oxydation bactérienne) les
matières organiques et/ou inorganiques.

Il s’agit de la demande en O2 pour oxyder la matière organique à l’aide d’une biomasse épuratrice.

La DBO5 correspond à la demande biochimique en oxygène après 5 jours d’incubation de l’échantillon à une
température standard de 20°c.

2. Mode opératoire
 Choisir la gamme exacte de la DBO5 ;
 Mettre le volume nécessaire dans le flacon en verre bain ;
 Ajouté des gouttes de l’inhibiteur (1 allyle 2 thio-urée : C4H8N2S permet d’inhiber la nitrification
car l’oxydation des dérivés ammoniacaux et des nitrites en nitrates absorbe également de l’oxygène.
Cette amine joue un rôle d’inhibiteur. A introduire pour la mesure des eaux de sortie.) (selon le
volume d’échantillon prélevé on a : 20 gouttes dans 1 litre) ;
 Mettre le nombre nécessaire de pastille de NaOH (L'hydroxyde de sodium) dans le godet en
caoutchouc ;
 Mettre l’oxitop dans l’enceinte thermostats à 20°C ;
Après 5 jours d’incubation faire la lecture de la DBO5.

3. Remarque

Pour la mise en œuvre de la technique, l’opérateur se reportera au mode opératoire correspondant au

matériel utilisé.

4. Question

1- Expliquer en détail le mode opératoire utilisé ?

2- Quelle est la valeur de la DBO de cette eau ?
3- Conclusion (commenter votre résultat).
I. Introduction :
La Demande Biochimique en Oxygène (DBO) et la Demande Chimique en Oxygène ou DCO) sont
les deux paramètres expérimentaux importants régulièrement utilisés pour caractériser la quantité de matière
organique contenue dans l'eau et pour apprécier les risques induits de désoxygénation du milieu.
Il n’est en effet pas possible, dans des conditions analytiques et financières réalistes, de régulièrement
inventorier toutes les substances organiques susceptibles d’être contenues dans l'eau d'un cours d’eau ou
d'un effluent urbain, et d’en mesurer la concentration. La mesure de la DBO a été (avec l’oxydation au
permanganate en 4 heures) l’une des premières méthodes développées dès le début du XXème siècle en
Angleterre pour simuler les effets résultant des processus de biodégradation qui se produisent quand on
déverse de la matière organique dans une rivière bien oxygénée. Elle ne constitue pas une mesure réelle de
la quantité de matière organique ou de celle des espèces réductrices présentes. Elle représente en fait la
réponse expérimentale d'un modèle de biodégradation.

II. Définition :
La demande biochimique en oxygène (DBO), constitue une mesure de la pollution des eaux par les
matières organiques. C’est la quantité d’oxygène nécessaire aux microorganismes vivants pour assurer
l’oxydation et la dégradation des matières organiques présentes dans l’eau usée. Le rejet des matières
organiques fermentescibles par un émissaire d’égout, par exemple, provoque immédiatement une déplétion
de la teneur en oxygène dissous par dégradation sous l’action des bactéries aérobies, qui va s’atténuer dans
le sens du courant.
Dans le cas des eaux usées urbaines d’origine domestique, la demande d’oxygène mesurée relève
essentiellement de la respiration des micro-organismes qui vont dégrader la matière organique contenue
dans l’échantillon, c’est-à-dire la matière biodégradable qu’il contient. La consommation en oxygène
résultante évolue généralement dans le temps selon une courbe voisine de celle de la figure 1, dans laquelle
on note DBOn la quantité d'oxygène consommée au bout de n jours.
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Figure 1 : Consommation d'oxygène au cours du temps en l'absence de substance inhibitrice ; DBOn

représente la quantité d'oxygène consommée au bout de n jours.
A 20°C, au bout de 3 semaines, l’oxydation biologique des composés carbonés d’une eau résiduaire
urbaine d’origine domestique est quasiment achevée. Ce délai a permis aux bactéries nitrifiantes qui vont
oxyder l’azote ammoniacal en nitrites puis en nitrates de se développer malgré leur lente croissance. Au bout
d’un mois et demi, la totalité des composés carbonés et azotés biodégradables ont été oxydés et assimilés par
les micro-organismes. La consommation en oxygène correspondant à ces deux phases est appelée « DBO
ultime ». La consommation en oxygène à 21 jours (DBO21) est appelée « DBO carbonée ».

III. Normes et classes de la qualité des eaux superficielles

La qualité des eaux est extrêmement variable dans le temps et elle est fonction de différents facteurs.
Afin d’avoir une bonne connaissance de l’état globale d’un cours d’eau, et de pouvoir suivre son évolution
dans le temps ; le SEQ (Système d’Evaluation de la Qualité des eaux superficielles) à mis en place un outil
d’évaluation qui permet d’obtenir une image globale de la qualité des cours d’eau, et définit les aptitudes à
satisfaire les équilibres biologiques et les différents usages des cours d’eau. Les Agences des bassins
hydrographiques (ABH) algériennes se sont inspirées du SEQ eau pour classer les eaux superficielles. Cette
classification (tableau 2) repose sur une grille de la qualité des eaux superficielles (ABH, 2009).

Tableau 1. La qualité de l’eau destinée à la consommation en fonction de DBO5.

DBO5 (mg/l d’O2) Qualification de l’eau

DBO5 < 1 mg/l d’O2 Exellente qualite
DBO5 = 2 mg/l d’O2 Bonne qualite
DBO5 = 3 mg/l d’O2 Qualite moyenne
DBO5 = 5 mg/l d’O2 Eau moyennement polluée
DBO5 > 10 mg/l d’O2 Eau polluée

.
Tableau 2. Grille de la qualité des eaux superficielles pour DBO5 (ABH,2009).

Classes Unité Tres bonne Bonne Passable Mauvaise Tres

mauvaise
parametres
DBO5 mg/l d’O2 3 6 10 25 > 25

IV. Les normes de DBO5 pour les rejets :

DBO5 < 40 mg/l pour les normes algériennes NA
DBO5 < 30 mg/l pour les normes algériennes et l’OMS
DBO5 < 25 mg/l pour les normes françaises NFT90_30.
V.1. Détermination de la demande biochimique en oxygène DBO5 :
Les paramètres physicochimiques on analyse selon les protocoles ISO, NFT et la norme algérienne
NA.
V.1.1. Appareillage :
· DBO mètre (BOD Trak HACH) avec 6 flacons pour DBO contenant chacun un barreau
Magnétique et une cupule .
· Incubateur.
· Entonnoir, éprouvette, etc.
V.1.2. Réactifs :
• hydroxyde de Lithium (LiOH) . Il est utilisé à raison de 0,4 g pour chaque cupule.
• Solution composée de 150 mg/l de glucose et de 150 mg/l d'acide glutamique, ou
Ampoule voluette étalon DBO (réf. n° 14866-10 Hach).
• tampon nutritif (réf. n° 14861-98 Hach).
IV.2.5.3. Mode opératoire :
La prise d’essai dépend de la charge de l’échantillon, elle dépend de l’origine d’échantillon industrielle
ou urbain, de la couleur, de l’odeur et de la charge en MES.
- Prendre une prise d’essai d’après la charge de l’échantillon.
- Mettre l’échantillon dans les flacons bien propres de l'appareil BOD Trak contenant un agitateur
magnétique.
- Placer la cupule contenant environ 0,4g d’hydroxyde de lithium dans le goulot de chaque flacon.
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- Fermer les flacons avec des OXITOP et mettre les flacons dans l’enceinte et laisser agiter pendant 5
jours.
Pour une prise d’échantillon, le système de mesure OXITOP donne directement la teneur en oxygène
(après 5 jours) qu’on multiplie par le facteur déterminé à partir du tableau 3.

DBO5 en mg d’O2/l = lecture au bout des 5 jours* facteur

Tableau 3. Selection de volume d’echantillon d’ après la gamme de DBO5

Volume d’echantillon(ml) Plage de mesure (mg/l) Facteur

432 0-40 1
365 0-80 2
250 0-200 5
164 0-400 10
97 0-800 20
43,5 0-2000 50
22,7 0-4000 100

Un inhibiteur : en chimie, un inhibiteur est un composé dont l'action est d'inhiber (c'est-à-dire de ralentir
fortement voire arrêter) une réaction chimique1, c'est-à-dire qu'il agit de manière plus ou moins importante
sur la vitesse de réaction (facteur cinétique).
Un agitateur : est un équipement de laboratoire ayant pour but d'assurer l'homogénéisation d'un milieu
(homogénéisation du point de vue des composants du milieu et/ou de la température).
Il existe différents types d'agitateur en fonction du milieu, de la configuration de l'unité et de l'effet désiré.
Au laboratoire, l'agitation d'une solution peut être réalisée par une baguette de verre qui permet de remuer
une solution dans un récipient. L'agitation est dite manuelle.

Moderne et simple d'utilisation, l'OxiTop®-i est un instrument pour mesurer la demande biochimique en
oxygène (DBO). Les mesures peuvent s'effectuer sur une période allant de 1 à 7 jours. Le menu permet de
sélectionner le volume d'échantillon. La conversion en la valeur de DBO correspondante est confortable :
elle est automatique, sans risque d'erreur. Une petite diode électroluminescente indique le niveau de batterie
de la tête du capteur. Les têtes sont de conception moderne; disponibles en deux coloris distincts et dotées
d'un code échantillon numérique ajustable, elles permettent de distinguer les valeurs d'entrée et de sortie.
 Nul besoin de convertir les données - saisie directe du volume d'échantillon
(au choix parmi 22,7 / 43,5 / 97,0 / 164 / 250 / 365 / 432 ml)
 Résultats extrêmement fiables - affichage de la courbe sur la tête du capteur
 Informations complètes - valeurs intermédiaires disponibles à tout moment
 Plage de pression : 500 - 1250 hPa
 Période de mesure : 1 à 7 jours
 Plage de mesure de la BDO: 0 à 4000 mg/L
L'écran moderne, à cristaux liquides et rétroéclairé, étaie la saisie et fournit diverses informations :
• affichage de la courbe
• sélection du volume de l'échantillon
• accès à des valeurs intermédiaires
Différents sets à disposition, y compris plateformes d'agitation et accessoires:
• 6 ou 12 postes de mesure
• Plateformes d'agitation inductives, avec fonctionnement commandé par programmation
• Deux fioles jaugées à débordement, pour une mesure à l'entrée et une à la sortie
• Absorbant de CO2 et inhibiteur de nitrification sont inclus

DBO(5), ®-i, WTW

Système de mesure respirométrique OxiTop® pour les mesures d'autocontrôle de la DBO(5) avec
échantillons non dilués (plage de mesure jusqu'à 4000 mg/l de DBO(5)).

Appareil OxiTop contenant un agitateur magnétique. INCUBATEUR

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Lien des vidéos :

1) https://www.youtube.com/watch?v=E53ivBrcVes
2) https://www.youtube.com/watch?v=jUFE4iG3PRM