Pompe pneumatique directe

une pression élevée est exercée sur le solvant directement

par un gaz sous haute pression
le gaz est obtenu à partir d’un cylindre à travers un
régulateur à haute pression

sortie du
solvant
Pour ce système:
entrée • il n’y a pas de fluctuations de
du gaz
pression (« pulse »)
• système simple et à prix modéré
• maintenance aisée
solvant • capacité du réservoir limitée
repère de
• problème majeur: introduction de
niveau
gaz dans le solvant

MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 2
 Pompe à seringue commandée

le piston de la seringue est commandé par un moteur qui

permet de contrôler son mouvement
il n’y a pas de pulsations de la pression
le réducteur permet d’obtenir des débits très faibles mais
précis a- seringue
le volume du réservoir est limité b- joint
d’étanchéité
c b a
g c- piston
d d- réducteur
e- moteur
f- arrivée du
e f solvant
g- sortie de
solvant
MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 3
 Pompe à piston

c’est l’un des systèmes de pompage les plus utilisés en

C.L.H.P.

d a- moteur
g
c b- transmission

b c- joint d’étanchéité
d- piston
f
e- entrée solvant
f- clapets d’entrée et
de sortie
a e g- sortie solvant

MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 4
MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 6
MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 7
Fonctionnement de la vanne d’injection pour C.L.H.P. à 6 voies avec
boucle d’échantillonnage

position « load » position « inject »

échantillon échantillon
sortie sortie

boucle

colonne colonne
phase mobile phase mobile

MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 8
MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 9
Silices greffées commerciales (a) : silices apolaires (alkyle)
Longueur des Nom Fonction dp(µm)
Chaînes greffée
hydrocarbonnées
Micropack CH Octadécyle 10
Micropack Octadécyle 10
MCH
Partisil ODS-1 Octadécyle 10
ODS-2
ODS-3
Nucléosil C18 Octadécyle 5,10
Longues Hypersil ODS Octadécyle 7
µ Bondapak C18 Octadécyle 10
Sphérisorb ODS Octadécyle 3, 5, 10
Lichrosorb RP 18 Octadécyle 5, 10

MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 11
 R-SIL-C18LL Octadécyle 5, 10

R-SIL C18HL Octadécyle 5, 10

Ultrasphère-ODS Octadécyle 5

Sphérosil Octadécyle 5-7

Normatom-C18

Zorbax ODS Octadécyle 6_8

Chromosorb LC-7 Octadécyle 5, 10

MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 12
 Nucléosil C8 Octyle 5, 10

Lichrosorb RP8 Octyle 5, 10

Intermédiaires µ Bondapak Phényle 10

phényl
R-SIL C8 Octyle 5, 10

Zorbax C8 Octyle 6-8

R-SIL phényl Phényle 5,10

Hypersil SAS 7

Courtes Lichrosorb RP2 Diméthyle 5, 10

R-SIL-C3 Propyle 5, 10
R-SIL-C3Cl Propyle 5, 10
MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 13
 (b) : silices polaires
Polarité Nom Fonction dp(µm)
greffée
Faible Nucélosil Diméthylamin 5, 10
NMe2 o
Lichrosorb Dialcool 10
DIOL
Nucléosil-NO3 Nitro 5, 10
R-SIL-NO2 Nitro 5, 10
Micropak CN Nitrile 10
µ Bondapak Nitrile 10
CN
Chromosorb Nitrile 5, 10
LC-8
Nucléosil CN Nitrile 5, 10
R-SIL-CN Nitrile 5, 10
Partisil 10 PAC Nitrile
MASTER / HPLC
10
Pr : A . Dari 30/11/2017 14
 Sphérisorb CN Nitrile 5

Zorbax-CN Nitrile 6-8

Hypersil APS Amino-propyle 7

Lichrosorb NH2 Amino 10

Micropak NH2 Amino-propyle 10

Forte µ Bondapak Amino 10

NH2
Nucléosil NH2 Amino 5,10

R-SIL-NH2 Amino 5, 10

Zorbax-NH2 Amino 6-8

MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 15
Série éluotropique Force Eluante eo Viscosité Indice de Longueur d'onde Point
(*) réfraction d'ébullition

Solvant Silice Alumine (cP) à 20°C) à 20°C minimale (nm) (°C)

Hexane 0 0 0,31 1,375 190 68,7

Isooctane 0,01 0,01 0,50 1,391 190 99,2
Tétrachlorure de 0,11 0,18 0,97 1,460 263 76,8
carbone 0,22 0,28 0,37 1,368 220 69
Ether isopropylique 0,22 0,29 0,33 1,378 230 34,8
Chlorure d'isopropyle 0,26 0,40 0,57 1,446 245 61,2
Chloroforme 0,32 0,42 0,44 1,424 233 39,8
Chlorure de 0,35 0,45 0,55 1,408 212 66
méthylène 0,38 0,58 0,45 1,372 256 77,1
Tétrahydrofuranne 0,49 0,63 1,32 1,422 218 101,3
Acétate d'éthyle 0,50 0,65 0,37 1,344 190 81,6
Dioxanne 0,63 0,82 2,3 1,378 190 82,4
Acétonitrile 0,73 0,95 0,6 1,329 190 64,7
Isopropanol > 0,73 > 0,95 1 1,333 100
Méthanol > 0,73 >0,95 1,22 1,372 117,9
Eau
Acide acétique

(*) La force éluante des solvants est mesurée par rapport au pentane pour
lequel on a fixé arbitrairement une force éluante nulle. Certains alcanes
fluorés (peu utilisés) ont une force éluante négative.

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Pr : A . Dari 30/11/2017 16
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Pr : A . Dari 30/11/2017 17
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Pr : A . Dari 30/11/2017 18
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Pr : A . Dari 30/11/2017 19
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Pr : A . Dari 30/11/2017 20
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Pr : A . Dari 30/11/2017 21
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Pr : A . Dari 30/11/2017 22
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Pr : A . Dari 30/11/2017 23
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Pr : A . Dari 30/11/2017 26
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Pr : A . Dari 30/11/2017 27
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Pr : A . Dari 30/11/2017 28
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Pr : A . Dari 30/11/2017 30
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Pr : A . Dari 30/11/2017 31
 Détecteur fluorimétrique

Après excitation de l’échantillon dans la gamme UV,

on mesure la fluorescence restituée.
Méthode très sensible, qui permet de détecter 1 seule
molécule.
Détecteur électrochimique

Réactions d’oxydoréductions qui produisent un

courant proportionnel à la concentration du soluté.
Applications : drogues, polluants, produits naturels.

MASTER / HPLC
Pr : A . Dari 30/11/2017 32
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Pr : A . Dari 30/11/2017 33
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Pr : A . Dari 30/11/2017 34
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Pr : A . Dari 30/11/2017 35
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Pr : A . Dari 30/11/2017 36
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