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Centre Universitaire Nour Bachir

Faculté des sciences


Département S.N.V.
Master 2 Biotechnologie microbienne
Module d’Ecologie microbienne

TP N°=04

Mesure des activités PGPR :

1. La production de cyanure d'hydrogène (HCN)

La capacité des isolats à produire de l’HCN a été mesurée en utilisant la méthode de Lorck
(1948) sur le milieu HCN (agar nutritif additionné de 4,4 g de glycine/L) inoculé avec de la culture
bactérienne. Du papier Whatman 09 cm de diamètre imprégnés avec une solution de picrate de
sodium (acide picrique à 5% et de carbonate de sodium à 2%) a été déposé sur le couvercle de la
boîte de Pétri, puis scellée avec du parafilm et incubé à 30'C / 4 h. Le développement d’une couleur
orange à rouge indique la production de HCN.

2. La production de NH3

La production de NH3 a été évaluée sur de l'eau peptonée inoculées avec 100 µL de culture
bactérienne (Cappuccino and Sherman, 1992) et incubés à 30'C / 48 h. Si l'addition de 0,5 ml du
réactif de Nessler donne une couleur jaune à brun, cela indiqué la production de NH3.

Lork H. 1948. Production of hydrocyanic acid by bacteria . Physiol plant. 1: 142-146.


Cappuccino J.C. and Sherman C. 1992. Microbiology: a laboratory manuel. 3 rd Edn.
Benjamin/cummings Pub. Co., New York, USA. ISBN-13:9780805310528, pp:125-179