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Capilar
Dados:
H Li 600 pm
Li
Na Na 500 pm
K
Rb
K 300 pm
Cs
Fr
Rb 250 pm
Rb K Na Li
- -- - --
- -- - - --
- - --
- - -- - -- +
- -- - --
- -
- - - -- - --
- - - - --
Sinal do detector
Tempo
Sabendo que as massas moleculares são:
0
2 7 12 17 22
Tempo, min
MM = 103,36885 = 2338
Mecanismo de Ogston Mecanismo de
reptation
Detecção
Computador
Capilar
Eletrodo Eletrodo
Eletroferograma
Recipiente de Recipiente de
eletrólito eletrólito
amostras
eletrólitos de corrida
+
varia entre um líquido
viscoso e um “sólido”
Gel
Géis Géis
Substituíveis Fixos
(Físicos) (Químicos)
Gel Químico Gel Físico
30 milhões de pratos/ m
Problemas associados aos géis fixos de
poliacrilamida:
Por quê?
• Alquilcelulose
• Dextran
• Polioxietileno
• Galactomanan
• Outros
• UV/Vis;
• Espectroscopia de Massas;
Proteínas
Polissacarídeos
Polímeros sintéticos
Condição desnaturante:
uréia (7 a 9 mol L-1)
A ordem de migração é dada pelo número
de bases
Exemplo: sequenciamento de DNA
69 85 97
ME
Após a desnaturação
Massa Molecular
30000
14400
97000
45000 66000
20100
10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 min
6
y = 0,0631x + 3,3248
lo g M M
2
5 R = 0,9943
4
3
8 12 16 20 24 28
Tempo, min
9 Tipos de analitos usualmente
analisados por eletroforese capilar em
gel;
9 Mecanismos de separação e a
influência do campo elétrico;