2018-

2019

Tp01 :Germes totaux

B2 :BENDRIHEM AYMEN SALAH & ATIME LOQMAN

ENPC |
Principe :
Ensemencement d’un échantillant par mélange à un milieu de culture défini
,dans une boite de pétri.
Incubation de la boite ensemencée à 37°C+ ou – 1°C durant 24,48 ou 72 H
Calcul du nombre de micro-organisme par millilitre d’échantillon à partir du
nombre de colonies obtenus dans la boite de pétri.

Appareillage et verrerie :
a-Etuve ou enceinte thermostatée à 37 °C
b-Boites de pétri
c-pipettes
d-Bain d’eau thermostatée.
Milieu de culture
.Gélose nutritive

Mode opératoire :
Avant de commencer l’analyse , afin d’éviter toute attente au moment de
couler la gélose faire fondre complétement le milieu au bain d’eau bouillante
Refroidir au bain d’eau à 47 °C + ou – 2°C et maintenir à cette température
jusqu’au moment de l’utilisation de l’échantillon
- Ensemencement -
Agiter vigoureusement l’échantillon afin d’obtenir une préparation homogéne
de micro-organismes
Transférer immédiatement à l’aide d’une pipette stérile dans une boite de pétri
la prise d’essai de 1ml d’échantillon
Dans la boite de pétri ainsi ensemencée couler la milieu nutritif fondu
Mélanger l’inoculum et la milieu de façon à obtenir une répartition homogène
des colonies et laisser se solidifier en posant la boite de pétri sur une surface
horizontale et stérile.
 - Incubation -
Retourner la boite de pétri préparée et la placer dans l’étuve à 37°C pendant
48H à 72H
- Dénombrement des colonies-
Après 48H ou 72H compter le nombre de colonies et déterminer le nombre de
bactéries par ml d’eau

Répondre aux questions

1-On a choisi la gélose nutritive pour mettre les germes dans des bon
conditions de reproduction en assurant les sources du Carbon et de l’azote.
2-on a utilisé la méthode d’inondation
Les autres méthodes : Strie -incorporation
3-On a trouvé 110 colonies dans 1ml d’eau dilué 10 foie donc il y a1100 ufc
(unité formatrice colonie) dans 1ml d’eau de robinet donc presque il y a 1100
germes/ml.
4- selon les normes algériennes pour que l’eau soit potable il faut exister moins
de 10 germes dans 1ml
Et comme on 1100 germes alors que l’eau de robinet utilisée n’est potable.