TD- Détermination de la concentration isotonique d’une solution.

Abaissement cryoscopique

Détermination de la concentration isotonique d’une solution. Abaissement

cryoscopique
La difficulté de la mesure directe de la pression osmotique a conduit les expérimentateurs à
l’évaluer indirectement. On préfère déterminer l’abaissement du point de congélation qui, comme
la pression osmotique, varie avec le nombre de particules dissoutes (ions et molécules).

C’est ainsi que la pharmacopée définit l’osmolalité :

𝜀𝑚=𝑣𝑚ɸ

𝑣: nombre théorique d’ions (si le produit n’est pas ionisé = 1) ;

m : molalité ou nombre de moles de soluté par kg de solvant.

𝐶𝑔/𝑘𝑔
m= 𝑀

ɸ:coefficient osmotique molal, c’est-à-dire le facteur de correction pour tenir compte du degré de
dissociation des molécules non ionisées (pour NaCl à la concentration isotonique, il est égal à
0,925 environ). Pour les molécules non ionisées comme le glucose, ɸ =1.
L’unité est l’osmole et son sous-multiple la milliosmole.
Pour les solutions, il est possible de raisonner en osmolarité, en exprimant la molalité par litre de
solvant.

L’osmolalité est reliée à l’abaissement cryoscopique par la relation :

𝜀 ∆𝑡 × 1000𝑚𝑜𝑠𝑚𝑜𝑙/𝑘𝑔
𝑚=
1.86

L’abaissement cryoscopique, ou abaissement du point de congélation est défini par la loi de Raoult
(1878) :

∆𝑡 = −𝐾𝑖(𝐶; 𝑀)

i:constante d’ionisation = 𝑣 × ɸ

On admet actuellement que l’abaissement cryoscopique du plasma, comme celui d’une solution
isotonique de 9 ‰ de chlorure de sodium, est égal à − 0,52 °C.
Celui-ci est mesuré à l’aide d’un cryoscope ou d’un osmomètre qui, par refroidissement,

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permettent de déterminer le point de congélation de la solution considérée.

L’iso-osmolalité au plasma coïncide avec un comportement isotonique des solutions, c’est-à-dire
laissant intactes des hématies dans la technique de contrôle exposée ci-dessous.
D’après la loi de Raoult, une milliosmole par kg donne un abaissement de−0.00186o. Dans une
solution isoosmolaire, on doit donc avoir approximativement :
(0.52:0.00186)= 279𝑚𝑖𝑙𝑙𝑖𝑜𝑜𝑠𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑝𝑎𝑟 𝑘𝑔
ou, approximativement, par litre de solution (0,279 osmoles ‰).

Appliquons ceci par exemple au glucose (PM 180) :

0.279× 180 = 50.2‰

Valeur expérimentale au cryoscope : 50,5 ‰.

La différence est négligeable, la concentration choisie dans la pratique est de 50 ‰. Pour le
glucose, un comportement isotonique est observé de 50 à 100 g/kg, en raison de sa diffusibilité à
travers les membranes cellulaires.
Pour le chlorure de sodium, il faut tenir compte de l’ionisation :
(0,279× 58,5 : 1,85) × 8,82%
Valeur expérimentale : 9 ‰ (concentration isotonique).
Il est à noter que si la valeur de i n’avait pas été connue, il aurait été possible de diviser par 2 au
lieu de 1,85 ce qui aurait donné : 8,16 ‰. Ce chiffre reste dans des limites acceptables.
Ajustement de l’isotonie des solutions injectables
L’ajustement de l’isotonie est à envisager lorsqu’on a une solution de principe actif hypotonique,
c’est-à-dire contenant moins de 279 milliosmoles.
Il suffit alors d’ajouter des milliosmoles de chlorure de sodium en quantité suffisante pour atteindre
ce chiffre. Le chlorure de sodium est l’isotonisant le plus classique, mais on peut aussi avoir
recours à un autre sel ou à un sucre comme le glucose, en cas d’incompatibilités.
Plusieurs méthodes de calculs sont proposées. Elles reviennent toutes à l’une des deux alternatives
suivantes :
- déterminer le nombre de milliosmoles présentes dans la solution à isotoniser et compléter avec
le nombre de milliosmoles d’isotonisant nécessaire pour avoir finalement une concentration de
279 milliosmoles par kg de solution ;

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- mesurer avec un cryoscope ou un osmomètre, l’abaissement cryoscopique de la solution à

isotoniser et ajouter la quantité d’isotonisant juste nécessaire pour atteindre un abaissement de
0,52°C. On détermine au préalable l’abaissement cryoscopique d’une solution à 1 % d’isotonisant.
Après détermination par le calcul, il est recommandé de contrôler le ∆t de la solution obtenue à
l’aide d’un cryoscope ou d’un osmomètre. Le calcul ne donne que des valeurs approchées surtout
lorsque le degré de dissociation des molécules n’est pas connu.
Lorsqu’on désire à la fois isotoniser et tamponner une solution hypotonique, on peut avoir recours
à une solution de sels tampons dont on connaît soit l’abaissement cryoscopique, soit la
concentration en milliosmoles.
a) La méthode d’abaissement cryoscopique
Ce pourcentage d’excipient (m/v) à ajouter peut etre calculée grâce à la formule suivante :
𝟎.𝟓𝟐−∑ 𝐂%𝐏𝐀𝐢×∆𝐓𝐏𝐀𝐢
% Excipient (m/v)=
∆𝐓𝐄𝐗
0.52= abaissemlent cryoscopique en dergré du liquide lacrymal ou du plasma sanguin par rapport
à l’eau pure.
C% PAi=Concentration en % (m/v) du principe actif i dans la solution.
∆𝑇𝑃𝐴𝑖= abaissement cryoscopique en degré d’une solution à 1%(m/v) de principe actif par
rapport à l’eau pure.
∆𝑇𝐸𝑥𝑖= abaissement cryoscopique en degré d’une solution à 1%(m/v) d’excipient par rapport à
l’eau pure.
b) La méthode des équivalents de NaCl
Cette méthode utilise la notion d’équivalent de NaCl popur calculer la masse d’excipient
nécessaire pour rendre une solution isotonique.
L’équivalent de NaCl est défini comme la masse de NaCl qui produirait la même pression
osmotique qu’une masse de 1g de principe actif lors de la préparation d’une solution isotonique.
L’équivalent de NaCl d’un principe actif est donné par sa valeur E NaCl
Exemple:
E NaCl du sulfate d’atropine=0.14
A volumes égaux, une solution contenant 1g de sulfate d’atropine neutre à la même pression
osmotique qu’une solution contenant 0.14g de NaCl.

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Pour connaitre les équivalents en NaCl des principes actifs en solution, il suffit d’appliquer la
formule suivante :

∑ 𝐍𝐚𝐂𝐥 𝐬𝐨𝐥𝐮𝐭𝐢𝐨𝐧 = ∑ 𝒎𝑷𝑨𝒊 × 𝑬𝐍𝐚𝐂𝐥

mPAi= masse du principe actif i dans la solution (en g).

E NaCl PAi= nombre d’équivalent de NaCl du principe actif i (en g).
Exemple :
E NaCl du sulfate d’atropine=0.14
RP: sulfate d’atropine 10cg
Aqua ad 10ml
- E NaCl solution: 0.1g atropine sulfate neutre× 0.14𝑔NaCl
-La pression osmotique induite par 10cg de sulfate d’atropine neutre dans 10ml d’eau est égale à
la pression osmotique provoquée par 0.014g de NaCl dans 10ml d’eau.
Il suffit ensuite de soustraire la valeur des équivalents en NaCl des principes actifs en solution à
la masse de NaCl nécessaire pour obtenir une solution isotonique.
Exemple (suite) :
E NaCl solution = 0.014g NaCl= 14mg NaCl
m NaCl solution isotonique = 900mg NaCl/100ml=90mg/10ml
m NaCl à ajouter=90−14mg=76mg
Soit 100mg de sulfate neutre d’atropine, 76mg76mg de NaCl et Aqua q.s ad 10ml
c) La méthode de White et Vincent
La méthode de White et Vincent est une méthode dérivée de la méthode des équivalents de
NaCl.
Elle consiste tout d’abord à calculer le volume d’eau nécessaire qui, en dissolvant la quantité de
principe actif prescrite, permettra d’obtenir une solution isotonique.
Ce volume d’eau nécessaire en ml est donné par la relation suivante :
VH2O (ml)= ∑ 𝒎𝑷𝑨𝒊 × 𝑬𝐍𝐚𝐂𝐥 × 𝟏𝟏𝟏. 𝟏𝐦𝐥

mPAi= masse du principe actif i présent dans la solution (en g)

𝑬𝐍𝐚𝐂𝐥 = nombre d′ équivalentde de NaCl du principe actif i (en g)
111.1ml= Volume d’eau nécessaire pour obtenir une solution isotonique à partir de 1g de NaCl.
VH2O (ml)=0.1g sulfate d’atropine × 𝟎. 𝟏𝟒 × 𝟏𝟏𝟏. 𝟏𝒎𝒍 = 𝟏. 𝟓𝟔𝒎𝒍
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10cg de sulfate d’atropine neutre dissous dans 1.56ml d’eau donnent une solution isotonique
Il faut ensuite calculer le volume de solution de NaCl 0.9% à ajouter pour obtenir une solution
isotonique de volume désiré. On peut également calculer la masse de NaCl à ajouter dans le
volume total.
NaCl 0.9%= 10ml−1.56𝑚𝑙 = 8.44𝑚𝑙
m NaCl=0.9g/100ml× 8.44𝑚𝑙 = 0.076𝑔 = 76𝑚𝑔𝑁𝑎𝐶𝑙