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PROTEÍNAS TOTALES Y ALBÚMINA

MÉTODOS COLORIMÉTRICOS PARA LA DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES Y


ALBÚMINA EN SUERO

SIGNIFICACIÓN CLÍNICA: MUESTRA:


Las proteínas son compuestos macromoleculares Suero fresco libre de hemólisis. Si no es posible
que se encuentran disueltos en el plasma o suero y procesar la muestra en el día, la misma puede
que desempeñan funciones tales como: actúan en guardarse en congelador hasta una semana.
defensa contra agentes invasores formando los
anticuerpos; transportan metabolitos, hormonas y TÉCNICA OPERATORIA:
sustancias relativamente insolubles; actúan como
elementos estructurales y contribuyen a mantener la Para proteínas totales:
presión coloidosmótica del plasma.
Se observan hipoproteinemias en situaciones pipetear en tubos de ensayo:
patológicas tales como desnutrición, infecciones Blanco Standard
prolongadas y en casos de pérdidas renales. En Muestra
estos casos se observa también hipoalbuminemia . Agua destilada 50 ul --- ---
Las hiperproteinemias se presentan en casos tales Standard --- 50 ul ---
como el mieloma múltiple, y las hiperalbuminemias Muestra --- --- 50
ul
se relacionan con estados de deshidratación.
Sol. EDTA/Cu 3.5 ml 3.5 ml 3.5
ml
FUNDAMENTOS DEL METODO:
Mezclar por agitación suave e incubar 15 minutos a 37 Cº.
Las proteínas, al contrario de otros compuestos
Retirar los tubos del baño, dejar enfriar y leer en las
nitrogenados (por ej.: creatinina, urea, ácido úrico),
siguientes condiciones:
reaccionan en medio alcalino con el ión cúprico - long. de onda: 540 nm o filtro verde.
para dar un complejo de color violeta que se mide a - cero de abs.: agua destilada
540 nm y cuya intensidad de color es proporcional a - estabilidad del color: 12 horas
la concentración de proteínas totales en la muestra.
La albúmina del suero, en condiciones de pH Para Albúmina:
adecuado, tiene la propiedad de unirse a través de
puentes de hidrógeno y fuerzas de Van der Waals, a pipetear en tubos de ensayo:
ciertos colorantes o indicadores como el verde de Blanco Standard
bromo cresol, formando complejos coloreados cuya Muestra
intensidad de color es proporcional a su Standard --- 10 ul ---
concentración en la muestra. Muestra --- ---- 10 ul
Sol. VBC 3.5 ml 3.5 ml 3.5 ml
REACTIVOS PROVISTOS: Mezclar por agitación suave y dejar los tubos durante 10
Estos reactivos son para USO IN VITRO y estan minutos a una temperatura de entre 15 y 28 ºC.
listos para usar. Son estables a temperatura Leer en las siguientes condiciones:
ambiente hasta la fecha de vencimiento indicada en -long. de onda: 625 nm o filtro rojo.
el envase. -cero de absorbancia: agua destilada
♦ Solución EDTA/Cu: solución de ión Cu (II) de 15 -estabilidad del color: 20 minutos.
mmol/l, EDTA 16 mmol/l, NaOH 1 mmol/l y
tensioactivo. CALCULO DE RESULTADOS :
♦ Solución VBC: solución de VBC en buffer de
acetato y tensioactivo. * Proteínas Totales:

PRESENTACION: P.T.g/dl= P.T.g/dl (standard) . A muestra


# PROTEINAS TOTALES: envase conteniendo 250 ml A standard
de solución EDTA/Cu. * Albúmina:
# ALBUMINA: envase conteniendo 250 ml de
solución de VBC. Alb. g/dl= Alb.g/dl (standard) . A muestra
A standard

SOCIEDAD DE BIOQUÍMICOS DE SANTA FE. AVENIDA URQUIZA 2657 -3000 SANTA FE.TE/FAX (0342) 455 2708 .
e-mail: sbstafe@ceride.gov.ar
VALORES DE REFERENCIA :
Estos valores corresponden a personas adultas
sanas con alimentación mixta normal:

* Proteínas Totales: 6.3 a 8.1 g/dl (63 a 81 g/l)

* Albúmina: 3.5 a 4.8 g/dl (35 a 48 g/l)

RENDIMIENTO ANALÍTICO :
* Imprecisión: al hacer replicados de la misma
muestra en distintos días, se obtuvieron
coeficientes de variación del órden de ± 0.51 % para
la determinación de proteínas totales y del órden de
1.5 % para la determinación de albúmina.
* Linealidad: la reacción para proteínas totales es
lineal hasta 12 g/dl y la reacción para albúmina es
lineal hasta 6 g/dl.
* Especificidad: en la reacción para proteínas
totales no se observa interferencia por hemólisis
ligera y bilirrubina hasta 100 mg/l y en la reacción
para albúmina no se observa interferencia por
hemólisis ligera y bilirrubina hasta 200 mg/l.

OBSERVACIONES :
* En la determinación de proteínas totales la
turbidéz que puede observarse en los tubos durante
la incubación se debe al tensiactivo del reactivo y
desaparece luego de unos minutos a temperatura
ambiente.
* En la determinación de albúmina el factor para los
cálculos puede utilizarse si se respeta la
temperatura de reacción (15-28 ºC).

BIBLIOGRAFÍA :
• Doumas B. ; Watson W.; Biggs H.; Clin. Chim. Acta
31 (1971).
• Webster D.; Bignell A.; Atwood E.; Clin. Chim. Acta
53 (1974).
• Porntip H.; Charoenpol W.; Clin. Chem. 20/5 (1974).